Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Primerjava različnih gojitvenih plaftorm celic CHO pri razvoju celičnih linij = Comparison of different CHO cells cultivation platforms used in cell line development : magistrska naloga : magistrski študijski program Laboratorijska biomedicina
    Kopač, Urša, biokemičarka
    V zadnjih nekaj desetletjih so se za gojenje ovarijskih celic kitajskega hrčka (celice CHO) na laboratorijskem nivoju za potrebe razvoja uporabljale rastne plastenke (SF). Zaradi vse večjih potreb po ... (podobnih) bioloških zdravilih, biofarmacevtska industrija teži k čim večjim izkoristkom proizvodnje in čim krajšim časovnicam razvoja omenjenih zdravil. To je razlog, da SF niso več ustrezni za gojenje celic CHO, saj ne omogočajo visoke zmogljivosti dela. V praksi neučinkovite SF sedaj nadomeščajo plošče 24DW, ki so zelo primerne za avtomatizacijo in robotizacijo postopkov v celičnem laboratoriju. S ploščami 24DW dosegamo boljše izkoristke v smislu časa, števila proizvedenih celičnih klonov, obsega dela, porabljenih surovin in financ. Še boljše izkoristke in višje zmogljivosti laboratorija nam omogočajo plošče 96DW. Z avtomatiziranimi postopki in uporabo robotskih pipetirnih sistemov v 96DW gojimo več tisoč klonov hkrati brez povečanja obsega dela. Z njimi izvedemo učinkovitejše presejanje klonov ter tako hitreje pridobimo visoko producirajoče celične linije. Pri razvoju bioprocesa se večinoma uporablja miniaturizirane bioreaktorske sisteme (npr. Ambr 15), ki omogočajo gojenje do 48 celičnih linij hkrati pri skrbno kontroliranih in uravnavanih pogojih. Sistem Ambr 15 zahteva dokaj visok finančni vložek na izveden bioproces, a je visoko zmogljiv in avtomatiziran ter odlično posnema obnašanje celične linije v velikih bioreaktorjih. V sklopu magistrske naloge smo želeli ovrednotiti gojenje celic CHO v novih, učinkovitejših platformah (24DW, 96DW) glede na uveljavljene SF. Zaradi izrazito višjih časovnih, materialnih in finančnih izkoristkov novejših platform smo želeli preveriti, ali bi slednje lahko nadomestile neučinkovite SF pri gojenju celic CHO za potrebe razvoja produkcijskih celičnih linij. Prav tako smo želeli preveriti, kako platforme v zgodnjem razvoju (SF, 24DW, 96DW) napovejo dogajanje v Ambr 15. Parametri, ki smo jih tekom magistrske naloge vrednotili, so bili: število živih celic, viabilnost ter celična produktivnost (titer). V analize smo vključili tako meritve, pridobljene med 14-dnevnimi šaržami z dohranjevanjem kot tudi meritve med 6-dnevnimi šaržami brez dohranjevanja. Primerjani parametri v 24DW in 96DW dobro korelirajo z obstoječimi SF (% > 0,87 za vrednosti titra). Slabše, vendar vseeno zadovoljive korelacije smo dobili med meritvami parametrov v sistemu Ambr 15 in ostalimi platformami (% > 0,63 za vrednosti titra). Hkrati smo z eksperimenti pokazali, da lahko s 6-dnevno šaržo brez dohranjevanja dobro napovemo dogajanje po koncu 14-dnevne šarže z dohranjevanjem. Vse bolj se zavedamo tudi pomembnosti poznavanja, modeliranja in kontrole N-glikozilacije monoklonskih protiteles oz. Fc-fuzijskih proteinov. Glikanski profili namreč vplivajo na aktivnost biofarmacevtika, na njegove farmakokinetične in farmakodinamične lastnosti ter na varnost njegove uporabe. V sklopu magistrske naloge smo zato s pomočjo interferometrije z biološkimi plastmi (analiza BLI) ovrednotili tudi glikanske profile proteina v različnih platformah. Ugotovili smo, da se glikanski profil proteina ohrani ne glede na uporabljeno platformo. Dobro ohranjenost glikanskega profila smo pokazali tudi med 14-dnevno šaržo z dohranjevanjem in 6-dnevno šaržo brez dohranjevanja.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [U. Kopač], 2021
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 68261379

Knjižnica/institucija Kraj Akronim Za izposojo Druga zaloga
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Ljubljana FFALJ v čitalnico 1 izv.
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico