Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
  • Določanje estrogenske aktivnosti odpadnih vod s testom YES [Elektronski vir] = Detecting estrogenic activity of wastewaters by YES assay
    Bistan, Mirjana ; Marinšek-Logar, Romana, 1960- ; Tišler, Tatjana
    Prisotnost spojin z estrogenskim delovanjem v odpadnih vodah predstavlja perečproblem povsod po svetu, tudi v Sloveniji. Spojine z estrogenskim delovanjem najdejo pot v površinske in podzemne vode ... preko komunalnih in industrijskih odplak, izjeme pa niso niti netočkovni viri onesnaževanja, kot so npr. kmetijske površine. Na čistilnih napravah se estrogensko aktivne spojine s procesi čiščenja odpadnih voda ne odstranijo popolnoma iz vod, ki senato izlivajo v vodotoke. Njihova prisotnost v vodotokih tako vpliva na hormonsko ravnovesje ter posledično na razvoj, razmnoževanje in obnašanje organizmov, ki živijo v vodotokih za iztoki odpadnih vod. V naši raziskavi smopreverjali prisotnost estrogensko aktivnih spojin v odpadnih vodah z biološkim testom, t.i. testom YES. V testu YES uporabljamo sev gensko spremenjene kvasovke Saccharomyces cerevisae, ki ima v kromosomu vgrajen človeški receptor za estrogen. Ob prisotnosti estrogensko aktivnih spojin se kvasovka odzove z izražanjem reporterskega gena lacZ, katerega aktivnost nato sledimo sprektrofotometrično preko razgradnega produkta. Vzorce odpadnih vod smo odvzeli na vtoku in iztoku dveh čistilnih naprav. Na obe čistilni napravi dotekata tako komunalna kot tudi industrijska odpadna voda. Predobdelava vzorcev pred izpostavitvijo kvasovkam je vključevala centrifugiranje, filtracijo in ekstrakcijo (SPE) na kolonah Oasis HLBr. Elucijo smo izvedli z metanolom. Sledilo je preverjanje prisotnosti estrogenske aktivnosti različno koncentriranih vzorcev odpadnih vod s testom YES. Ob izpostavitvi kvasovk visokim koncentratom odpadnih vod smo zaznali zaviranje rasti kvasovk, predvsem ob izpostavitvi kvasovk visokim koncentratom vtokov. Pri vzorcih, kjer smo zaznali zaviranje rasti manjše od 50 %, smo izračunali estrogensko aktivnost (EA), izraženo kot aktivnost ß-galaktozidaze, in relativno estrogensko aktivnost (REA), primerjano na standard naravnega estrogena 17ß-estradiola. Pri najvišjih koncentratih obeh vtokov odpadnih voda smo zaznali zaviranje rasti kvasovk, ki je presegalo 50 %, zato REA nismo določili. Na iztokih obeh čistilnih naprav pa zaviranja rasti ni bilo zaznati,tudi pri najvišjih koncentratih ne, zato smo REA lahko določili. Po dekonjugaciji, ki smo jo izvedli s pomočjo encima ß-glukoronidaza in s katero smo neaktivne konjugirane estrogene hormone spremenili v aktivno (nekonjugirano) obliko, smo ugotovili za 10 do 30 % povečano estrogensko aktivnost pri vseh vzorcih. Iz dobljenih rezultatov lahko zaključimo, da so tudi v slovenskih odpadnih vodah prisotne estrogensko aktivne spojine, ki jih lahko sledimo z relativno enostavnim biološkim testom.
    Type of material - conference contribution
    Publish date - 2010
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 4526106