L’objectif de cette étude était de déterminer la prévalence des entérovirus (EV) dans des eaux usées urbaines et d’en préciser les sérotypes circulants.
Après une concentration des virus selon les ...recommandations de l’OMS, les phases aqueuses de 68 échantillons d’eaux usées ont été inoculées sur les lignées cellulaires BGM, RD, Hep2C et L20B. Le typage des isolats après titrage a été réalisé par séroneutralisation en microplaque à l’aide des pools d’antisérums dirigés contre les EV (kit RIVM/OMS). Les souches entérovirus non polio (ENPV) ont été confirmées par le test RT-PCR en région génomique 5′NC des EV. Les tests antigéniques et moléculaires de différentiation intratypique des Poliovirus ont été réalisés pour déterminer la nature sauvage ou vaccinale des souches de Poliovirus isolées.
L’isolement viral a permis d’obtenir 43/68 (65,15 %) échantillons positifs dont 35/43 (81,39 %) étaient après identification des EV et 8/43 (19,04 %) des souches non EV. Parmi les EV, 34/35 (97,14 %) étaient des ENPV et 2/35 (5,71 %) des Poliovirus de type 2 vaccinal (Sabin-like). Le typage des souches a donné 77 % de non typables par la méthode conventionnelle. La moyenne de la concentration virale estimée dans ces eaux usées brutes est de 4,28×105 UFP/L.
Les différents contacts entre les populations et ces eaux exposent celles-ci à des risques sanitaires multiples liés aux entérovirus.
The aim of this study was to determine prevalence of enteroviruses in raw municipal wastewater and specify serotypes circulating.
After virus concentration by WHO recommend method, aqueous phase of 68 samples was inoculate on BGM, RD, L20B and Hep2 cells lines. Typing after titration was performed by microplate neutralization test with specific horse immune serum against EV (kit RIVM/WHO). NPEV strains were confirmed by RT-PCR test in 5′NC genomic region. Antigenic and molecular tests of Polioviruses intratypic differentiation were performed to determine vaccine or wild origin of Poliovirus strains.
Viral isolation obtained 43/68 (65.15 %) positives samples. Among these 35/43 (81. 39%) were EV and 8/43 (19.04 %) non EV strain. Among EVs, 34/35 (97.14 %) were NEPV and 2/35 (5.71 %) vaccinal Poliovirus strains type 2 (Sabin-like). NEPV typing gave 77 % untypeable strains by conventionally method. The average virus concentration estimated in the raw sewage is 4.28×105 PFU/L.
Various contacts between people and these waters expose them to health risks.
La recombinaison est l’un des mécanismes majeurs d’évolution des poliovirus. Dans ce travail, la fréquence et le type de recombinants ont été étudiés chez des souches excrétées en cours de ...vaccination par le vaccin poliomyélitique oral (VPO) et parmi les souches vaccinales isolées en Tunisie durant les 15 dernières années, afin d’identifier un éventuel rôle de la recombinaison dans la réponse au vaccin ou l’acquisition d’un pouvoir de circulation accru.
L’étude a porté sur 250 souches de poliovirus vaccinal, dont 137 excrétées en cours de vaccination, et 113 isolées chez des enfants suspects de poliomyélite et leurs contacts sains. La recherche de recombinants a été faite par une double PCR-RFLP et par séquençage.
Dix-neuf pour cent de souches recombinantes ont été retrouvées : 20 % des souches excrétées en cours de vaccination et 18 % des souches circulantes. La proportion de recombinants de type1 était très faible dans les deux groupes contrairement les proportions pour les sérotypes2 et 3 étaient différentes. En cours de vaccination, la proportion de recombinants de type3 diminue avec le nombre de doses vaccinales : 54 % après la première dose, 32 % après la deuxième et 14 % après la troisième dose. En dehors d’une vaccination récente, elle est aussi fréquente pour le sérotype 2 et 3.
Ainsi, la recombinaison pourrait contribuer à l’induction d’une réponse immune antisérotype 3, lors de la vaccination, et à une transmissibilité accrue des souches de type 2 et 3, en dehors de vaccination récente.
Recombination is one of the major mechanisms of evolution in poliovirus. In this work, recombination was assessed in children during vaccination with OPV and among circulating vaccine strains isolated in Tunisia during the last 15 years in order to identify a possible role of recombination in the response to the vaccine or the acquisition of an increased transmissibility.
This study included 250 poliovirus isolates: 137 vaccine isolates, excreted by children during primary vaccination with OPV and 113 isolates obtained from acute flaccid paralytic (AFP) cases and healthy contacts. Recombination was first assessed using a double PCR-RFLP, and sequencing.
Nineteen per cent of recombinant strains were identified: 20% of strains excreted by vaccinees among 18% of circulating strains. The proportion of recombinant in isolates of serotype1 was very low in the two groups while the proportions of recombinants in serotypes 2 and 3 were different. In vaccinees, the frequency of recombinants in serotype3 decreased during the course of vaccination: 54% after the first dose, 32% after the second and 14% after the third dose.
These results suggest that recombination enhances the ability of serotype3 vaccine strains to induce an immune response. Apart from recent vaccination, it may contribute to a more effective transmissibility of vaccine strains among human population.
PDF
