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El Nemer, W.; Gauthier, É.; Wautier, M.-P.; Rahuel, C.; Gane, P.; Galactéros, F.; Wautier, J.-L.; Cartron, J.-P.; Colin, Y.; Le Van Kim, C.
Transfusion clinique et biologique (Paris), 02/2008, Volume: 15, Issue: 1Journal Article, Conference Proceeding
Lutheran (Lu) blood group and Basal Cell Adhesion Molecule (BCAM) antigens are both carried by two glycoprotein (gp) isoforms of the immunoglobulin superfamily representing receptors for laminin α 5 chain. They are expressed in red blood cells, in endothelial cells of vascular capillaries and in epithelial cells of several tissues. Lu/BCAM gps are overexpressed in sickle red blood cells (SS RBCs). Stimulation of SS RBCs by epinephrine activates the PKA depending signaling pathway and induces reinforced Lu/BCAM-mediated adhesion to laminin10/11. We have analyzed the phosphorylation state of Lu/BCAM long isoform cytoplasmic tail and showed that it is phosphorylated by CKII, GSK3b and PKA. Phosphorylation of this isoform in transfected K562 cells is stimulated by effectors of the PKA pathway and induces cell adhesion to laminin10/11. Lu/BCAM gps are highly expressed in endothelial cells and exhibit potential integrin binding motifs. We showed that they interact with integrin α 4β 1, the unique integrin expressed on the surface of young reticulocytes. Adhesion assays under flow conditions showed that SS RBCs adhere to primary human endothelial cells (HUVEC) after selective activation of intergin α 4β 1 and that this adhesion is mediated by endothelial Lu/BCAM gps. Our studies show that Lu/BCAM gps expressed either on erythroid or on endothelial cells are involved in SS RBC-endothelium interactions and could play a role in the abnormal adhesion of SS RBCs to vascular endothelium contributing to the vaso-occlusive crises reported for sickle cell disease patients. Les glycoprotéines (gps) Lu/BCAM sont des molécules d’adhérence, récepteurs de la laminine 10/11, portant les antigènes de groupe sanguin Luthéran (Lu) et l’antigène tumoral basal cell adhesion molecule (BCAM). Elles sont exprimées dans les globules rouges (GR), les cellules endothéliales des vaisseaux capillaires et dans les cellules épithéliales de nombreux tissus. La stimulation des GR drépanocytaires (SS) par l’adrénaline induit une activation de la voie PKA et une adhérence renforcée à la laminine 10/11 médiée par le récepteur Lu/BCAM. Nous avons déterminé les états de phosphorylation de l’isoforme longue des gps Lu/BCAM in vitro et ex vivo. Cette isoforme est phosphorylée par les kinases CKII, GSK3β et PKA dans des cellules érythroleucémiques K562 et épithéliales MDCK transfectées. La phosphorylation de la gp Lu/BCAM est stimulée par des activateurs de la voie PKA et induit l’adhérence des cellules K562 à la laminine10/11. Les protéines Lu/BCAM sont fortement exprimées dans les cellules endothéliales et présentent un motif potentiel de liaison à l’intégrine α4β1. Nous avons montré qu’elles interagissent avec l’intégrine α4β1, unique intégrine exprimée à la surface des GR drépanocytaires jeunes. Des expériences d’adhérence en flux ont montré que les GR SS adhèrent aux cellules endothéliales primaires après activation sélective de l’intégrine α4β1 et que cette adhérence dépend en partie des protéines Lu/BCAM endothéliales. L’ensemble de nos travaux montrent que les protéines Lu/BCAM érythroïdes et endothéliales pourraient être impliquées dans l’adhérence anormale des GR SS à l’endothélium et contribueraient ainsi aux crises vaso-occlusives in vivo.
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