Izhodišča: Cirkadiani ritem se uravnava na centralni in celični ravni preko transkripcijsko-translacijskih povratnih zank, ki so natančno uravnavane. Vpliv na uravnavanje cirkadianega ritma imajo ...miRNA molekule, ki skupaj s proteinskimi kompleksi privedejo do utišanja prevajanja določenih celičnih proteinov. Kronična motnja v cirkadianem ritmu lahko privede do maligne transformacije celic. Hepatocelularni karcinom je eden najpogostejših vrst raka pri človeku, pri katerem še vedno ni pojasnjen vpliv različnih signalnih poti na karcinogenezo. Namen študije je bil ugotoviti vpliv transkripcijskih dejavnikov cirkadianega ritma in miRNA na izražanje mRNA in krožnih RNA iz istega genskega lokusa, tj. gena LDLR (LDL receptor).
Metode: Poskus smo izvedli na celičnih linijah Hep G2 in Huh7. Sprva smo v celice s postopkom transfekcije vnesli želene molekule (hsa-miR-17 in cirkadiane transkripcijske faktorje), s katerimi smo želeli vplivati na izražanje genov, ki so nas zanimali. Iz celic smo nato osamili RNA, ki smo jo nato prepisali v komplementarno DNA in izvedli qPCR (kvantitativno verižno reakcijo s polimerazo), na podlagi katere smo sklepali na raven izražanja želenih genov. Rezultate smo računalniško obdelali in jih grafično predstavili.
Rezultati: Z obdelavo rezultatov smo ugotovili, da nobene od treh hipotez nismo uspeli potrditi, saj pri nobenem rezultatu v stopnji izražanja želenih genov nismo ugotovili statistično pomembne razlike (α=0,05).
Zaključki: Kljub temu da sprememb v izražanju genov nismo uspeli potrditi, bi bilo raziskovano področje vredno nadaljnjih raziskav, ki bi trdneje prikazale povezavo. Osrediniti bi se morali na konkretne molekule, s čimer bi pridobili nove tarče za zdravljenje jetrnih bolezni, s katerimi bi izboljšali kakovost življenja bolnikov s HCC. Ugotovili bi lahko tudi nove dejavnike tveganja, na podlagi katerih bi lahko bolje ozaveščali prebivalstvo o preventivi, ki bi zmanjšala incidenco HCC.
Ustno izražanje v tujem jeziku velja za najtežje obvladljivo sporazumevalno zmožnost, zato smo raziskali tipologijo in številčnost nalog v učbenikih, ki se v slovenskem srednješolskem prostoru ...uporabljajo za poučevanje španščine. Primerjali smo učbenike osnovane na dveh različicah komunikacijskega pristopa in različnih ravneh, izhajajoč iz tipološko raznolikih nalog. V analizi smo poleg količine in tipologije nalog opazovali tudi stopnjo vodenosti posameznih nalog. Rezultati analize so pokazali, da ne prihaja do pomembnejših razlik glede na izbrani pristop, temveč glede na raven, in sicer pri nalogah, ki niso vodene, in pri delno vodenih nalogah.
Aktivno vključevanje učencev v učni proces in razvijanje ustnega izražanja sta značilnosti, ki prepletata vse analizirane učbenike, razlike (ki učiteljem nudijo možnost, da za svojo ciljno skupino in svoj slog poučevanja izberejo ustrezen učbenik) pa se nahajajo v deležu nalog ustnega izražanja, prevladujočih tipih nalog in dinamikah, ki so za uspešno izvedbo nalog potrebne. Prav raznolikost v tipologiji pri učencih spodbuja (ustno) jezikovno produkcijo.
Spodbujanje samostojne govorne produkcije učencev je prisotno že od začetne ravni in v obeh pristopih, saj je delež nalog, ki omogočajo le reprodukcijo, relativno majhen. V učbenikih so precej bolj poudarjeni dialog, komentarji, pogovori, skratka razvijanje samostojnih govorcev, opremljenih s strategijami in orodji za učinkovito, tekoče in natančno ustno izražanje.
Vsi analizirani učbeniki omogočajo ustrezno razvijanje govorne produkcije v španščini, saj (v primerjavi s številom nalog za druge jezikovne spretnosti) nudijo uravnotežen in tipološko raznovrsten nabor nalog.
La guerre se définit comme une situation conflictuelle entre deux ou plusieurs pays, états, groupes sociaux, individus, avec ou sans lutte armée. Actuellement, la guerre en Syrie préoccupe les médias ...occidentaux, y compris la presse en ligne. La guerre civile syrienne a éclaté dans le contexte du Printemps arabe par des manifestations majoritairement pacifiques en faveur de la démocratie contre le régime baasiste dirigé par le président Bachar el-Assad. Elle sʼest rapidement transformée en rébellion armée qui a exigé lʼengagement de certains pays occidentaux, ce qui a provoqué de nombreuses discussions. Dans cette communication nous tentons de comprendre comment le phénomène de la guerre peut intervenir dans les choix de dévoilements identitaires des internautes. Il convient de préciser que le choix du pseudonyme est l’un des premiers actes de création individuelle de l’internaute : avant de s’exprimer par la langue, il va devoir se nommer. Lʼobjectif de notre article est dʼanalyser plus en détail quel est le lien entre l´expressivité des commentaires et lʼidentité numérique. Nous voulons aussi examiner si la possibilité de masquer lʼidentité est un facteur déclencheur de lʼusage des mots argotiques. Pour répondre à ces questions nous proposons une étude comparative de deux corpus de commentaires publics apparaissant sur des sites de presse en ligne qui décrivent la guerre en Syrie. Le premier corpus sera constitué sur la base de sites tchèques (Idnes.cz, Blesk.cz), le second sur la base de sites français (20.minutes.fr, Closer.fr), selon un protocole identique.
Eno izmed pomembnih izhodišč zadnje kurikularne prenove v Sloveniji, ki je zajela sistemska vprašanja vzgoje in izobraževanja (Bela knjiga, 2011) in učne načrte za obvezne predmete v osnovni šoli, je ...dejstvo, da je Slovenija integrirana v Evropo, zato naj bi v vzgojo in izobraževanje vključili tudi razvijanje temeljnih evropskih kompetenc. Ena teh je kulturna zavest in izražanje, ki je bila pri nas do zdaj predmet obravnave bolj v okviru kulturne kot pa šolske politike. Namen prispevka je kritično analizirati kurikularno prenovo likovne vzgoje, v okviru katere se z vidika nekaterih sestavin kompetence kulturne zavesti in izražanja predvideva, da učenec usvoji znanje o likovni umetnosti, razvije zmožnost doživljanja likovnih umetnin in oblikuje ustvarjalen odnos do likovne umetnosti in (umetnostne) dediščine. Ker je izhodišče in cilj kurikularnega spreminjanja kurikulum, sva pri analizi izhajali iz teorij kurikuluma in ne likovnopedagoških teorij, ki so pretežno okvirjale dozdajšnje poskuse analize kurikuluma. Kritičen razmislek o kurikularni prenovi likovne vzgoje v osnovni šoli z vidika nekaterih sestavin kompetence kulturne zavesti in izražanja sva tako naredili s primerjavo učnih načrtov na področju umetnosti oziroma estetske vzgoje, in sicer sva likovno vzgojo primerjali z glasbeno vzgojo in s književnostjo v okviru slovenščine. Kvalitativna analiza je pokazala, da učni načrt za likovno vzgojo kljub prenovi ne udejanja izbranih sestavinkompetence kulturne zavesti in izražanja, vzroke pa gre pripisati predvsem njegovi konceptualni strukturiranosti. Likovna vzgoja se osredotoča na likovno ustvarjanje, spoznavanje likovne umetnosti pa je zanemarjeno področje. Združevanje predmetov na področju umetnosti v šoli, ki ga predlaga Bela knjiga, zaradi obstoječega modela likovne vzgoje niti ni mogoče, analiza pa je s praktičnega vidika odprla tudi vprašanje znanja in kompetenc učiteljev.
Gene expression analysis by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) allows accurate and sensitive measurment of gene expression levels. However, a series of steps needs ...to be taken to ensure the relevance, accuracy, correct interpretation and repeatability of the RT-qPCR experiment. We describe here a simple experiment of determining relative gene expression for caspase 8 gene in chicken chondrocytes treated with an apoptosis inducing compound 5-fluorouracil. We use this example to point out some important guidelines in setting up a gene expression study in tissue cells, analyzing and interpreting the results and reporting on the findings.
Analiza izražanja genov z metodo reverznega pomnoževanja in kvantitativne verižne reakcije s polimerazo v realnem času (RT-qPCR) omogoča natančno in občutljivo določanje nivoja izražanja tarčnih genov. Vendar je za zagotavljanje točnosti, natančne interpretacije in ponovljivosti eksperimenta, predvsem pa relevantnosti rezultatov, pomembno natančno poznavanje korakov postopka. V tem prispevku opisujemo enostaven poskus, v katerem smo v celični liniji kokošjih hondrocitov, ki smo jih tretirali s spojino 5-fluorouracil, ki sproži apoptozo, določili relativno izražanje gena, ki kodira encim kaspazo 8. Ta primer smo uporabili za izpostavitev nekaterih pomembnih smernic pri oblikovanju študije izražanja genov v tkivnih celicah, analizi in interpretaciji rezultatov ter oblikovanju zaključkov.
Agrobacterium-mediated transformation of tobacco leaf disks with Agrobacterium tumefaciens (A. t.) strain LBA4404 and two plasmids (pCAMBIA1390-DsRed and pART27 2mgfp5- ER) was used for introducing ...red fluorescent gene (DsRed), green fluorescent gene (gfp) and corresponding selection genes (hptII for resistance to antibiotic hygromycin and nptII for resistance to kanamycin) into leaf discs of tobacco (Nicotiana tabacum L.). Epifluorescent microscopy with the appropriate set of filters did not reveal phenotypic expression of the DsRed gene in 6.9 % of regenerants and the gfp gene in 1.3 % of regenerants that were successfully grown on selective medium. The duplex PCR method also did not confirm the presence of fragments specific to DsRed or gfp genes in these regenerants, while the presence of fragments characteristic of selection genes hptII and nptII was confirmed. A built-in nptII gene mutation, a deletion, was detected in one regenerant. Out of the 139 regenerants generated after the transformation of A. t.-pCAMBIA1390-DsRed, 38 or 25.5 % successfully grew only on non-selective medium; after transformation with A. t.- pART27 2mgfp5-ER 9 or 5.4 % of the 161 generants grew successfully. PCR analysis confirmed in all regenerants the presence of fragments characteristic of both transgenes, which were not expressed or were silenced. The effectiveness of transformation after infection with A. t.-pCAMBIA1390- DsRed was 93.1 %, and 98.7 % after infection with A. t.- pART27 2mgfp5-ER. We established that both fluorescent genes are suitable for setting up a transformation system. The antibiotics hygromycin and kanamycin successfully prevented the growth of untransformed tissues, but the antibiotic timentin successfully prevented the growth of bacteria A. t. after the transformation.
Z metodo posredne transformacije z vektorskim sistemom Agrobacterim tumefaciens (A. t.) sev LBA4404 in dvema plazmidoma (pCAMBIA1390-DsRed in pART27 2mgfp5-ER) smo v listne izsečke tobaka (Nicotiana tabacum L.) vnesli fluorescentni markerski gen za rdečo (DsRed) oz. zeleno (gfp) fluorescenco ter selekcijska gena za odpornost na antibiotik higromicin (hptII) oz. kanamicin (nptII). Z epifluorescentnim mikroskopom in ustreznim setom filtrov nismo zasledili fenotipskega izražanje DsRed gena pri 6,9 % regenerantih in gfp gena pri 1,3 % regenerantih, ki so uspešno rastli na selekcijskem gojišču. Pri teh regenerantih tudi z dupleks PCR metodo nismo potrdili prisotnosti fragmentov značilnih za DsRed oz. gfp gen, medtem ko smo potrdili prisotnost fragmentov značilnih za selekcijska gena hptII in nptII. Pri enem regenerantu smo v vgrajenem nptII genu zasledili mutacijo in sicer delecijo. Od 139 nastalih regenerantov, po transformaciji z A. t.-pCAMBIA1390-DsRed, jih je 38 oz. 25,5 % uspešno rastlo le na neselekcijskem gojišču, po transformaciji z A. t.-pART27 2mgfp5-ER je bilo takih 9 oz. 5,4 % od 161 nastalih. Pri vseh smo s PCR analizo potrdili prisotnost fragmentov značilnih za oba transgena, ki se nista izražala oz. sta bila utišana. Učinkovitost transformacije po okužbi z A. t.-pCAMBIA1390-DsRed je bila 93,1 %, po okužbi z A. t.-pART27 2mgfp5-ER pa 98,7 %. Ugotovili smo, da sta oba fluorescentna gena primerna za vzpostavitev transformacijskega sistema. Antibiotika higromicin in kanamicin sta uspešno preprečila rast netransformiranih tkiv, antibiotik timentin pa je uspešno preprečil rast bakterije A. t. po transformaciji.
Language development in toddlerhood & early childhood progresses very quickly, while individual developmental phases are the same irrespective of the language the child is acquiring. The aim of this ...longitudinal study was to examine the characteristics of children's language comprehension & expression, & their pragmatic use of language, as well as to determine the developmental language changes that occur between the ages of three & four. The sample involved 80 randomly selected children, 39 girls & 41 boys, whose average age at the first evaluation was 3,1 years & at the second 4,1 years. The research also involved the mothers & teachers of the children included in the sample. The children's language comprehension & expression were determined using a Language Development Scale, & their pragmatic use of language was assessed through testing their storytelling abilities. Their language competence was also evaluated by their teachers & mothers. The results highlight significant differences between three- & four-year-olds as shown by the Language Development Scale & by their storytelling abilities, as well as in the evaluations by their teachers & mothers. Among three-year-olds, stories at the 2nd level of coherence prevailed, i.e., containing simple descriptions of people, objects or illustrations, whereas four-year-olds most often told stories at the 3rd level, i.e., containing a simple temporal stringing together of events. The child's gender had no significant effect on development between the age of three & four. In interpreting the results, we drew upon the findings of both Slovenian & foreign authors relating to different aspects of language development in toddlers & young children. Figures, References. Adapted from the source document
PDF
