The hexameric AAA+ (ATPase associated with various cellular activities) chaperone ClpB reactivates protein aggregates in collaboration with the DnaK system. An intriguing aspect of ClpB function is ...that the active hexamer is unstable and therefore questions how this chaperone uses multiple rounds of ATP hydrolysis to translocate substrates through its central channel. In the present paper, we report the use of biochemical and fluorescence tools to explore ClpB dynamics under different experimental conditions. The analysis of the chaperone activity and the kinetics of subunit exchange between protein hexamers labelled at different protein domains indicates, in contrast with the current view, that (i) ATP favours assembly and ADP dissociation of the hexameric assembly, (ii) subunit exchange kinetics is at least one order of magnitude slower than the ATP hydrolysis rate, (iii) ClpB dynamics and activity are related processes, and (iv) DnaK and substrate proteins regulate the ATPase activity and dynamics of ClpB. These data suggest that ClpB hexamers remain associated during several ATP hydrolysis events required to partially or completely translocate substrates through the protein central channel, and that ClpB dynamics is tuned by DnaK and substrate proteins.
Apg2, one of the three cytosolic Hsp110 chaperones in humans, supports reactivation of unordered and ordered protein aggregates by Hsc70 (HspA8). Together with DnaJB1, Apg2 serves to nucleate Hsc70 ...molecules into sites where productive entropic pulling forces can be developed. During aggregate reactivation, Apg2 performs as a specialized nucleotide exchange factor, but the origin of its specialization is poorly defined. Here we report on the role of the distinctive C-terminal extension present in Apg2 and other metazoan homologs. We found that the first part of this Apg2 subdomain, with propensity to adopt α-helical structure, interacts with the nucleotide binding domain of Hsc70 in a nucleotide-dependent manner, contributing significantly to the stability of the Hsc70:Apg2 complex. Moreover, the second intrinsically disordered segment of Apg2 C-terminal extension plays an important role as a downregulator of nucleotide exchange. An NMR analysis showed that the interaction with Hsc70 nucleotide binding domain modifies the chemical environment of residues located in important functional sites such as the interface between lobe I and II and the nucleotide binding site. Our data indicate that Apg2 C-terminal extension is a fine-tuner of human Hsc70 activity that optimizes the substrate remodeling ability of the chaperone system.
Protein aggregate reactivation in metazoans is accomplished by the combined activity of Hsp70, Hsp40 and Hsp110 chaperones. Hsp110s support the refolding of aggregated polypeptides acting as ...specialized nucleotide exchange factors of Hsp70. We have studied how Apg2, one of the three human Hsp110s, regulates the activity of Hsc70 (HspA8), the constitutive Hsp70 in our cells. Apg2 shows a biphasic behavior: at low concentration, it stimulates the ATPase cycle of Hsc70, binding of the chaperone to protein aggregates and the refolding activity of the system, while it inhibits these three processes at high concentration. When the acidic subdomain of Apg2, a characteristic sequence present in the substrate binding domain of all Hsp110s, is deleted, the detrimental effects occur at lower concentration and are more pronounced, which concurs with an increase in the affinity of the Apg2 mutant for Hsc70. Our data support a mechanism in which Apg2 arrests the chaperone cycle through an interaction with Hsc70(ATP) that might lead to premature ATP dissociation before hydrolysis. In this line, the acidic subdomain might serve as a conformational switch to support dissociation of the Hsc70:Apg2 complex.
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•Human Apg2 supports protein aggregate reactivation acting as nucleotide exchange factor of Hsc70.•Regulation of Hsc70 binding to aggregates by Apg2 correlates with substrate reactivation.•Apg2 stimulates/inhibits the activity of the Hsc70 system in a concentration-dependent manner.•An Hsc70:Apg2 complex arrests the ATPase cycle in the ADP/ATP exchange process.•The acidic subdomain supports dissociation of the Hsc70:Apg2 complex.
La minería en el Perú es la mas grande actividad económica aportando un porcentaje considerable al Producto Bruto Interno nacional. Sin embargo, el proceso de esta actividad evidencia diversos ...conflictos socio-ambientales. La generación de residuos mineros o expresados como relaves mineros provenientes de los diversos procesos es una amenaza latente que afecta las esferas del desarrollo sostenible. Este estudio tuvo como objetivo la propuesta de valorización de relaves mineros como áridos para la construcción de carreteras en la región andina del Perú bajo un enfoque de economía circular. En consecuencia, se realizó diversos análisis para evaluar su viabilidad como el factor meteorológico de precipitación, acidez o alcalinidad, elementos presentes en la muestra, granulometría, California Bearing Ratio (CBR) y prueba Marshall. Los resultados han demostrado que la propuesta cumple con los parámetros establecidos a nivel nacional con una estabilidad de 877,67 kg y un aprovechamiento del 25% de los relaves mineros. En conclusión, el uso de relaves mineros como áridos para la construcción es una propuesta viable para la construcción de carreteras bajo un enfoque de economía circular. Finalmente, se recomienda el análisis de valorización de residuos mineros en otros elementos del sector construcción para continuar promoviendo la economía circular y desarrollo sostenible.
Mining is the largest economic activity in Peru, contributing a considerable percentage of the country’s Gross Domestic Product. However, the process of this activity evidences several socio-environmental conflicts. The generation of mining waste or expressed as mining tailings from the various processes is a latent threat that affects the spheres of sustainable development. The objective of this study was to propose the valorization of mining tailings as aggregates for road construction in the Andean region of Peru under a circular economy approach. Consequently, several analyses were carried out to evaluate its viability, such as the meteorological factor of precipitation, acidity or alkalinity, elements present in the sample, granulometry, California Bearing Ratio (CBR) and Marshall test. The results have shown that the proposal complies with the parameters established at the national level with a stability of 877.67 kg and a 25% utilization of mine tailings. In conclusion, the use of mine tailings as aggregates for construction is a viable proposal for road construction under a circular economy approach. Finally, the analysis of the valorization of mining waste in other elements of the construction sector is recommended to continue promoting the circular economy and sustainable development.
El objetivo principal de esta investigación fue optimizar una cerveza tipo lager saborizada con zumo de granada, como alternativa de empleo y valor agregado a esta materia prima que empieza a ...posicionarse en el mercado internacional, incorporando el zumo en una bebida tan consumida por el mundo como la cerveza tipo lager. Las variables dependientes evaluación de la aceptabilidad del producto final habiendo estudiado en la formulación la concentración de zumo de granada a incorporar durante la segunda fermentación, y el tiempo de fermentación para obtener los grados alcohólicos reglamentados para una cerveza tipo lager. Se desarrollaron 16 tratamientos generados a partir del software Design Expert 8.0 aplicando una metodología de superficie de respuesta. Una cerveza tipo lager saborizada con zumo de granada requiere de la incorporación del mismo en la fermentación secundaria debiendo permanecer por un periodo de 7-10 días y a una temperatura de -2 a 2 °C. Para cortar la fermentación con meta bisulfito de potasio a 0.15g/l y sorbito de potasio 0.12g/l, luego la separación de sólidos para finalmente pasar a la carbonatación con el 2.5% de CO2. e independientes estudiadas estuvieron asociadas a La formulación óptima fue 23% zumo de granada para lograr 8°Bx, 4pH y 5% de alcohol como características finales. La evaluación sensorial reportan una aceptabilidad de la cerveza tipo lager con: color rojo violáceo, sabor agridulce, aroma agradable, textura líquida. Logrando una aceptación por parte del 52% de los panelistas.
ALLQU – COLLAR GPS Montes Ortiz de Villate, Edson Rafael; Tamashiro Maekawa, Yoshiaki; Contreras Gavino, Yovana ... Dissertation
Nuestros collares geo localizadores “Allqu” se encuentran dirigidos a las personas de Lima Metropolitana del nivel socioeconómico A/B que cuenten con mascotas en casa y que se preocupen por la ...seguridad de los mismos. A través de los collares con GPS, promovemos la protección y el cuidado preservando la integridad y vida animal. ;
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Basado en los resultados de las entrevistas a profundidad, se logró detectar los principales problemas que poseen las personas que cuentan con una mascota en casa. Consecuente a ello, se identificó la creación de un producto que satisfaga todas las necesidades de nuestro público objetivo. Las distintas validaciones de hipótesis nos reafirmaron la continuación de la propuesta de negocio. ;
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Nuestros principales canales de venta físicos serán: local propio, veterinarias y petshops. Asimismo, tendremos presencia digital a través de los E-Commerce. La estrategia de Marketing será vital para lograr un posicionamiento de mercado importante en accesorios para mascotas. ;
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Los collares tecnológicos serán importados desde China y se almacenarán en nuestra tienda física ubicada en el distrito de Lince donde se realizará el empacado y funcionará también como centro de distribución para los diferentes puntos de venta. El negocio contará con 4 colaboradores capacitados para las funciones establecidas y el logro de objetivos trazados. ;
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En el análisis financiero desarrollado y proyectado, tenemos un Valor Presente Neto de S/118,563 y una Tasa Interna de Retorno de 57.66%, siendo indicadores importantes que demuestra la viabilidad y rentabilidad del negocio en el tiempo.
Our geo locator collars "Allqu" are aimed at people in Metropolitan Lima of the socioeconomic level A/B who have pets at home and who are concerned about their safety. Through GPS collars, we promote protection and care while preserving the integrity and animal life. ;
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Based on the results of the in-depth interviews, it was possible to detect the main problems that people who have a pet experience. Consequently, the creation of a product that meets all the needs of our target audience was identified. The different hypothesis validations reaffirmed the continuation of the business proposal. ;
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Our main physical sales channels will be: our own shop, veterinarians and petshops. Likewise, we will have a digital presence through E-Commerce. The Marketing strategy will be vital to achieve an important market position in pet accessories. ;
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The technological collars will be imported from China and will be stored in our physical store located in the Lince district where the packaging will take place and will also function as a distribution center for the different points of sale. The business will have 4 workers trained for the established functions and the achievement of set objectives. ;
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In the financial analysis developed and projected, we have a Net Present Value of S / 118,563 and an Internal Rate of Return of 57.66%, being important indicators that demonstrate the viability and profitability of the business over time.
Trabajo de investigación
En este trabajo se realizó un análisis de diferentes parámetros que caracterizan la estandarización para la determinación del tamaño molecular de nuevos antígenos de interés vacunal, a través de ...electroforesis en “Phast System” y de distintas matrices cromatográficas. La evaluación electroforética de la linealidad en las curvas de patrones indicó valores de coeficientes de correlación y determinación superiores a 0,98, con una adecuada repetibilidad; no se manifestaron diferencias entre los resultados obtenidos por varios analistas, en días diferentes y el método resultó ser exacto y robusto en las condiciones recomendadas. Se evaluaron los parámetros que caracterizan la eficiencia en el empaquetamiento de cuatro matrices cromatográficas (Superosa 12, Sephacryl S-100, Sepharosa CL- 4B y Sephacryl S-1000). Los resultados obtenidos para ambos sistemas de determinación permitieron la evaluación satisfactoria de muestras de proteínas de membrana externa y lipopolisacárido, procedentes de Vibrio cholerae, Leptospira ssp, Pseudomona aeruginosa y Shigella ssp.
