Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Vpliv vitaminov na elektrooksidacijo imunoglobulinov razreda G = The influence of vitamins of the electro-oxidation of class G immunoglobulins : diplomska naloga
    Barba, Daniel
    Protitelesa so glikoproteinske molekule, ki jih izloèajo limfociti B imunskegasistema. Sluzijo obrambi vretenèarjev pred infekcijami. Osnovni gradniki protiteles so aminokisline, ki so med seboj ... povezane s peptidno vezjo. Stiri peptidne verige, ki tako nastanejo, so med seboj povezane z disulfidnimi vezmi in hidrofobnimi interakcijami. Za vezavo z antigenom so najpomembnejse tiste aminokisline, ki se nahajajo v hipervariabilnih regijah protiteles. Oksidacija teh aminokislin lahko vodi do spremembe imunoreaktivnosti, afinitete in celo specifiènosti protiteles.Cilj nasega delaje bil ugotoviti, ali lahko vitamini zmanjsajo oziroma prepreèijo zvisanjeimunoreaktivnosti protiteles, ki se pojavi pri njihovi elektrooksidaciji. V ta namen smo iz serumov zdravih krvodajalcev (11) in plazmaferata bolnika s fosfolipidnim sindromom s pomoèjo afinitetne kromatografije na kolonah z vezanim proteinom G in naknadno zamenjavo pufra s fosfatnim (pH = 7,4) izolirali protitelesa. IgG frakcijam krvodajalcev smo dodali vitamin A ali vitamin C v treh koncentracijahČ podfizioloski, fizioloski in nadfizioloski. Zmes IgG in vitamina C smo oksidirali z elektriènim tokom pri enosmerni napetosti 1,5 V in èasih 15 s, 30 s, 60 s in 120 s, zmes IgG z vitaminom A pa smo oksidirali z elektriènim tokom pri enosmerni napetosti 1,5 V in 4,5 V ter enakih èasih. Med oksidacijo smo merilitudi jakost elektriènega toka in zasledili spremembeČ pri enosmerni napetosti 1,5 V je bil tok v A obmoèju in je s èasom padal, pri enosmerni napetosti 4,5 V pa je bil tok priblizno 2000 krat visji in je s èasom narasèal. Spremembo imunoreaktivnosti protiteles smo doloèali z indirektnim encimsko imunskim testom (ELISA) in pri tem kot antigen uporabili Ž2-glikoprotein I. In vitro okolje pri tem poskusu zagotovo ni bilo enako tistemu in vivo, vendar predvidevamo, da je zaradi elektriènega toka prislo donastanka reaktivnih kisikovih spojin, za katere je znano, da in vivo povzroèajo oksidativne spremembe. Vitamini so v telesu glavna zasèita pred radikalskimi spojinami, zato smo predvidevali, da bodo zasèitili tudi protitelesa v nasi raziskavi. Izkazalo se je, da lahko vitamin C upoèasni in celo prepreèi elektrooksidacijo naravnih in protimikrobnih protiteles pri 1,5 V, vendar je to odvisno od èasa elektrooksidacije in koncentracije vitamina C.Za vitamin A tezko doloèimo enotnost vpliva, ker ze sam etanol, ki je prisoten v pufru, moèno vpliva na imunoreaktivnost. Mozno je, da razliène koncentracije etanola v raztopinah vitamina A zameglijo njegov dejanski vpliv na spremembo imunoreaktivnosti.Ugotovili smo, da je bila sprememba imunoreaktivnosti pri nasem delu zelo raznolik in dinamièen proces. Odvisna jebila od èasa elektrooksidacije, jakosti toka, ki smo jo zanjo uporabili, terod vrste in koncentracije uporabljenega vitamina. Na podlagi dobljenih krivulj odvisnosti spremembe imunoreaktivnosti od èasa lahko sklepamo, da elektrooksidacija na zaèetku ne povzroèi denaturacije protiteles, temveè spremembe aminokislin v hipervariabilnih regijah. Zaradi tega se spremeni tudiimunoreaktivnost, na kar lahko vplivamo z dodatkom vitaminov.
    Vrsta gradiva - diplomsko delo
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Barba, D.], 2006
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1998449

Knjižnica/institucija Kraj Akronim Za izposojo Druga zaloga
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Ljubljana FFALJ v čitalnico 1 izv.
loading ...
loading ...
loading ...