Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Sinteza in vrednotenje derivatov nilsko rdečega za spremljanje rasti bakterijskega biofilma = Synthesis and evaluation of Nile red derivatives for monitoring of bacterial biofilm growth : enoviti magistrski študijski program Farmacija
    Mlinšek, Anja, farmacevtka
    Najpogostejša oblika rasti bakterij v naravi so biofilmi, saj jim nudijo zaščito pred okoljskimi vplivi. Ker so bakterije v biofilmih bolj odporne proti protimikrobnim sredstvom, jih težje odstranimo ... in težje dezinficiramo površine, na katerih se razraščajo. Kadar biofilme tvorijo za živali in ljudi patogene bakterije, pa lahko le ti predstavljajo tudi resno grožnjo njihovemu zdravju. Strukturo biofilmov lahko natančno opazujemo s pomočjo fluorescenčne mikroskopije, vendar za to potrebujemo ustrezne fluorescenčne sonde. Komercialno dostopnih sond je zelo malo in prav tako niso dobro poznani vsi strukturni elementi, ki bi lahko omogočili vezavo sond v bakterijskih biofilmih. V okviru magistrske naloge smo zato sintetizirali več fluorescenčnih sond, kjer smo nilsko rdečemu s klik reakcijo pripenjali različne azide, pri katerih smo spreminjali lipofilnost, polarnost in naboj. Nilsko rdeče smo izbrali zato, ker je okoljsko občutljiv fluorofor in zelo slabo emitira v vodnem (polarnem) okolju, zato smo predvidevali, da bo prišlo do emisije šele po vezavi na strukture v biofilmu. Uspešno smo sintetizirali šest derivatov nilsko rdečega in izbranim spojinam izmerili ekscitacijski in emisijski spekter. Vseh šest spojin smo nato testirali na Inštitutu Jožef Stefan v Ljubljani, tako da smo označevanje bakterijskega biofilma z novonastalimi sondami preverili s pomočjo modelnih biofilmov bakterijskih vrst Listeria monocytogenes in Salmonela enterica serovar Infantis ter konfokalnim fluorescenčnim mikroskopom. Obenem smo preverili tudi, ali sonde povzročijo spremembe v strukturi biofilma ali inhibicijo rasti bakterij. Ugotovili smo, da so sintetizirane sonde enakomerno označile populacijo bakterij v biofilmih L. monocytogenes, medtem ko je pri S. enterica označen le del bakterij, kar bi lahko pripisali razlikam v sestavi modelnih biofilmov. Pripravljene sonde smo uporabili tudi kot selektivne označevalce organelov evkariontskih celic in jih analizirali s pomočjo mikroskopa z vzbujenim praznjenjem emisije (STED). Slednji omogoča slikanje pri višji prostorski ločljivosti, kot jo narekuje uklonska meja svetlobe. Vse sonde so bile primerne za STED mikroskopijo, saj smo pri opazovanju zaznali zelo dobro ločljivost slike. Obenem pa je signal zmerno bledel, zato te sonde niso primerne za eksperimente z daljšim izpostavljanjem vzbujevalnemu in STED laserju. Kljub temu izbrane pripravljene fluorescenčne sonde dobro označujejo mitohondrije in/ali lizosome.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [A. Mlinšek], 2024
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 197575939

Knjižnica/institucija Kraj Akronim Za izposojo Druga zaloga
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Ljubljana FFALJ v čitalnico 1 izv.
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico