Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
  • Optimizacija mehanske izolacije stromalnih žilnih celic iz človeškega maščobnega tkiva = Optimisation of stromal vascular cells mechanical isolation from human adipose tissue : magistrska naloga
    Jakovljević, Kaja
    Pri celični terapiji se za popravilo okvar oz. poškodb pogosto uporabljajo matične celice. Od leta 2001 je znano, da mezenhimske matične celice (ASC, ang. adipose-derived stem cells) najdemo tudi v ... maščobnem tkivu. To sestoji iz adipocitov, ki predstavljajo tretjino celic, in frakcije stromalnih žilnih celic (SVF, ang. stromal vascular fraction), v kateri so prisotne tudi ASC. Uporabljajo se za celjenje ran, kroničnih razjed in fistul, pri kozmetičnih operacijah in za zdravljenje radiacijskih poškodb. Trenutno ASC rutinsko pridobivajo iz SVF z minimalno invazivnim postopkom podkožne lipoaspiracije in sledečo encimsko obdelavo s kolagenazo. Postopek je problematičen, ker so ostanki encima škodljivi za regeneracijo kože in tkiv, poleg tega pa je uporaba encimov pravno strogo regulirana. Zato se kot alternativa proučujejo mehanske metode, med katerimi je osnovna centrifugiranje. V tem magistrskem delu smo raziskali učinkovitost mehanske izolacije stromalnih žilnih celic iz človeškega maščobnega tkiva, ki predstavlja alternativo metodi centrifugiranja. Preverili smo, kako na učinkovitost izolacije vplivata oblika povezovalnega priključka in število potiskov skozi brizgo. Primerjali smo dva priključka različne oblike ter 15, 30 in 60 potiskov. Kontrolni eksperiment je uporabljal zgolj centrifugiranje. Uspešnost postopka smo ocenili z analizo parametrov pridobljenih celic. Merili smo število celic in klonogeni potencial pridobljenih celic. Nato smo preverili še sposobnosti pridobljenih celic za diferenciacijo z gojenjem v adipoindukcijskem in osteoindukcijskem gojišču. Diferenciacijo v adipoindukcijskem gojišču smo ovrednotili z barvanjem z barvilom Oil Red O, ki obarva lipidne vakuole. Diferenciacijo v osteoindukcijskem gojišču smo spremljali z merjenjem koncentracije kalcija, ki so ga celice izločile. Ugotovili smo, da lahko optimiziramo mehanični postopek izolacije SVF. V primerjavi s centrifugiranjem smo dosegli do 93-krat večji izkoristek. Encimska metoda razgradnje pa je imela še vedno 16-krat večji izkoristek od optimizirane mehanske razgradnje. Celice, pridobljene z optimiziranim mehanskim postopkom so sicer imele nekoliko slabše fenotipske lastnosti, a so kljub temu izkazovale enako sposobnost diferenciacije kakor tiste, izolirane z encimsko izolacijo.
    Type of material - master's thesis ; adult, serious
    Publication and manufacture - Ljubljana : [K. Jakovljević], 2021
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 63680771

Library/institution City Acronym For loan Other holdings
Faculty of Pharmacy, Ljubljana Ljubljana FFALJ reading room 1 cop.
loading ...
loading ...
loading ...