Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
Celotno besedilo
  • Optimizacija metode za določanje bleomicina v bioloških vzorcih = Optimization of a method for determination of bleomycin in biological samples : enoviti magistrski študijski program Farmacija
    Golčar, Špela
    Bleomicin je zmes glikopeptidnih antibiotikov izoliranih iz Streptomyces verticillus, ki so učinkoviti pri zdravljenju številnih vrst raka. Ker ima tudi bleomicin neželene učinke, zlasti toksično ... delovanje na pljuča, je med terapijo pomembno spremljanje njegove koncentracije v krvi. Zaradi kompleksnosti njegove strukture, polarnosti in sposobnosti keliranja kovin pa je metodo za določanje bleomicina v bioloških vzorcih izjemno zahtevno razviti. V magistrski nalogi smo skušali optimizirati metodo, ki so jo razvili Kosjek s sodelavci, in sicer predvsem s ciljem prenosa ekstrakcije na trdnem nosilcu iz vakuumskega sistema s kolonami na nadtlačni sistem z mikrotitrskimi ploščami, ki je primernejši za ekstrakcijo večjega števila bioloških vzorcev. Na ta način smo želeli poenostaviti pripravo vzorca, skrajšati čas priprave in izboljšati izkoristek ekstrakcije bleomicina iz vzorcev. Izkazalo se je, da je izkoristek ekstrakcije BLM po prenosu metode na mikrotitrske plošče sicer malenkost nižji, ampak ta razlika ni pomembna, če upoštevamo poenostavitev metode. Na mikrotitrskih ploščah smo optimizirali tudi sestavo elucijskega topila. Nadalje smo poskušali postopek skrajšati tako, da smo plazemske oz. serumske vzorce injicirali direktno po denaturaciji in centrifugiranju, torej brez ekstrakcije na SPE ploščah. Rezultati so bili obetavni zgolj pri serumskih vzorcih, pri čemer je bil izkoristek boljši pri nižjem volumnu seruma kot pri višjem. Matriks vzorca namreč inhibira signal našega analita v masnem spektrometru, kar je intenzivneje pri večjem volumnu seruma. Inhibicija je pri plazmi še izrazitejša, zato smo odločili, da ta metoda ni primerna za direktno injiciranje. Metodo za ekstrakcijo BLM iz seruma in tumorskih tkiv smo optimizirali ter ovrednotili vpliv mase tkiva oziroma volumna biološkega vzorca na odziv masnega detektorja. Pri validaciji metode smo sledili smernicam Ameriškega urada za hrano in zdravila (FDA), kjer je bilo to smiselno in mogoče. Zaradi odkrite slabše robustnosti kromatografije internega standarda epirubicina smo se odločili, da ni primeren za to nalogo. Uporabno območje razvite metode za serum je od 100 do 5000 ng/mL, za tumorsko tkivo pa od 50 do 2500 ng/g.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Š. Golčar], 2022
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 101981443
Knjižnica/institucija Kraj Akronim Za izposojo Druga zaloga
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Ljubljana FFALJ v čitalnico 1 izv.
loading ...
loading ...