VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
13.
Izražanje gena za brazein v "In vitro" pogojih z uporabo naprave RTS 500 = "In vitro" expression of brazzein gene using RTS 500 system : diplomsko delo
Berlec, Aleš
V razvitem svetu, kjer se opravlja manj fiziènega dela, pridobiva na pomenu hrana, ki vsebuje manj kalorij in je naravnega izvora. Proteini sladkega okusaso naravna sladila in imajo tudi nekaj ...tisoèkrat intenzivnejsi sladek okus kot enaka masa saharoze. Njihova uporaba bi zmanjsala vnos ogljikovih hidratov in olajsala s tem povezane zdravstvene tezave (diabetes, karies). V farmaciji bi jih lahko uporabljali kot polnila in korigense okusa. Ker jih je iz naravnih virov tezko izolirati, bi jih najlazje pridobivali biotehnolosko.Najperspektivnejsi protein sladkega okusa je brazein. Je toplotno obstojen, stabilen v sirokem obmoèju pH in ima ugoden profil sladkegaokusa. Molekula brazeina je majhna, kar olajsa manipulacijo z genom.V okviru diplomskega dela smo najprej odpravili mutacijo, ki je nastala na sinteznem genu za brazein med njegovo pripravo. Mutacijo smo odstranili v verizni reakciji s polimerazo, pri èemer smo uporabili metodo z zaèetnim podaljsanim oligonukleotidom. Uspeh reakcije smo potrdili z doloèitvijo nukleotidnega zaporedja.Gen za brazein smo nato vstavili v ekspresijska plazmidna vektorja pIVEX 2.3 in pIVEX 2.4a, ki sta namenjena izrazanju proteinov v sistemu RTS 500. Sistem RTS 500 omogoèa Ćin vitroĆ izrazanje proteinov v kolièini od 100 do 500 gžml. Z izrazanjem proteinov Ćin vitroĆ seizognemo tezavam, ki so povezane z izrazanjem v zivih celicah. Za izrazanje se uporablja lizat Escherichie coli, ki zagotavlja vse potrebne snovi za hkratno transkripcijo in translacijo. Zgradba bioreaktorja omogoèa kontinuirano izmenjavo energijskih komponent in stranskih produktov skozi polprepustno membrano z difuzijo. S tem se trajanje reakcije in kolièina produkta bistveno poveèata.Brazein smo izrazili v sarznih reakcijah brez uporabe kontinuirane izmenjave. Vektorja pIVEX 2.3 oz. pIVEX 2.4a sta naèrtovana tako, da se pri izrazanju doda proteinu peptid iz sestih histidinovna C- oz. N-terminalni konec, kar omogoèa detekcijo izrazenega proteina s specifiènimi protitelesi proti temu peptidu. Z metodo prenosa ĆwesternĆ in uporabo protiteles smo potrdili nastanek brazeina s C-terminalnimhistidinskim peptidom. Brazein z N-terminalnim histidinskim peptidom ni nastal ali pa ga nismo uspeli dokazati.
Vrsta gradiva - diplomsko delo
Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Berlec A.], 2003
Bibliografsko gradivo je bilo uspešno dodano na polico.
Dodajanje bibliografskega gradiva na polico ni uspelo.
Gradivo je že na polici.
Trajna povezava
URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto
Faktor vpliva
Izdaja
Kategorija
Razvrstitev
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Izberite knjižnično izkaznico:
Baze podatkov,
v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov
Področje
Leto
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev
Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Citiranje
Funkcionalnost trenutno ni na voljo. Prosimo, poskusite kasneje.
