VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
13.
Vpliv izbitja gena MPP7 na razvoj in aktivnost človeške osteosarkomske celične linije = Effect of MPP7 gene knockout on the development and activity of human osteosarcoma cell line : Uniform Master's Study Programme Pharmacy
Gorjan Gazdag, Anteja
Osteoporoza je kronična skeletna bolezen, za katero je značilna zmanjšana kostna masa in krhkost kosti. Zaradi pogostosti bolezni, poznega diagnosticiranja in hudih posledic nizkoenergetskih zlomov ...predstavlja osteoporoza še vedno velik javnozdravstveni problem. K pojavnosti osteoporoze prispevajo tudi genetski dejavniki, ki jih odkrivamo tudi s pristopom vsegenomskih povezovalnih raziskav, GWAS. Več študij GWAS je kot kandidatni gen povezan z znižano kostno gostoto izpostavilo gen za membranski palmitoirani protein 7 (MPP7), katerega vloga v kostni biologiji še ni poznana. Namen te magistrske naloge je bil ovrednotiti in potrditi vpliv izbitja gena MPP7 na učinkovitost mineralizacije oz. nastalega zunajceličnega mineraliziranega matriksa v celičnem modelu človeških osteosarkomskih celic HOS. Želeli smo določiti, kako izbitje gena MPP7 vpliva na dinamiko izražanja nekaterih ključnih osteogenih dejavnikov med postopkom osteogene diferenciacije. Pri raziskavi smo uporabili vnaprej pripravljene in lizirane celične linije človeškega osteosarkoma HOS (ATCC® CRL-1543) z izbitim genom MPP7 (MPP7-KO) in HOS celice divjega tipa (WT) s funkcionalnim genom MPP7 (HOS WT). Izražanje izbranih osteogenih dejavnikov smo izmerili z metodo kvantitativne verižne reakcije s polimerazo (RT-qPCR). Določali smo vpliv na dinamiko izražanja gena RUNX2 (z Runtom povezani transkripcijski dejavnik 2) in gena PPARG (receptor gama aktiviran s proliferatorjem peroksisoma), ki sta povezana z diferenciacijo osteoblastov. Prav tako smo izmerili vpliv na izražanje genov povezanih z osnovnimi funkcijami osteoblastov, in sicer, gen ALP (alkalna fosfataza), gen COL1a1 (kolagen tipa I, veriga alfa I) in gen OC (osteokalcin) ter genov znotrajcelične signalne poti WNT gen CTNNB1 (β-katenin), gen CDH2 (N-kadherin) in gen CCND1 (ciklin D1). S histokemijskim in vitro barvanjem fiksiranih plošč z barvilom Alizarin Red S, ki se veže na kalcijeve mineralne vključke smo kvalitativno (mikroskopska analiza) in kvantitativno (ekstrakcija barvila z ocetno kislino in merjenje absorbance pri 405 nm) določili stopnjo mineralizacije v obeh celičnih linijah. Z mikroskopsko analizo smo opazovali tudi morfologijo celic. Naši rezultati so pokazali, da ima MPP7 ključno vlogo pri mineralizaciji kostnega matriksa. Rezultati histokemijskega barvanja z Alizarinom Red S so pokazali, da pri celicah HOS WT pride do obarvanja mineralnih vključkov tekom diferenciacije medtem, ko pri celicah MPP7-KO nismo zaznali nastanka kalcijevih depozitov niti kvalitativno z mikroskopsko analizo, niti kvantitativno z merjenjem absorbance. Prav tako smo pod mikroskopom opazili nastanek krogov iz morfološko različnih celic samo pri celični liniji HOS WT. S temi rezultati se sklada tudi izražanje ALP, ki je bilo pri celicah MPP7-KO popolnoma zavrto. Izbitje MPP7 vpliva tudi na izražanje osteogenega dejavnika RUNX2, ki je pri celicah MPP7-KO bolj postopno, in adipogenega transkripcijskega dejavnika PPARG, katerega izražanje se ob odsotnosti gena MPP7 pomembno zveča. Neposredno vpliva MPP7 tudi na signalno pot WNT, saj je pri celicah MPP7-KO izraženega manj CDH2 in zaradi tega je dostopnega več aktivnega β-katenina, kar se je skladalo z večjo izraženostjo CCND1 (tarčni gen β-katenina) v teh celicah. V magistrski nalogi smo dokazali, da je MPP7 ključen za mineralizacijo kostnega matriksa in izražanje ALP, vpliva tudi na izražanje pomembnejših transkripcijskih dejavnikov RUNX2 in PPARG ter neposredno vpliva na aktivnost kanonične signalne poti WNT.
Vrsta gradiva - magistrsko delo
; neleposlovje za odrasle
Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Gorjan Gazdag, A.], 2022
Bibliografsko gradivo je bilo uspešno dodano na polico.
Dodajanje bibliografskega gradiva na polico ni uspelo.
Gradivo je že na polici.
Trajna povezava
URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto
Faktor vpliva
Izdaja
Kategorija
Razvrstitev
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Izberite knjižnično izkaznico:
Baze podatkov,
v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov
Področje
Leto
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev
Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Citiranje
Funkcionalnost trenutno ni na voljo. Prosimo, poskusite kasneje.
