Sinteza in vrednotenje fluorescentnih sond za označevanje plazemske membrane živih celic, primernih za mikroskopijo z vzbujenim praznjenjem emisije = Synthesis and evaluation of fluorescent probes for live-cell plasma membrane labelling suitable for stimulated emission depletion microscopy : enoviti magistrski študijski program Farmacija
Esih, Hana
Super-ločljivostne mikroskopske metode, s katerimi lahko opazujemo strukture, manjše od uklonske limite, so korenito pripomogle k razumevanju celične in molekularne biologije. Mikroskopija z ...vzbujenim praznjenjem emisije (STED) kot ena izmed super-ločljivostnih metod nam omogoča opazovanje intraceličnih zgradb, preučevanje dinamike živih celic na nanometrski skali in omogoča vpogled v trenutno dogajanje, obnašanje in interakcije, ki jih pri fiksiranih celicah ne moremo opazovati. Fluorescentni označevalci, s katerimi označimo strukture, morajo ustrezati različnim kriterijem, da so primerni za mikroskopijo STED. Za selektivno označevanje plazemske membrane morajo sonde izkazovati še dodatne lastnosti, zato je ta nabor še toliko bolj omejen. V magistrski nalogi smo sintetizirali in analizirali sonde za selektivno označevanje plazemske membrane na osnovi kinolinskega skeleta in na osnovi kumarinskega skeleta, natančneje na osnovi sonde MePyr500. Slednja ima izvrstne foto-fizikalne lastnosti, a neselektivno označi vse celične membrane. Sondo smo modificirali z vpeljavo dodatnega naboja, ki po vgraditvi v plazemsko membrani prepreči prehod sonde v druge membrane celice. Pripravljene fluorofore smo analizirali s pomočjo spektroskopih metod in jim pomerili ekscitacijske in emisijske spektre. Želeli smo, da so sintetizirani označevalci svetli, stabilni, s čim večjim Stokesovim premikom in da hkrati specifično označujejo plazemsko membrano. Najbolj primerne sonde smo poslali na Institut Jožefa Stefana, kjer so preizkusili, kako označujejo celice in kakšne so njihove foto-fizikalne lastnosti, ko jih izpostavimo pogojem mikroskopije STED. Kot najbolj uspešna se je izkazala sonda kumarinskega tipa SHE 2n, ki zaradi dveh pozitivnih nabojev specifično označuje plazemsko membrano celic in je hkrati zelo foto-stabilna. Omogoča pridobivanje slik z odlično ločljivostjo in hkrati ni izkazovala toksičnih učinkov na celice, zato je smiselna nadaljnja sinteza njenih analogov in optimizacije reakcijskih pogojev. Sintetizirani analogi kinolinskih sond npr. SHE 1h niso primerni za STED nanoskopijo, saj nimajo dovolj emisije pri valovnih dolžinah STED laserja (775 nm) in zato ne omogočajo pridobivanja super ločljivostnih posnetkov. Poleg tega kinolinske sonde niso zelo selektivno označevale plazemske membrane.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [H. Esih], 2019
Knjižnica emšf 0000000543 ESIH HANA Sinteza 0000000747 IN: 0016278
Knjižnica emšf 543 ESIH HANA Sinteza 747 IN: 0016278
available - reading room
Shelf entry
Adding material to shelf was successful.
Adding material to shelf failed.
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
