Healthcare-associated infections (HCAIs) in neonates are frequent and highly lethal, in particular those caused by extended spectrum beta-lactamase (ESBL) producing bacteria. We evaluated the beneficial effects of ultraviolet C (UV-C) disinfection and copper adhesive plating on HCAIs in the Neonatal Intensive Care Unit (NICU) of a third level paediatric hospital in Mexico City, both in combination of hand-hygiene (HH) and prevention bundles. All NICU patients were included. There were 4 periods (P): P1: HH monitoring and prevention bundles; P2: P1+UV-C disinfection; P3: P2+Copper adhesive plating on frequent-contact surfaces and P4: Monitoring of P3 actions. 552 neonates were monitored during 15,467 patient days (PD). HCAI rates decreased from 11.03/1000 PD in P1 to 5.35/1000 PD in P4 (p=0.006). HCAIs with bacterial isolates dropped from 5.39/1000 PD in PI to 1.79/1000 PD in P4 (p=0.011). UV-C and copper were associated with significant HCAI prevention (RR 0.49, CI95% 0.30–0.81, p=0.005) and with lesser HCAIs with bacterial isolates (RR 0.33, CI95% 0.14–0.77, p=0.011). Copper adhesive plating combined with UV-C disinfection were associated with a drop in HCAI rates and with the elimination of ESBL-caused HCAIs. Hence, we propose that these strategies be considered in MDRO proliferation preventions. Las infecciones asociadas a la atención a la salud (IAAS) en neonatos son frecuentes y altamente letales, en particular las causadas por bacterias productoras de BLEE. Se evaluaron los efectos de la desinfección por UV-C y las placas adhesivas de cobre sobre las IAAS en la unidad de cuidados intensivos neonatales (UCIN) de un hospital pediátrico de tercer nivel en la Ciudad de México, en combinación con higiene de manos (HM) y con paquetes de prevención. Se incluyeron todos los pacientes de la UCIN. Hubo 4 periodos (P): P1: monitorización de HM y paquetes preventivos; P2: P1 + desinfección con UV-C; P3: P2 + recubrimiento con placas de cobre en superficies de alto contacto y P4: monitorización de acciones de P3. Quinientos cincuenta y dos neonatos fueron monitoreados durante 15,467 días/paciente (DP). Las tasas de IAAS disminuyeron de 11,03/1.000 DP en P1 a 5,35/1.000 DP en P4 (p=0,006). Las IAAS con aislamiento bacteriano disminuyeron de 5,39/1.000 DP en P1 a 1,79/1.000 DP en P4 (p=0,011). La UV-C y el cobre se asociaron con una prevención significativa de las IAAS (RR: 0,49; IC 95%: 0,30-0,81; p=0,005) y con menores IAAS con aislados bacterianos (RR: 0,33; IC 95%: 0,14-0,77; p=0,011). Las placas adhesivas de cobre combinadas con la desinfección por UV-C se asociaron con una caída en las tasas de IAAS, y con la eliminación de las IAAS causadas por BLEE. Por lo tanto, proponemos que estas estrategias se consideren en la prevención de la proliferación de MDRO.