Biološka aktivnost roda Centaurea pripisuje se spojevima iz skupine terpena i flavonoida čija su antioksidacijska, antibakterijska, citotoksična i slična ljekovita svojstva dokazana. Cilj rada je odrediti sadržaj i sastav fitokemikalija ekstrakata hrvatske endemične biljne vrste Centaurea ragusina L. sakupljene na prirodnom lokalitetu, uzgojene u uvjetima in vitro i aklimatizirane na vanjske uvjete kao i njihovu antioksidacijsku, antibakterijsku i citotoksičnu aktivnost. U svrhu razjašnjenja biološke aktivnosti proučavane su interakcije ekstrakata, frakcija i spojeva s polinukleotidima. U etanolno vodenim ekstraktma izmjeren je najviši sadržaj fenola, flavonoida i hidroksicimetnih kiselina. Etanolno vodeni i etanolno etanolni ekstrakti pokazuju značajnu antioksidacijsku aktivnost neovisno o podrijetlu biljaka. Ekstrakti listova priređeni u etanolu, većina ispitivanih frakcija kao i dva izolirana seskviterpenska laktona pokazali su značajnu antibakterijsku aktivnost na Staphylococcus aureus ATCC 25923. Svi vodeni vodeni ekstrakti pokazuju značajni stabilizacijski učinak na DNA i RNA. Gotovo svi testirani ekstrakti te frakcije CRE01_06-10 pokazuju značajnu citotoksičnu aktivnost na testiranim tumorskim staničnim linijama. Biological activity of Centaurea genus is mainly attributed to compounds of the terpenoid and flavonoid type which showed antioxidant, antimicrobial, cytotoxic and other therapeutic properties. The goal of this work was to determine polyphenol content and composition of phytochemicals in Croatian endemic plant species Centaurea ragusina L. collected at natural habitats, cultivated in vitro and acclimated plants as well as to estimate their antioxidant, antibacterial and cytotoxic activity. Ethanolic/aqueous extracts showed the highest level of total phenols, flavonoids and hydroxycinnamic acid. Ethanolic/aqueous and ethanolic/ethanolic extracts showed significant antioxidant activity regardless of the plant origin. Crude ethanolic/ethanolic extract of leaves, almost all tested fractions and two isolated sesquiterpene lactones showed significant antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923. All aqueous/aqueous extracts showed significant stabilisation effects of DNA and RNA. Almost all tested extracts and fractions CRE01_06-10 exhibited significant inhibitory activities against all tested cancer cell lines.