MLL rearrangement (MLLr) is responsible for the development of acute leukemias with poor outcomes. Therefore, new therapeutic approaches are urgently needed. The NOTCH1 pathway plays a critical role ...in the pathogenesis of many cancers including acute leukemia. Using a CRISPR/Cas9 MLL-AF4/-AF9 translocation model, the newly developed NOTCH1 inhibitor CAD204520 with less toxic side effects allowed us to unravel the impact of NOTCH1 as a pathogenic driver and potential therapeutic target in MLLr leukemia. RNA sequencing (RNA-seq) and RT-qPCR of our MLLr model and MLLr cell lines showed the NOTCH1 pathway was overexpressed and activated. Strikingly, we confirmed this elevated expression level in leukemia patients. We also demonstrated that CAD204520 treatment of MLLr cells significantly reduces NOTCH1 and its target genes as well as NOTCH1 receptor expression. This was not observed with a comparable cytarabine treatment, indicating the specificity of the small molecule. Accordingly, treatment with CAD204520 resulted in dose-dependent reduced proliferation and viability, increased apoptosis, and the induction of cell cycle arrest via the downregulation of MLL and NOTCH1 target genes. In conclusion, our findings uncover the oncogenic relevance of the NOTCH1 pathway in MLLr leukemia. Its inhibition leads to specific anti-leukemic effects and paves the way for further evaluation in clinical settings.
MLL rearranged (MLLr) leukemias are associated with a poor prognosis and a limited response to conventional therapies. Moreover, chemotherapies result in severe side effects with significant ...impairment of the immune system. Therefore, the identification of novel treatment strategies is mandatory.
Recently, we developed a human MLLr leukemia model by inducing chromosomal rearrangements in CD34+ cells using clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/Cas9. This MLLr model authentically mimics patient leukemic cells and can be used as a platform for novel treatment strategies. RNA sequencing of our model revealed MYC as one of the most important key drivers to promote oncogenesis. However, in clinical trials the BRD4 inhibitor JQ-1 leading to indirect blocking of the MYC pathway shows only modest activity. We and others previously reported that epigenetic drugs targeting MAT2A or PRMT5 promote cell death in MLLr cells. Therefore, we use these drugs in combination with JQ-1 leading to augmented anti-leukemic effects. Moreover, we found activation of T, NK and iNKT cells, release of immunomodulatory cytokines and downregulation of the PD-1/PD-L1 axis upon inhibitor treatment leading to improved cytotoxicity.
In summary, the inhibition of MYC and MAT2A or PRMT5 drives robust synergistic anti-leukemic activity in MLLr leukemia. Moreover, the immune system is concomitantly activated upon combinatorial inhibitor treatment, hereby further augmenting the therapeutic efficiency.
Locally advanced or metastatic head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is associated with a poor prognosis. The introduction of PD-1 inhibitors has led to a significant improvement in survival, ...but only a subpopulation of patients responds to therapy. Current biomarkers cannot reliably identify these patients. The identification of biomarkers for the prediction and monitoring of immunotherapy is therefore of great importance. In this study, we characterized lymphocyte subsets in the peripheral blood of HNSCC patients under PD-1 inhibition. Patients with primary response (n=11) to PD-1 inhibition showed an increase of the CD3+ effector memory (CD3/EM) population and an elevated expression of the activation marker CD69 in CD3+ T cells, particularly in the CD3/EM subpopulation at 3 months when treatment response was assessed. In contrast, patients with primary treatment failure and progressive disease (n=9) despite PD-1 inhibition had lower absolute lymphocyte counts and an increased expression of CTLA-4 in CD3+ T cells at the time of treatment failure compared with baseline, particularly in CD4+ and CD8+ effector memory populations. Our results demonstrate that HNSCC patients' response to immune checkpoint inhibition shows a distinct immune signature in peripheral blood, which could help identify refractory patients earlier. Furthermore, strategies to overcome primary therapy failure by inducing a beneficial T cell phenotype or adding alternative immune checkpoint inhibitors could improve response rates and survival of HNSCC patients.
Klasik koruma tedbirlerinin dünyada giderek yaygınlaşan örgütlü suçların araştırılmasında yetersiz kalması, devletlerin bu suçlarla mücadelede başkaca yöntemleri benimsemelerini gerekli hâle ...getirmiştir. Bunlardan biri olan gizli soruşturmacı görevlendirilmesi, bugün için ülkemizde de uygulanan bir koruma tedbiridir. Ne var ki bu tedbirin düzenlendiği Ceza Muhakemesi Kanunu’nun (CMK) 139. maddesi ilk günlerden itibaren çokça eleştirilmiş, birkaç kez değişikliğe uğramış ve çeşitli zamanlarda bu maddeye bazı eklemeler yapılmıştır. Yapılan bu değişikliklerin veya eklemelerin söz konusu tedbire ilişkin sorunlara bir çözüm getirdiğini ifade etmek oldukça güçtür. Hatta aksine, 2018 yılında 139. maddenin 3. fıkrasına eklenen bir cümleyle gizli soruşturmacının gizli tanık olarak dinlenmesinin öngörülmesi, bu sorunlara yeni bir boyut kazandırmıştır. Gerçekten de savcı adına soruşturmayı gizli olarak yürüten, suç işlemek dışında adeta bir örgüt üyesi gibi hareket etmesi beklenen, örgüt içerisine sızan bir kişinin tanıklığı adil yargılanma hakkı bakımından nasıl değerlendirilmelidir? Gizli soruşturmacının klasik yöntemlerle yürütülen bir soruşturmada savcının emri altında görevini yerine getiren adli kolluktan bir farkı var mıdır? Gizli soruşturmacının delillerini topladığı bir olayda bir de tanıklık etmesi tanıklığa ilişkin hükümler ve muhakemenin temel ilkeleri bakımından nasıl yorumlanmalıdır? Bu makalenin amacı bu sorulara bir cevap bulmaya çalışarak gizli soruşturmacının tanıklığı meselesini ele almaktır.
BackgroundRelapse and graft-versus-host disease (GVHD) are the main causes of death after allogeneic hematopoietic cell transplantation (HCT). Preclinical murine models and clinical data suggest that ...invariant natural killer T (iNKT) cells prevent acute and chronic GVHD. In addition, iNKT cells are crucial for efficient immune responses against malignancies and contribute to reduced relapse rates after transplantation. Chimeric antigen receptors (CAR) redirect effector cells to cell surface antigens and enhance killing of target cells. With this study, we aimed to combine enhanced cytotoxicity of CD19-CAR-iNKT cells against lymphoma cells with their tolerogenic properties.MethodsiNKT cells were isolated from peripheral blood mononuclear cells and transduced with an anti-CD19-CAR retrovirus. After in vitro expansion, the functionality of CD19-CAR-iNKT cells was assessed by flow cytometry, image stream analysis and multiplex analysis in single-stimulation or repeated-stimulation assays. Moreover, the immunoregulatory properties of CD19-CAR-iNKT cells were analyzed in apoptosis assays and in mixed lymphocyte reactions. The effect of checkpoint inhibition through nivolumab was analyzed in these settings.ResultsIn this study, we could show that the cytotoxicity of CD19-CAR-iNKT cells was mediated either through engagement of their CAR or their invariant T-cell receptor, which may circumvent loss of response through antigen escape. However, encounter of CD19-CAR-iNKT cells with their target induced a phenotype of exhaustion. Consequently, checkpoint inhibition increased cytokine release, cytotoxicity and survival of CD19-CAR-iNKT cells. Additionally, they showed robust suppression of alloreactive immune responses.ConclusionIn this work, we demonstrate that CAR-iNKT cells are a powerful cytotherapeutic option to prevent or treat relapse while potentially reducing the risk of GVHD after allogeneic HCT.
Dolandırıcılık suçu, 5237 sayılı Türk Ceza Kanunu’nda “Kişilere Karşı Suçlar” arasında “Malvarlığına Karşı Suçlar” başlığı altında 157 ila 159. maddeler arasında düzenlenmiştir. Bu suç malvarlığına ...karşı işlenen suçların tipik örneğini oluşturmaktadır ve günümüzde en çok işlenen suçların başında gelmektedir. Bununla birlikte; bilişim teknolojisindeki gelişmelerin etkisiyle, dolandırıcılık suçu son yıllarda akla gelmeyecek yöntemlerle işlenir hale gelmiş; bu ise, neredeyse herkesin bu suçun mağduru olabilme ihtimalini güçlendirmiştir. Gerçekten de; bilişim sistemlerinin hayatın birçok alanında kullanılması, hem dolandırıcılara daha geniş bir hareket alanı yaratmakta hem de en açıkgözlü kişilerin dahi bu suçun mağduru olabilmesine imkân tanımaktadır. Suçun işlenişini kolaylaştırdığından, dolandırıcılığın bilişim sistemlerinin araç olarak kullanılması suretiyle işlenmesi TCK m.158/1-f’de ağırlaştırıcı neden olarak öngörülmüştür.
Fraud has been regulated in the Turkish Penal Code No.5237, under the title of "Crimes Against Property” and among "Crimes Against Persons", between articles 157 and 159. This is a typical example of crimes against property and also it has been one of the most committed crimes in recent years. By the effect of technological developments, this crime has become committing with unimaginable methods and this has undoubtedly strengthened the possibility of being a victim of this crime. It is clear that the use of information systems in many areas of life gives fraudsters a wider range of movement and also allows even the most open-eyed people to be the victim of this crime. Using information systems as a tool facilitates comitting fraud, therefore, it has been stipulated as an aggravating cause in Turkish Penal Code art.158 / 1-f.
Dolandırıcılık suçu, 5237 sayılı Türk Ceza Kanunu’nda “Kişilere Karşı Suçlar” arasında “Malvarlığına Karşı Suçlar” başlığı altında 157 ila 159. maddeler arasında düzenlenmiştir. Bu suç malvarlığına ...karşı işlenen suçların tipik örneğini oluşturmaktadır ve günümüzde en çok işlenen suçların başında gelmektedir. Bununla birlikte; bilişim teknolojisindeki gelişmelerin etkisiyle, dolandırıcılık suçu son yıllarda akla gelmeyecek yöntemlerle işlenir hale gelmiş; bu ise, neredeyse herkesin bu suçun mağduru olabilme ihtimalini güçlendirmiştir. Gerçekten de; bilişim sistemlerinin hayatın birçok alanında kullanılması, hem dolandırıcılara daha geniş bir hareket alanı yaratmakta hem de en açıkgözlü kişilerin dahi bu suçun mağduru olabilmesine imkân tanımaktadır. Suçun işlenişini kolaylaştırdığından, dolandırıcılığın bilişim sistemlerinin araç olarak kullanılması suretiyle işlenmesi TCK m.158/1-f’de ağırlaştırıcı neden olarak öngörülmüştür.
Dolandırıcılık suçu, 5237 sayılı Türk Ceza Kanunu’nda “Kişilere Karşı Suçlar” arasında “Malvarlığına Karşı Suçlar” başlığı altında 157 ila 159. maddeler arasında düzenlenmiştir. Bu suç malvarlığına ...karşı işlenen suçların tipik örneğini oluşturmaktadır ve günümüzde en çok işlenen suçların başında gelmektedir. Bununla birlikte; bilişim teknolojisindeki gelişmelerin etkisiyle, dolandırıcılık suçu son yıllarda akla gelmeyecek yöntemlerle işlenir hale gelmiş; bu ise, neredeyse herkesin bu suçun mağduru olabilme ihtimalini güçlendirmiştir. Gerçekten de; bilişim sistemlerinin hayatın birçok alanında kullanılması, hem dolandırıcılara daha geniş bir hareket alanı yaratmakta hem de en açıkgözlü kişilerin dahi bu suçun mağduru olabilmesine imkân tanımaktadır. Suçun işlenişini kolaylaştırdığından, dolandırıcılığın bilişim sistemlerinin araç olarak kullanılması suretiyle işlenmesi TCK m.158/1-f’de ağırlaştırıcı neden olarak öngörülmüştür.
PDF
