Selective UV-spectrophotometric methods for determination of iron(III) in iron(II) samples have been developed. The methods are based on the interaction of Fe(III) with quercetin and morin, compounds ...of the flavonoid group. Redox reactions occurring between Fe(III) ions and the reagents used make the basis for the detection. Iron(II) does not react with quercetin and morin under the conditions applied aqueous-methanolic (3:2) soluions, 0.3 mol L-1 HCl, 1.2 x 10-4 mol L-1 quercetin (morin) and does not interfere with the determination of Fe(III). Iron(III) can be determined up to 15 μg mL-1 using both the examined systems. The detection limits are 0.06 and 0.38 μg mL-1 when using quercetin or morin, respectively. The method with quercetin was applied to the determination of Fe(III) (ca. 0.2%) in a Fe(II) pharmaceutical product.
U radu je opisan razvoj selektivnih UV-spektrofotometrijskih metoda za određivanje željeza(III) u uzorcima željeza(II). Metode se temelje na redoks reakciji Fe(III) sa spojevima iz skupine flavonoida -- kvercetinom i morinom u reakcijskim uvjetima u kojima željezo(II) ne reagira (vodeno/metanolna otopina 3:2, 0,3 mol L-1 HCl, 1,2 x 10-4 mol L-1 kvercetin ili morin). Najniža koncentracija željeza(III) koja se može odrediti u oba ispitivana sustava je 15 μg mL-1. Granice detekcije su 0,06 i 0,38 μg mL-1 ako se koristi kvercetin odnosno morfin. Metoda s kvercetinom primijenjena je za određivanje Fe(III (približno 0,2%) u farmaceutskom proizvodu Fe(II).
Flavonoidne sastavnice propolisa biološki su aktivne tvari koje posjeduju antioksidativna, protutumorska, imunomodulacijska i protuupalna svojstva. Istražili smo citotoksično djelovanje polifenolnih ...spojeva (kvercetina, kavene kiseline, krizina, naringenina i naringina) na različite linije leukemijskih stanica (MOLT, JURKAT, HL-60, RAJI, U937). Stanice su inkubirane u mediju RPMI-1640 obogaćenom 10 %-tnim fetalnim telećim serumom, pri temperaturi od 37 °C u atmosferi s 5 % CO2, uz dodatak polifenolnih/flavonoidnih spojeva različitih koncentracija (100 µg mL-1, 50 µg mL-1, 25 µg mL-1 i/ili 12,5 µg mL-1). Utvr|eno je da citotoksičnost flavonoida ovisi o vrsti i koncentraciji; najjači citotoksični učinak imaju kvercetin te krizin i kavena kiselina. Krizin i/ili naringenin primijenjeni na U937 i HL-60-stanice stimuliraju proliferaciju stanica, {to upućuje na bifazni učinak istraživanih spojeva na monocitne leukemijske stanice. Dobiveni rezultati upućuju na potrebu daljnjih istraživanja učinkovitosti flavonoida na molekularnoj razini.
Pozadina istraživanja. Otpaci od hrane, kao što su ovojne ljuske luka i lišće masline, bogati su bioaktivnim spojevima koji se mogu primijeniti kao prirodni i jeftini izvor antioksidansa. Ti su ...spojevi uglavnom prisutni u glikoliziranom obliku. Često se hidrolizom glikozidnih spojeva poveća njihov antioksidacijski učinak i ljekovita svojstva. Međutim, malo je istraživanja o učinku β-glukozidaze, osobito one dobivene iz plijesni Aspergillus niger, na glikozilirane spojeve u tim nusproizvodima prehrambene industrije. Osim toga, dosad nisu objavljeni podaci o utjecaju β-glukozidaze na promjenu njihove antioksidacijske aktivnosti. Stoga je u ovom radu ispitan učinak β-glukozidaze dobivene iz plijesni A. niger na glikozidne spojeve i antioksidacijsku aktivnost ekstrakata iz ljusaka luka i maslinovog lišća.
Eksperimentalni pristup. Antioksidacijska aktivnost ekstrakata određena je pomoću metoda DPPH i FRAP. Također, određeni su koncentracija glukoze te ukupni udjeli fenola i flavonoida. Uz to, uzorci su ispitani tankoslojnom kromatografijom (TLC) i tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti (HPLC) prije i poslije enzimske hidrolize.
Rezultati i zaključci. Dobiveni rezultati pokazuju da je nakon obrade enzimom došlo do povećanja antioksidacijske aktivnosti ekstrakata. Osim toga, obrada β-glukozidazom je povećala koncentraciju glukoze u ekstraktu. Rezultati TLC i HPLC analiza potvrdili su učinkovitost β-glukozidaze u hidrolizi kvercetin glukozida iz ekstrakta ljuske luka. Koncentracija se kvercetina povećala s (0,48±0,04) mg/mL u netretiranom uzorku na (1,26±0,03) mg/mL u tretiranom uzorku (0.5 % m/V) nakon 3 sata hidrolize pri 45 °C. Također, udjel se kvercetin-3-O-glukozida nakon tretiranja pomoću enzima bitno povećao s (1,8±0,1) na (54±9) μg/mL. Povrh toga, oleuropein iz ekstrakta lista masline (1 % m/V) u potpunosti je hidroliziran pomoću β-glukozidaze, pa je njegova koncentracija s 0,382±0,016 pala na 0 mg/mL tijekom 24 h pri 50 °C.
Novina i znanstveni doprinos. U radu je prikazano da β-glukozidaza, stabilni enzim izoliran iz plijesni A. niger, hidrolizira kvercetin i oleuropein glikozide iz ekstrakata ovojne ljuske luka i maslinovog lišća. Zaključeno je da je β-glukozidaza iz A. niger pogodna za obradu otpada od hrane i ekstrakciju vrijednih bioaktivnih spojeva. Osim toga, dobiveni se ekstrakti s većom antioksidacijskom i biološkom aktivnošću, a koji nemaju gorak okus, mogu primijeniti u prehrambenoj industriji kao jaki, prirodni antioksidansi prihvatljive cijene.
Flavonoidne sastavnice propolisa biološki su aktivne tvari koje posjeduju antioksidativna, protutumorska, imunomodulacijska i protuupalna svojstva. Istražili smo citotoksično djelovanje polifenolnih ...spojeva (kvercetina, kavene kiseline, krizina, naringenina i naringina) na različite linije leukemijskih stanica (MOLT, JURKAT, HL-60, RAJI, U937). Stanice su inkubirane u mediju RPMI-1640 obogaćenom 10%-tnim fetalnim telećim serumom, pri temperaturi od 37 °C u atmosferi s 5% CO2, uz dodatak polifenolnih/flavonoidnih spojeva različitih koncentracija (100 μg mL-1, 50 μg mL-1, 25 μg mL-1 i/ili 12,5 μg mL-1). Utvrđeno je da citotoksičnost flavonoida ovisi o vrsti i koncentraciji; najjači citotoksični učinak imaju kvercetin te krizin i kavena kiselina. Krizin i/ili naringenin primijenjeni na U937 i HL-60-stanice stimuliraju proliferaciju stanica, što upućuje na bifazni učinak istraživanih spojeva na monocitne leukemijske stanice. Dobiveni rezultati upućuju na potrebu daljnjih istraživanja učinkovitosti flavonoida na molekularnoj razini.
Flavonoid components of propolis are biologically active substances with antioxidative, immunostimulative, immunomodulative, and anti-inflamatory properties. The aim of the study was to investigate their cytotoxic effect on different leukaemia cell lines. For this purpose we used five different flavonoids (quercetin, caffeic acid, chrysin, naringenin, and naringin) and five types of leukemia cell lines (MOLT, JURKAT, HL-60, RAJI and U937). Cells were cultured at 37 °C in the RPMI-1640 medium supplemented with 10% FCS in humified atmosphere with 5% of CO2. Flavonoids were added in the following concentrations: 100 μg mL-1, 50 μg mL-1, 25 μg mL-1, or 12.5 μg mL-1. The results show different dose- and cell-type-dependent cytotoxicity. Among the flavonoids, quercetin showed the strongest cytotoxic effect in all cell lines. Caffeic acid and chrisyn also expressed a high level of cytotoxicty. Treatment of U937 and HL-60 cell lines with low concentrations of chrisyn or naringenin stimulated cell proliferation. These results suggest a biphase effect of the tested compounds on monocyte cell lines. Cytotoxicity and growth stimulation mechanisms caused directly by flavonoids should further be investigated on the molecular level.
Ginkgo biloba L. najstarija je biljka na zemlji, a pripravci od njegovih listova i sjemenaka dio su kineske medicine već više tisuća godina. Vrstu je 1771. godine otkrio Linnaeus, a ime je dobila od ...latinskih riječi bis, tj. dva i lobus zbog specifičnog oblika lista. Današnji farmaceutski oblici biljke Ginkgo biloba L. sadrže uglavnom ekstrakte iz listova ubranih ujesen kada je najveća koncentracija aktivnih komponenata. Suvremenim istraživanjima određen je kemijski sastav njegovog lista, a utvrđeni su i mehanizmi njegovog pozitivnog djelovanja na reološka svojstva krvi i ubrzanje njezinog protoka. Visoka cijena i velika popularnost ubrzo su postali poticaj za krivotvorenje ekstrakta biljke Ginkgo biloba L. jeftinijim ekstraktima drugih biljaka. Naime, suvremeni medicinski proizvodi i dodaci prehrani na osnovi biljke Ginkgo biloba L. sadrže ekstrakte njegovog lista koji se standardiziraju prema njegovim ključnim farmakološki aktivnim sastavnicama; najčešće je to 22%-27% flavonoid glikozida i 6%-7% terpenskih trilaktona. Kvercetin, kempferol i izoramnetin su dominantni i farmakološki najvažniji flavonoidi, a njihova ukupna količina i međusobni omjeri nedvojben su pokazatelj autentičnosti ekstrakta. Stoga se i većina analiza za utvrđivanje ispravnosti proizvoda koji sadrže biljku Ginkgo biloba L. temelji na analizi ovih parametara. Krivotvorenja podrazumijevaju djelomičnu ili potpunu zamjenu ektrakta Ginkgo biloba L. nekim jeftinijim biljnim ekstraktom sličnog sastava uz eventualno obogaćivanje dodatnom količinom flavonoida, najčešće kvercetina, koji ne potječu od biljke Ginkgo biloba L. Svrha ovoga rada bila je provjeriti autentičnost i kakvoću pripravaka Ginkgo biloba L. na hrvatskom tržištu. Analizirano
je ukupno 10 uzoraka različitih proizvođača. Kao pokazatelji njihove ispravnosti određivani su udjeli aglikona karakterističnih
ginkoflavonoglikozida: kvercetin, kempferol i izoramnetin te omjeri nađenih količina kvercetina i kempferola kao ključni pokazatelji krivotvorenja ginkgo-ekstrakta. Količina ginkoflavonoglikozida određena je metodom tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti. Analizom je utvrđeno da 80% uzoraka odgovara navodima deklaracije u pogledu ukupne količine flavonoglikozida kao i u pogledu njihovog međusobnog omjera. U 20% uzoraka omjer kvercetina i kempferola odstupao je od uobičajenih vrijednosti, a dokazano je i prisustvo fitoestrogena genisteina, jedne od karakterističnih sastavnica biljke Sophora japonica L., čijim ekstraktom je krivotvoren ginkgo-ekstrakt u analiziranim uzorcima. Zbog neistinite deklaracije na proizvodima koji su sadržavali ove ekstrakte izostalo je i obvezno upozorenje o prisutnosti farmakološki aktivnog genisteina koji može izazvati neželjene zdravstvene posljedice kod pojedinih skupina potrošača. Rezultati ovoga rada ukazuju na značajnu pojavnost krivotvorenja proizvoda biljke Ginkgo biloba L. na hrvatskom tržištu te se zbog toga predlaže njihova
temeljitija kontrola kao i sankcioniranje neodgovornih proizvođača i trgovaca, čime bi se doprinijelo većem udjelu kvalitetnijih proizvoda i izbjegli zdravstveni rizici te smanjila pojavnost prijevare.
Hydra (Cnidaria) je kozmopolitski slatkovodni beskralježnjak koji uspostavlja simbiozu s jednostaničnim algama. Njezino jednostavno tijelo sastoji se od tri sloja: epiderma, mezogleje i gastroderma. ...Cilj ovoga istraživanja bio je utvrditi utjecaj flavonoida kvercetina i naringenina na simbiozu hidre i alge, odrediti koliko su nastavnici motivirani za primjenu takvog načina poučavanja te ovisi li navedena motivacija o njihovoj dobi, godinama radnog iskustva, školi u kojoj rade, raspoloživom vremenu, prostoru i materijalima. U istraživanju je upotrijebljena anonimna anketa na uzorku od 100 nastavnika biologije. Hidre i alge tretirane su kvercetinom i naringeninom pri koncentracijama od 0,2, 0,25 i 0,3 gL-1 i uspoređene su s kontrolnim uzorkom, a koristio se biološki test Chlorella test. Morfološke promjene uključivale su migraciju, reakciju na mehaničke podražaje, nespolno razmnožavanje, izlučivanje sluzi i smrtnost. Citološko-histološkom analizom utvrđene su promjene svih triju slojeva, kao i inhibicije rasta. Naringenin je imao ukupno veći učinak od kvercetina. Rezultati dobiveni anketom pokazali su da su nastavnici spremni izvoditi navedeni eksperiment u školi te da većina škola ima minimalnu potrebnu opremu. Zbog mogućnosti prilagodbe opisanog eksperimenta različitim vremenskim i prostornim uvjetima, predlaže se njegova primjena u školi.
Morin, hesperidin and quercetin belong to flavonoids, a large class of compounds. Flavonoids have important biological and physiological activity. Thus, it is of interest to develop simple, accurate ...and precise method for the determination of morin, hesperidin and quercetin in different samples. Morin is a flavonol antioxidant. In ethanol–water mixtures (70 v/v % of ethanol) it reacts with aluminium (III) ion to give Al(Mor)2 in the pH range 3–6. The complex shows strong fluorescence emission at 500 nm upon excitation at 410 nm. The fluorescence intensity is pH dependent with maximum emission at pH 4,40. The conditional stability constant of this complex at 298 K was found to be log β2 = 16,96 at pH 4,40. Since the complexation reaction enhances the fluorescence of morin, this property was used for the determination of morin in human serum. A linear dependence of the intensity of fluorescence of the complex on the concentration of morin was obtained in morin concentration range from 1,5–30,5 ng cm-3. The limit of detection, LOD was 0,02 ng cm-3 while limit of quantification, LOQ was 1,0 ng cm-3. Serum concentration of morin was also determined using RP-HPLC as a reference method. A spectrofluorometric method, based on the fluorescence properties of the aluminium(III)–hesperidin complex, AlHesp2+, for the determination of hesperidin in human plasma and pharmaceutical forms has been developed and validated. The complex shows a strong emission in the presence of the surfactant betain sulphonate SB 12 at 476 nm with excitation at 390 nm. The conditional stability constant of this complex at 298 K was found to be log β1 = 9,20 at pH 4,50. The linearity range for pharmaceutical forms of hesperidin was 0,06–24,4 μg cm-3 with a limit of detection, LOD, of 0,016 μg cm-3 and a limit of quantification, LOQ, of 0,049 μg cm-3. Recovery values in the range 99,3–99,7 % indicate good accuracy of the method. A linear dependence of the intensity of fluorescence of the complex on the concentration of hesperidin in plasma was obtained in concentration range from 0,1–12,2 μg cm-3. The LOD was 0,032 μg cm-3 while LOQ was 0,096 μg cm-3. Recovery values were in the range 98,4–99,8 %. The reliability of the method was checked by an LC–MS/MS method for plasma samples and an HPLC/UV method for tablets with direct determination of hesperidin after separation. Linearity range in determination of hesperidin in pharmaceutical forms was obtained in the range from 0,05 to 10,00 μg cm-3. The LOD was 0,01 μg cm-3 and the LOQ was 0,03 μg cm-3. The linearity range for the determination of hesperidin in human plasma was 0,02–10,00 μg cm-3 with an LOD 0,005 μg cm-3 and an LOQ of 0,015 μg cm-3. The good agreement between the two methods indicates the usability of the proposed fluorometric method for the simple, precise and accurate determination of hesperidin in clinical and quality control laboratories. The spectrofluorometric method based on fluorescence ability of aluminium – hesperidin complex for the determination of hesperidin in orange juice is proposed. The linearity range of hesperidin in methanolic-aqueous solution was 0,08 – 18,0 μg cm-3 with LOD and LOQ values as 0,023 μg cm-3 and 0,070 μg cm-3, respectively. Method was simplified by omitting any of surphactant agents usually applied in similar procedures, and successfully applied for the determination of hesperidin in orange juices commercially available on the Serbian market. Quercetin is a flavonol antioxidant. IIn methanol – water mixtures (70 v/v % of ethanol) it reacts with aluminium (III) ion to give Al2Querc+4 in the pH range 2,0–5,5. The complex shows strong fluorescence emission at 480 nm upon excitation at 420 nm. The fluorescence intensity is pH dependent with maximum emission at pH 3,33. The conditional stability constant of this complex at 298 K was found to be log β = 27,79 at pH 3,20. Since the complexation reaction enhances the fluorescence of quercetin, this property was used for the determination of quercetin in dosage forms. A linear dependence of the intensity of fluorescence of the complex on the concentration of quercetin was obtained in quercetin concentration range from 1,5 to 60,5 ng cm-3. The LOD was 0,09 ng cm-3 while LOQ was 0,27 ng cm-3. Concentration of quercetin was also determined using RP-HPLC as a reference method. Quercetin and aluminium(III)-ion form a stable complex and the resulted emission at 480 nm can be used for the determination of the total phenols concentration expressed in terms of “quercetin equivalent” (QE).
Morin, hesperidin i kvercetin pripadaju flavonoidima, koji imaju značajnu biološku i fiziološku aktivnost, zbog čega je bilo potrebno razviti jednostavne, precizne i tačne metode za njihovo određivanje u različitim uzorcima. Predložena je spektrofluorimetijska metoda za određivanje morina u 70 v/v % etanolu i u humanom serumu, zasnovana na fluorescenciji kompleksa aluminijum(III)– morin. Ovaj kompleks ima sastav aluminijum(III) : morin = 1 : 2. Formirani kompleks je stabilan u pH oblasti od 3,0 do 6,0 i pokazuje intenzivnu fluorescenciju na lem = 500 nm pri eksitaciji na lex = 410 nm. Intenzitet fluorescencije nastalog kompleksa zavisi od pH vrednosti rastvora, i najveći je na pH = 4,40, a vrednost konstante stabilnosti na ovoj vrednosti pH iznosi log β2 = 16,96. Dobijena je linearna zavisnost intenziteta emitovanog zračenja od koncentracije morina u oblasti od 1,5 do 30,5 ng cm-3. Granica detekcije je iznosila 0,02 ng cm-3 a granica kvantifikacije 0,06 ng cm-3. Pouzdanost predložene metode proverena je referentnom RP-HPLC/UV metodom. Razvijena je spektrofluorimetijska metoda za određivanje hesperidina u humanoj plazmi i farmaceutskim preparatima koja se zasniva na fluorescenciji kompleksa aluminijum(III)–hesperidin, čiji je sastav aluminijum(III) : hesperidin = 1 : 1. Kompleks pokazuje intenzivnu fluorescenciju u prisustvu surfaktanta SB 12 na lem = 476 nm pri ekscitaciji na lex =390 nm i stabilan je u pH opsegu od 3,0 do 7,0. Konstanta stabilnosti ovog kompleksa na pH = 4,50 je log β1 = 9,20. Linearna zavisnost intenziteta fluorescencije od koncentracije, pri određivanju hesperidina u farmaceutskim preparatima dobijena je u koncentracionom opsegu 0,06–24,4 μg cm-3 sa granicom detekcije od 0,016 μg cm-3 i granicom kvantifikacije od 0,049 μg cm-3. Dobijene „recovery“ vrednosti u intervalu od 99,3–99,7 % pokazuju veliku tačnost metode. Linearna zavisnost intenziteta fluorescencije kompeksa od koncentacije hesperidina pri određivanju u uzorcima humane plazme dobijena je u koncentracionom opsegu od 0,1–12,2 μg cm-3 sa granicom detekcije od 0,032 μg cm-3 i granicom kvantifikacije od 0,096 μg cm-3. „Recovery“ vrednosti su dobijene u opsegu 98,4 do 99,8 %. Pouzdanost metode proverena je LC–MS/MS metodom za određivanje hesperidina u humanoj plazmi, a HPLC/UV metodom prilikom određivanja hesperidina u farmaceutskim preparatima. Linearna zavisnost pri određivanju hesperidina u farmaceutskim preparatima dobijena je u intervalu od 0,05–10,00 μg cm-3. Granica detekcije, LOD je iznosila 0,01 μg cm-3, granica kvantifikacije, LOQ 0,03 μg cm-3. Linearna zavisnost pri određivanju hesperidina u humanoj plazmi je dobijena u intervalu 0,02–10,00 μg cm-3 sa granicom detekcije od 0,005 μg cm-3 i granicom kvantifikacije od 0,015 μg cm-3. Dobro slaganje između ove dve metode pokazuje primenljivost spektrofluorimetrijske metode u kliničkim laboratorijama i laboratorijama za kontrolu kvaliteta. Predložena fluorimetrijska metoda je jednostavna, pouzdana i precizna za određivanje hesperidina u humanom serumu i farmaceutskim preparatima. Predložena je spektrofluorimetrijska metoda za određivanje sadržaja hesperidina u sokovima od pomorandže zasnovana na fluorescenciji kompleksa aluminijum– hesperidin. Linearna zavisnost za određivanje hesperidina u rastvorima metanol-voda dobijena je u koncentracionom intervalu od 0,08 do 18,0 μg cm-3, pri čemu je granica detekcije iznosila LOD = 0,023 μg cm-3, a granica kvantifikacije LOQ = 0,070 μg cm-3. Predložena metoda je pojednostavljena izostavljanjem površinski aktivnih materija koje se koriste u sličnim procedurama i uspešno je primenjena za određivanje sadržaja hesperidina u sokovima od pomorandže prisutnim na tržištu Srbije. Predložena je spektrofluorimetijska metoda za određivanje kvercetina u farmaceutskim preparatima, koja je zasnovana na fluorescenciji kompleksa aluminijum(III)–kvercetin, sastava aluminijum(III) : kvercetin = 2 : 1. Kompleks aluminijum(III)–kvercetin pokazuje intenzivnu fluorescenciju na lem = 480 nm pri eksitaciji na lex = 420 nm, i stabilan je u pH oblasti od 2,0 do 5,5. Intenzitet fluorescencije nastalog kompleksa zavisi od pH vrednosti rastvora, i najveći je na pH = 3,33. Konstanta stabilnosti ovog kompleksa na pH = 3,20 iznosi log β = 27,79. Linearnost je dobijena u koncentracionom opsegu od 1,5 do 60,5 ng cm-3 kvercetina. Granica detekcije je iznosila LOD = 0,09 ng cm-3, a granica kvantifikacije LOQ = 0,27 ng cm-3. Pouzdanost predložene metode proverena je referentnom RP-HPLC/UV metodom. Linearnost je dobijena u koncentracionom opsegu od 1,0 do 200,0 μg cm-3 Granica detekcije kvercetina RPHPLC/ UV metodom je iznosila 0,066 μg cm-3 a granica kvantifikacije 0,200 μg cm-3 kvrercetina. Predložena je spektrofluorimetrijska metoda za određivanje ukupnog sadržaja polifenola u soku od jabuka pri čemu je sadržaj ukupnih polifenola izražen u odnosu ekvivalent kvercetina (QE), koji je određivan spektrofluorimetrijski.
Štetni učinci povišenih razina katekolamina posredovani su različitim mehanizmima, uključujući transkripciju gena i formiranje produkata oksidacije. Svrha je ovoga istraživanja bila utvrditi jesu li ...molekularni mehanizmi koji stoje u osnovi štetnoga djelovanja adrenalina na DNA posredovani reaktivnim vrstama kisika (ROS). Da bismo to postigli, izložili smo humane stanice pune krvi adrenalinu (10 μmol L-1) i vodikovu peroksidu (50 μmol L-1) (pozitivna kontrola), koje su odvojeno predtretirane i post-tretirane kvercetinom (500 μmol L-1), „hvatačem“ slobodnih radikala. Kvercetin je značajno smanjio broj stanica s DNA oštećenjima i u predtretmanu i u post-tretmanu, što je sugeriralo da adrenalin djeluje uglavnom stvaranjem ROSa. Taj je mehanizam podržan i postupnim smanjenjem broja stanica s oštećenjima DNA izazvanim adrenalinom i H2O2 u vremenskim intervalima od 15, 30, 45 i 60 minuta nakon tretmana. Naši rezultati jasno pokazuju da su mehanizmi popravka prilično učinkoviti u odnosu na ROS-posredovana oštećenja DNA izazvana adrenalinom.
U ovom je radu za određivanje malih koncentracija kvercetina u uzorku korištena grafitna elektroda prethodno obrađena kronoamperometrijski u otopini fosfatnog pufera (pH=7). Metodom diferencijalne ...pulsne anodne „stripping“ voltametrije praćena je oksidacija kvercetina na grafitnoj elektrodi. Pri optimalnim uvjetima odnos struje nastale oksidacijom kvercetina na anodi i njegove koncentracije u uzorku bio je linearan u rasponu od 0,001 do 1,5 μmol/L, s limitom detekcije od 0,3·10-3 μmol/L. Predložena je metoda uspješno primjenjena za određivanje koncentracije kvercetina u sokovima od brusnice i crnog ribiza, s iskorištenjem od 93,2 do 94,7 %. Prije voltametrijskog određivanja koncentracije kvercetina pomoću grafitne elektrode potrebno je prethodno pročistiti i koncentrirati uzorke voćnih sokova estrakcijom na čvrstoj fazi.
Hidrostatski tlak, koji nastaje zbog blokade mokraćnog trakta, izaziva oštećenje bubrega. Ova oštećenja obilježena su širenjem i/ili atrofijom tubula, smrću tubularnih stanica, upalnim procesom i ...progresivnom intersticijskom fibrozom uz gubitak bubrežnog parenhima. Cilj ovog istraživanja bio je procijeniti povoljne učinke dvaju prirodnih spojeva koji se nalaze u povrću, sulforafana i kvercetina, kod jednostrane opstrukcije uretre (JOU). Tri skupine štakora podvrgnute su operaciji kako bi se izazvala JOU. Potom su primali destiliranu vodu, sulforafan (500 μg/životinja/dan) i kvercetin (50 mg/ kg/dan). Primijenjene su stereološke metode kako bi se dobili točni, kvantitativni i usporedivi podaci. Manje od ~4% bubrežnih struktura ostalo je u prosjeku intaktno kod štakora s JOU. Nakon liječenja JOU štakora kvercetinom intaktno je bilo ~69%, 32%, 65%, 35% i 41% volumena glomerula, proksimalnih i distalnih konvolucijskih tubula (PKT i DKT), Henleovih petlja odnosno zbirnih kanalića (p<0,01). Nakon liječenja JOU štakora kvercetinom intaktno je bilo ~71%, 81%, 51% i 57% duljine PKT, DKT, Henleovih petlja odnosno zbirnih kanalića (p<0,01). Nakon liječenja JOU štakora sulforafanom intaktno je bilo ~42% i 41% duljine PKT odnosno DKT (p<0,01). Promjene u duljini Henleovih petlja i zbirnih kanalića nisu bile značajne. U zaključku, kvercetin i sulforafan učinkovito priječe neka strukturna oštećenja bubrega kod modela izravne opstrukcije. Kvercetin je imao povoljniji učinak na bubrežne strukture.