Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
Faculty of Pharmacy, Lj. (FFALJ)
  • Sinteza in vrednotenje fluorescenčnih označevalcev lipidnih kapljic, primernih za mikroskopijo z vzbujenim praznjenjem emisije = Synthesis and evaluation of fluorescent labels for lipid droplets suitable for stimulated emission depletion microscopy : enoviti magistrski študijski program Farmacija
    Matoh, Blaž
    Fluorescenca je vrsta luminiscence, pri kateri fluorofor absorbira svetlobo določene valovne dolžine, kar povzroči, da fluorofor preide v vzbujeno stanje. Po določenem času (nekaj nanosekund), ... fluorofor emitira foton in spontano preide nazaj v osnovno stanje. Ta fenomen izkoriščamo pri fluorescenčni mikroskopiji, ki je nepogrešljivo orodje pri praktično vseh bioznanostih. Nadgradnja fluorescenčne mikroskopije je mikroskopija z vzbujenim praznjenjem emisije (STED), saj lahko z njo opazujemo veliko manjše strukture nanometrskih velikosti. Fluorofori, ki se uporabljajo za super resolucijsko tehniko STED, imajo posebne lastnosti, saj morajo biti fotostabilni, imeti morajo ustrezni absorpcijski in emisijski spekter, ter specifično označit strukture, ki jih želimo opazovati. Namen magistrske naloge je bil razvoj sinteze novih merocianinov (derivatov kumarina) z namenom, da bi jih s strukturnimi spremembami pretvorili v dobre označevalce lipidnih kapljic, ter izboljšali lastnosti za mikroskopijo z vzbujenim praznjenjem emisije (STED). Nekaj tovrstnih označevalcev so že sintetizirali na Fakulteti za farmacijo, vendar so bili izkoristki nizki, tudi zaradi nastanka stranskih produktov. Poleg tega smo želeli raziskati kako različne elektron-privlačne in elektron-donorske skupine vplivajo na fotofizikalne lastnosti načrtovanih sond. Zato smo se lotili sintezne poti drugače in pripravili 8 novih fluorescenčnih sond, katerim smo pomerili ekscitacijski in emisijski spekter. 5 pripravljenih sond (7, 9, 11, 12 in 14) je imelo ustrezne spektralne lastnosti, da smo z njimi nadaljevali eksperimente na STED mikroskopu na Inštitutu Jožefa Stefana (IJS). S pripravljenimi sondami smo inkubirali celice celične linije LA-4. Glede na lastnosti označevanja podobnih sond, smo pričakovali, da bodo naše sonde označile lipidne kapljice. To so relativno neraziskani celični organeli, ki pa so nedvomno vpleteni v razvoj določenih rakavih in infekcijskih bolezni. Po eksperimentih na STED mikroskopu smo ugotovili, da pripravljene sonde niso izkazovale citotoksičnosti, po fotostabilnosti pa je izstopala sonda 11. Vendar pa nobena izmed sond ni zadovoljivo označevala lipidnih kapljic, ker so sonde nespecifično označevale druge organele znotraj celice.
    Type of material - master's thesis ; adult, serious
    Publication and manufacture - Ljubljana : [B. Matoh], 2024
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 200350723

Call number – location, accession no. ... Copy status Reservation
Knjižnica
emšf 0000000543 MATOH BLAŽ Sinteza 0000001408
IN: 0018208
Knjižnica
emšf 543 MATOH BLAŽ Sinteza 1408
IN: 0018208
available - reading room
loading ...
loading ...
loading ...