Primerjava kinetično turbidimetrične metode z gelskopri določanju koncentracije endotoksinov v surovinah za farmacevtske izdelke = Comparison of kinetic turbidimetric method with gel clot for measuring concentration of endotoxins in materials used for pharmaceutical products : diplomska naloga
Rozman, Rok, farmacevt
Kljuène besedeČ pirogeni, bakterijski endotoksini, depirogenizacija, Limulus amebocitni lizat, CSE, uvajanje fotometriène metode, primerjava in ocena kinetiène metode z gelsko.Cilj farmacevtske ...proizvodnje je proizvodnja kakovostnih, uèinkovitih in pa varnih izdelkov. V Oddelku za biolosko kontrolougotavljamo ali so izdelki za parenteralno uporabo varni za bolnika. Pirogeni so snovi, ki izzovejo povisanje telesne temperature, èe pridejo v krvni obtok osebka. Najbolj pogosti povzroèitelji toksiènih reakcij so bakterijski endotoksini, saj je njihova pirogena aktivnost v primerjavi z veèino drugih pirogenov (virusi, glive..) mnogo visja. Prisotnost bakterijskihendotoksinov v farmacevtskih izdelkih kvantitativno doloèamo s kinetièno turbidimetrièno metodo, kvalitativno pa z gel-clot metodo. Obe metodi sta alternativi pirogenemu testu na kuncih, ki bazira na doloèanju prisotnosti pirogenov z merjenjem dviga telesne temperature kuncev po intravenozni aplikaciji testne raztopine. Dokazovanje bakterijskih endotoksinov temelji na encimski reakciji endotoksin-lizat. Reagent, ki ga porabljamo pri doloèanju prisotnosti endotoksinov, pridobivajo iz lizata amebocitov podkvastega raka Limulus polyphemus. Endotoksinski standard pa pridobivajo iz oèistkov bakterijske kolonije E.coli. Pri gel-clot tehniki doloèamo kolièino endotoksina na osnovi strjevanja LAL reagenta v prisotnosti endotoksina po enourni inkubaciji vzorca v epruvetah na 37oC. Po konèani inkubaciji epruvetke obrnemo za 180 in zapisemo rezultate - èvrsti gel oznaèimo (+), èe se gel ne formira, (-). Pri turbidimetrièni metodi raèunalniski program doloèi reakcijski èas, ki je potreben za porast absorbance za 50 mO.D. pri valovni dolzini 340 nm. Iz odèitkov izraèuna vse potrebne parametre od koeficienta korelacije, regresijske krivulje do koncentracije endotoksinov v farmacevtskem izdelku. Rutinsko testiranje izdelka zahteva, da izdelek najprej vkljuèimo v preliminarne teste, s katerimiugotovimo morebitne prisotne interference, jih odstranimo in izvedemo validacijo vzorca. V procesu priprave izdelka za rutinsko testiranje pa predhodno izdelku doloèimo naslednje parametreČ endotoksinsko limito, maksimalno veljavno redèitev (MVD), koncentracijo izdelka, s katero raèunamo MVD, pH reakcijske zmesi. Rezultate vzorcev, ki so validirani, ovrednotimo in jih, èe dosegajo vse zahteve (rezultati vzorca pod endotoksinsko limito, èim veèji varnostni faktor, èe ne pospesujejo ali zavirajo LAL-testa), pripravimo analizni postopek ter zaènemo z izvajanjem rutinskega testa. V nalogi smo rutinsko testirali 5 farmacevtskih izdelkov. Pri 4-ih izdelkih smo dokazali ustreznost uporabe kinetiène turbidimetriène metode, ki je hitrejsa, bolj obèutljiva in bolj natanèna od gelske tehnike. Rezultati so bolj sprejemljivi,saj imajo veèji varnostni faktor in so preglednejsi zaradi raèunalniske obdelave podatkov. Izjema je bila citronska kislina, ki ovira kvantitativni test in imajo rezultati manjsi varnostni faktor, vendar so ustrezni. Deset dni smo kontrolirali kakovost farmacevtskih vod v Krki, kjer smo zeleli prikazati biolosko kakovost vode med posameznimi fazami pridobivanje vod od komunalne vode do Vode za injekcije in dokazali ustreznostvodnega sistema v vseh fazah depirogenizacije. Vseh 5 izdelkov in farmacevtske vode danes lahko rutinsko testiramo z obema tehnikama.
Type of material - undergraduate thesis
Publication and manufacture - Ljubljana : [Rozman, R.], 2004
Knjižnica dp 615 Rozman Rok Primerjava IN: 0007600
available - reading room
Shelf entry
Adding material to shelf was successful.
Adding material to shelf failed.
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
