Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Use of antibodies in the system of semi-intact cells = Uporaba protiteles v sistemu semi-intaktnih celic
    Rupreht, Ruth ; Plemenitaš, Ana, 1952-
    HMGCoA reduktaza je glavni regulatorni encim v biosintezi holesterola. Encim je integralni protein endoplazemskega retikuluma. Aktivnost HMGCoA reduktaze je regulirana na ravneh transkripcije in ... translacije (long term), prav tako patudi na potranslacijski ravni (short term)(1). Sistem semi-intaktnih celic CHO-215, ki so avksotrofne za holesterol, se je izkazal kot uporaben za študijvpliva holesterola na aktivnost HMGCoA reduktaze na potranslacijski ravni. Pri pripravi takšnega sistema nastanejo v celični membrani dovolj vogočajo prost prehod proteinov in drugih manjših molekul iz citosola, znotrajcelični organeli pa ostanejo intaktni (2). Pri našem delu smo poskušaliv sistem semi-intaktnic celic CHO-215 vnesti protitelesa, specifična za membranski oziroma katalitski del encima HMGCoA reduktaze. Namen je bil ugotoviti ali je mogoče na ta način proučevati mehanizme regulacije HMGCoA reduktaze. Protitelesa so prodrla v celice in dosegla encim HMGCoA reduktazo, kar se je odrazilo v zmanjšanju encimske aktivnosti. Stopnja zmanjšanja je bila odvisna od vrste uporabljenih protiteles, njihove koncentracije in časa inkubacije. Kontrolni eksperimenti, ki smo jiih naredili z intaknimi celicami,so pokazali, da protitelesa v intaktne celice ne morejo podreti. Ob dodatku protiteles intaktnim celicam nismo zaznali nobene spremembe v encimskiaktivnosti. Uporabnost sistema semi-intaktnih celic se je pokazala tudi pri uporabi komercialno dostopnih anti-fosforinskih, anti-fosfotreoninskih in anti-fosfotirozinskih protiteles. Ob dodatku teh protiteles k sistemu semi-intaktnih celic ni bilo zmanjšanja encimske aktivnosti, ravno nasprotno, aktivnost se je celo povečala. Tak rezultat je v skladu s pričakovanji, saj vemo, da regulacijski mehanizmi HMGCoA reduktaze potekajo preko procesov fosforilacije in defosforilacije.
    Vir: Farmacevtski vestnik : strokovno glasilo slovenske farmacije = pharmaceutical journal of Slovenia. - ISSN 0014-8229 (Let. 47, št. 3, 1996, str. 287-292)
    Vrsta gradiva - članek, sestavni del
    Leto - 1996
    Jezik - angleški
    COBISS.SI-ID - 162777

Vnos na polico