Despite the fundamental importance of the redox metabolism of mitochondria under normal and pathological conditions, our knowledge regarding the transport of vitamin C across mitochondrial membranes ...remains far from complete. We report here that human HEK-293 cells express a mitochondrial low-affinity ascorbic acid transporter that molecularly corresponds to SVCT2, a member of the sodium-coupled ascorbic acid transporter family 2. The transporter SVCT1 is absent from HEK-293 cells. Confocal colocalization experiments with anti-SVCT2 and anti-organelle protein markers revealed that most of the SVCT2 immunoreactivity was associated with mitochondria, with minor colocalization at the endoplasmic reticulum and very low immunoreactivity at the plasma membrane. Immunoblotting of proteins extracted from highly purified mitochondrial fractions confirmed that SVCT2 protein was associated with mitochondria, and transport analysis revealed a sigmoidal ascorbic acid concentration curve with an apparent ascorbic acid transport Km of 0.6mM. Use of SVCT2 siRNA for silencing SVCT2 expression produced a major decrease in mitochondrial SVCT2 immunoreactivity, and immunoblotting revealed decreased SVCT2 protein expression by approximately 75%. Most importantly, the decreased protein expression was accompanied by a concomitant decrease in the mitochondrial ascorbic acid transport rate. Further studies using HEK-293 cells overexpressing SVCT2 at the plasma membrane revealed that the altered kinetic properties of mitochondrial SVCT2 are due to the ionic intracellular microenvironment (low in sodium and high in potassium), with potassium acting as a concentration-dependent inhibitor of SVCT2. We discarded the participation of two glucose transporters previously described as mitochondrial dehydroascorbic acid transporters; GLUT1 is absent from mitochondria and GLUT10 is not expressed in HEK-293 cells. Overall, our data indicate that intracellular SVCT2 is localized in mitochondria, is sensitive to an intracellular microenvironment low in sodium and high in potassium, and functions as a low-affinity ascorbic acid transporter. We propose that the mitochondrial localization of SVCT2 is a property shared across cells, tissues, and species.
•We describe a general mechanism for the mitochondrial acquisition of ascorbic acid.•Mitochondria express a low-affinity form of the ascorbic acid transporter SVCT2.•SVCT2 transport kinetics is altered by the intracellular ionic microenvironment.•Mitochondrial SVCT2 shows an apparent transport Km of 0.6mM.•Mitochondrial SVCT2 is fully functional under normal high ascorbate concentrations.
Introducción: El cáncer en el año 2020 provoco 1,4 millones de muertes, el 47% en personas menores de 65 años de edad, la neutropenia febril en el paciente oncológico aumenta los casos de infecciones ...graves, incrementando la morbimortalidad cuando no se ha empezado un tratamiento de oportuno. El objetivo del presente estudio fue describir una población con esta patología en un centro de referencia regional. Metodología: Este estudio transversal, se realizó en el Instituto Oncológico Nacional “Dr. Juan Tanca Marengo”, Sociedad de Lucha contra el Cáncer, Solca-Guayaquil, período enero 2020- junio 2021, con una muestra no probabilística, de pacientes con neoplasias, neutropenias y cultivos positivos. Se registraron variables demográficas, clínicas, de laboratorio. Se utiliza estadística descriptiva univariada. Resultados: Se analizan 126 casos, de edad promedio 55 años, el 50.8% fue de sexo femenino; el 88.1 % ingresó con neutropenia febril; la estancia hospitalaria promedio fue de 7 días. La Escherichia coli fue el microorganismo más frecuente con el 17.5 %, seguido por Klebsiella pneumoniae en el 9.5 %, Enterobacter aerogenes y Pseudomonas aureginosa en el 4.8 %. El 70.2 % de las bacterias aisladas presentó resistencia bacteriana, el 47 % fueron bacterias betalactamasa de espectro ampliado (BLEA), el 40 % fue betalactamasa de espectro extendido (BLEE), y el 5 % productor de carbapenemasas (KPC), el 57.5 % con resistencia bacteriana tuvo una estancia hospitalaria mayor a 7 días. Conclusión: El principal microorganismo fue Escherichia coli y la resistencia mayormente la tuvieron las bacterias betalactamasa de espectro ampliado positiva; permitiendo conocer la epidemiología local del perfil microbiológico y su relación con los pacientes oncológicos con neutropenia febril.
Ascorbic acid is transported into cells by the sodium-coupled vitamin C transporters (SVCTs). Recently, we obtained evidence of differential regulation of SVCT expression in response to acute ...oxidative stress in cells from species that differ in their capacity to synthesize vitamin C, with a marked decrease in SVCT1 mRNA and protein levels in rat hepatoma cells that was not observed in human hepatoma cells. To better understand the regulatory aspects involved, we performed a structural and functional analysis of the proximal promoter of the SVCT1 rat gene. We cloned a 1476-bp segment containing the proximal promoter of the rat SVCT1 gene and generated deletion-derived truncated promoters of decreasing sizes and mutant promoters by modification of consensus binding sites for transcription factors by site-directed mutagenesis. We next analyzed their capacity to direct the transcription of a reporter gene after transfection into rat H4IIE and human HepG2 hepatoma cells, in experiments involving the coexpression of transcription factors whose consensus binding sequences are present in the SVCT1 promoter. This analysis revealed the presence of two critical cis-regulatory elements of the transcriptional activity of the rat SVCT1 gene promoter, sites containing consensus sequences for the binding of the transcription factors Bach1 and HNF4 that are not present in equivalent locations in the human SVCT1 gene promoter. Moreover, a consensus site for HNF1 that is crucial for the regulation of the human SVCT1 promoter is present in the SVCT1 rat promoter but has no effect on its transcriptional activity. These findings imply that regulation of vitamin C metabolism in the rat, a species with the capacity to synthesize large amounts of ascorbic acid, may differ from that of humans, a species that must obtain ascorbic acid from the diet through a transport mechanism that depends on proper SVCT1 expression.
Display omitted
•Rats synthesize their own ascorbic acid (AA) in the liver.•SVCT1 is fundamental for humans to obtain AA from the diet.•Species-specific cis-regulatory elements regulate the rat and human SVCT1 genes.•SVCT1 transcription regulation differs in species that synthesize AA differently.
Introducción: El consentimiento informado es un procedimiento que brinda oportunidad a los pacientes de disponer de información y participar en la toma de decisiones médicas. Sin embargo, existe el ...criterio de que el nivel de entendimiento de la información aportada por los facultativos al paciente, sus familiares o ambos, es bajo y además, muchos médicos lo consideran como una herramienta de trabajo secundaria o que no es necesario realizarla con inmediatez. Objetivo: Evaluar la percepción y experiencia del personal sanitario de la unidad de terapia polivalente del Hospital Docente Clínico Quirúrgico "Joaquín Albarrán" acerca del consentimiento informado. Método: Estudio descriptivo realizado en la unidad de terapia polivalente del Hospital "Joaquín Albarrán" de enero a marzo del 2013. Se aplicó una encuesta a 67 trabajadores que accedieron voluntariamente a responderla. Resultados: El 60 % de los encuestados tenía menos de dos años de trabajo en la unidad y solo el 45 %, conocimientos básicos de ética médica. Únicamente el 50 % de los interrogados consideró que este procedimiento puede mejorar la relación médico-paciente. Conclusiones: Es necesario incrementar el conocimiento sobre la utilidad del consentimiento informado entre los trabajadores de la unidad para aprovechar al máximo sus beneficios.
Introducción: El cáncer en el año 2020 provoco 1,4 millones de muertes, el 47% en personas menores de 65 años de edad, la neutropenia febril en el paciente oncológico aumenta los casos de infecciones ...graves, incrementando la morbimortalidad cuando no se ha empezado un tratamiento de oportuno. El objetivo del presente estudio fue describir una población con esta patología en un centro de referencia regional.
Metodología: Este estudio transversal, se realizó en el Instituto Oncológico Nacional “Dr. Juan Tanca Marengo”, Sociedad de Lucha contra el Cáncer, Solca-Guayaquil, período enero 2020- junio 2021, con una muestra no probabilística, de pacientes con neoplasias, neutropenias y cultivos positivos. Se registraron variables demográficas, clínicas, de laboratorio. Se utiliza estadística descriptiva univariada.
Resultados: Se analizan 126 casos, de edad promedio 55 años, el 50.8% fue de sexo femenino; el 88.1 % ingresó con neutropenia febril; la estancia hospitalaria promedio fue de 7 días. La Escherichia coli fue el microorganismo más frecuente con el 17.5 %, seguido por Klebsiella pneumoniae en el 9.5 %, Enterobacter aerogenes y Pseudomonas aureginosa en el 4.8 %. El 70.2 % de las bacterias aisladas presentó resistencia bacteriana, el 47 % fueron bacterias betalactamasa de espectro ampliado (BLEA), el 40 % fue betalactamasa de espectro extendido (BLEE), y el 5 % productor de carbapenemasas (KPC), el 57.5 % con resistencia bacteriana tuvo una estancia hospitalaria mayor a 7 días.
Conclusión: El principal microorganismo fue Escherichia coli y la resistencia mayormente la tuvieron las bacterias betalactamasa de espectro ampliado positiva; permitiendo conocer la epidemiología local del perfil microbiológico y su relación con los pacientes oncológicos con neutropenia febril.
Abstract only
We have described a 60 kDa nuclear cysteine protease that degrades sperm histones during male chromatin remodeling after fertilization in sea urchins (SpH protease). This enzyme was ...shown to be localized in the mitotic furrow and to be involved in cell cycle control in sea urchin embryos. The N terminal sequence and the gene encoding this protease have homology with human cathepsin L family; therefore we investigated with antibodies raised against the sea urchins protease if a similar protease is present in Caco‐2 cells. Among Caco 2 chromosomal proteins obtained from confluent cell cultures, we found by Western blots, two bands migrating at 60 and 100 kDa in SDS/PAGE. We have also used these anti SpH protease antibodies to immunolocalize this protease in the intracellular context. This protease in mitotic cells localize on the mitotic furrow and remains in the nucleus in binuclear cells. On the other hand, when inhibitors of cysteine‐proteasas were used in different phases of the cell cycle we observed a disorganization of the mitotic spindle and an alteration in the localization of the protease during the S phase affecting DNA replication. Our results demonstrate that in Caco 2 cells exist a variant of cathepsin L protease that exhibits a similar localization to that was described for embryos of sea urchin, indicating a putative rol in cell proliferation. FONDECYT 11070067.
Esta investigación se caracterizó por el parto domiciliario que se realiza en comunidades de Salinas, Cuatro Esquinas, Cachisagua, Santa Fé del cantón Guaranda, provincia de Bolívar-Ecuador, práctica ...milenaria de la medicina ancestral, enfocando la cosmovisión indígena en la que, el parto es un ritual ancestral único, que ha permitido conocer diferentes técnicas realizadas al momento del parto domiciliario, actores y las causas del por qué algunas mujeres prefieren el parto domiciliario más no el hospitalario. Se entrevistaron 11 parteras comunitarias que cumplen un papel fundamental en este acto. Se realizó un estudio etnográfico narrativo, de acuerdo con sus saberes y tradiciones, describiendo el comportamiento sociocultural, para identificar los posibles riesgos y complicaciones que podrían presentar las madres y los niños.
Introducción: El consentimiento informado es un procedimiento que brinda oportunidad a los pacientes de disponer de información y participar en la toma de decisiones médicas. Sin embargo, existe el ...criterio de que el nivel de entendimiento de la información aportada por los facultativos al paciente, sus familiares o ambos, es bajo y además, muchos médicos lo consideran como una herramienta de trabajo secundaria o que no es necesario realizarla con inmediatez. Objetivo: Evaluar la percepción y experiencia del personal sanitario de la unidad de terapia polivalente del Hospital Docente Clínico Quirúrgico "Joaquín Albarrán" acerca del consentimiento informado. Método: Estudio descriptivo realizado en la unidad de terapia polivalente del Hospital "Joaquín Albarrán" de enero a marzo del 2013. Se aplicó una encuesta a 67 trabajadores que accedieron voluntariamente a responderla. Resultados: El 60 % de los encuestados tenía menos de dos años de trabajo en la unidad y solo el 45 %, conocimientos básicos de ética médica. Únicamente el 50 % de los interrogados consideró que este procedimiento puede mejorar la relación médico-paciente. Conclusiones: Es necesario incrementar el conocimiento sobre la utilidad del consentimiento informado entre los trabajadores de la unidad para aprovechar al máximo sus beneficios.
We report here that disruption of function of the ω-3 FATTY ACID DESATURASE7 (FAD7) enhances plant defenses against aphids. The suppressor of prosystemin-mediated responses! (sprl) mutation in tomato ...(Solatium lycopersicum), which eliminates function of FAD7, reduces the settling behavior, survival, and fecundity of the potato aphid (Macrosiphum euphorbiae). Likewise, the antisense suppression of LeFAD7 expression in wild-type tomato plants reduces aphid infestations. Aphid resistance in the sprl mutant is associated with enhanced levels of salicylic acid (SA) and mRNA encoding the pathogenesis-related protein P4. Introduction of the Naphthalene/salicylate hydroxylase transgene, which suppresses SA accumulation, restores wild-type levels aphid susceptibility to sprl. Resistance in sprl is also lost when we utilize virus-induced gene silencing to suppress the expression of NONEXPRESSOR OF PATHOGENESIS-RELATED PROTEINS1 (NPR1), a positive regulator of many SA-dependent defenses. These results indicate that FAD7 suppresses defenses against aphids that are mediated through SA and NPR1. Although loss of function of FAD7 also inhibits the synthesis of jasmonate (JA), the effects of this desaturase on aphid resistance are not dependent on JA; other mutants impaired in JA synthesis (acx1) or perception (jail-1) show wild-type levels of aphid susceptibility, and sprl retains aphid resistance when treated with methyl jasmonate. Thus, FAD7 may influence JA-dependent defenses against chewing insects and SA-dependent defenses against aphids through independent effects on JA synthesis and SA signaling. The Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) mutants Atfad7-2 and Atfad7-1fad8 also show enhanced resistance to the green peach aphid (Myzus persicae) compared with wild-type controls, indicating that FAD7 influences plantaphid interactions in at least two plant families.
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