(UL)
-
Priprava plazmidnih vektorjev za izbitje in prekomerno izražanje gena FUBP3 = Preparation of plasmid vectors for overexpressing and knockout of the FUBP3 gene : magistrska naloga : magistrski študijski program Laboratorijska biomedicinaSrpčič, Anja, farmacevtka, 1996-V vsegenomskih asociacijskih študijah (GWAS) so do sedaj odkrili že več kot 150 genskih lokusov, povezanih z mineralno kostno gostoto. Ti genski lokusi predstavljajo potencialne označevalce za ... zgodnje odkrivanje osteoporoze ali pa potencialne nove tarče za zdravljenje. Eden izmed novo odkritih lokusov je enonukleotidni polimorfizem rs7851693 v intronu gena za FUBP3 (“Far upstream binding protein 3”). O vlogi proteina FUBP3 pri metabolizmu kosti ni še nič znanega. Zato smo v okviru magistrske naloge pripravili plazmidna konstrukta, s katerima bo v nadaljnjih študijah funkcijske genomike mogoče ovrednotiti vpliv spremenjenega izražanja gena FUBP3 na celične procese. Z metodo molekulskega kloniranja po Gibsonu smo sestavili plazmidni konstrukt za povečano izražanje gena FUBP3 (pFLAG-CMV-1-FUBP3) ter plazmidni konstrukt za izbitje gena FUBP3 s sistemom CRISPR/Cas9 (pX459-gRNA1-FUBP3). Za transfekcijo smo izbrali celični liniji HEK 293T, ki izvira iz človeških embrionalnih ledvičnih celic, in A549, ki izvira iz epitelijskih celic pljučnega adenokarcinoma. Po transfekciji konstrukta pFLAG-CMV-1-FUBP v celično linijo HEK 293T smo z metodo prenosa po westernu dokazali, da se izražanje proteina v celici poveča, kar kaže na uspešno pripravljen konstrukt. Spremembo, ki jo je v genomu celic HEK 293T povzročil vstavljeni vektor pX459-gRNA1-FUBP3 (metoda CRISPR/Cas9), smo ovrednotili z določitvijo nukleotidnega zaporedja tarčnega odseka genoma. Z metodo indirektne imunofluorescence smo določili lokalizacijo proteina v celicah. V celični liniji A549 se protein nahaja pretežno v citoplazmi. S plazmidnima konstruktoma, ki smo ju pripravili, smo postavili temelje za izvedbo različnih funkcijskih študij, na podlagi katerih bomo lahko lažje opredelili funkcijo gena FUBP3 in posledice njegove porušene regulacije.Type of material - master's thesis ; adult, seriousPublication and manufacture - Ljubljana : [A. Srpčič], 2021Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 89672195
Author
Srpčič, Anja, farmacevtka, 1996-
Other authors
Pečar Fonović, Urša |
Lovšin, Nika
Topics
Osteoporoza |
Farmakogenomika |
FUBP3 |
molekulsko kloniranje |
CRISPR/Cas9 |
genski lokusi |
polimorfizem rs7851693
Library | Call number – location, accession no. ... | Copy status |
---|---|---|
Faculty of Pharmacy, Lj. | Knjižnica mlab 616 SRPČIČ ANJA Priprava 282 IN: 0017160 |
available - reading room |
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
If the library membership card is not in the list,
add a new one.
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Srpčič, Anja, farmacevtka, 1996- | 57036 |
Pečar Fonović, Urša | 19170 |
Lovšin, Nika | 19649 |
Source: Personal bibliographies
and: SICRIS
Select pickup location:
Material pickup by post
Delivery address:
Address is missing from the member's data.
The address retrieval service is currently unavailable, please try again.
By clicking the "OK" button, you will confirm the pickup location selected above and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the above pickup location and delivery address, and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the address selected above and complete the reservation process.
Notification
Automatic login and reservation service currently not available. You can reserve the material on the Biblos portal or try again here later.
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Reservation in progress
Please wait a moment.
Reservation was successful.
Reservation failed.
Reservation...
Membership card:
Pickup location: