Ovaj pregledni članak pruža kritički osvrt na standardne i inovativne metode za procjenu kakvoće sjemena kako bi se predvidio oplodni potencijal ejakulata (nativnog ili obrađenog) i mužjaka. ...Funkcionalna testiranja spermija u in vitro uvjetima su nužna, budući da se slični procesi odvijaju tijekom transporta spermija, pohrane i interakcije sa ženskim spolnim sustavom i oocitama, jer pružaju uvid u ulogu pojedinih subpopulacija spermija u ejakulatu i time pomažu kod odabira spermija. Nadalje, ovaj se članak isto tako usredotočuje na istraživanje genoma, transkriptoma i proteoma spermija i sjemene plazme što može pomoći pri otkrivanju kako spermiji i molekule sjemene plazme mogu dati signal ženki i povezati to s plodnošću pa čak i s brojem potomaka. Specifične molekule sjemene plazme koje se razlikuju između jedinki između pojedinih frakcija ejakulata, povezane su s preživljavanjem spermija kao i s majčinom imunosnom tolerancijom prema spermijima što omogućuje plodnosti.
Englobado na temática do desenvolvimento de métodos in vitro para avaliação da biodisponibilidade de fármacos, este trabalho de investigação teve como objectivo a optimização de um método para ...avaliar em simultâneo a dissolução e permeabilidade de fármacos usando uma célula de fluxo bilateral com membranas de Polyvinylidene Fluoride (PVDF). Através de uma avaliação inicial, na qual se testou o efeito de diversas variáveis na permeabilidade da cafeína e do ácido acetilsalicílico, obtiveram-se resultados que permitiram concluir que os ensaios realizados são mais reprodutíveis, quando a célula de fluxo é utilizada em circulação unilateral no lado dador e com agitação do lado aceitador. Observou-se ainda que o método permite detectar a influência do pH (Papp da cafeína a pH 7,4 e 4,5: 4,84±1,57x10-5cm.s-1 e 6,00±0,70x10-5cm.s-1; Papp do ácido acetilsalicílico a pH 7,4 e 4,5: 3,85±0,38x10-5cm.s-1 e 5,11±0,65x10-5cm.s-1) e dos excipientes (Papp da cafeína isoladamente e em presença de excipientes: 6,76±1,22 x 10-5cm.s-1 e 5,84±0,43x10-5cm.s-1; Papp do ácido acetilsalicílico isoladamente e em presença de excipientes: 7,07±1,56x10-5 cm.s-1 e 5,19±0,23x10-5cm.s-1) na permeabilidade dos compostos. Na avaliação da dissolução testou-se um método descrito na United States Pharmacopeia (USP) com meio de dissolução a pH 4,5 e um método com meio de dissolução a pH 7,4 pois na perspectiva de no futuro se realizarem ensaios com membranas celulares Caco-2, foi necessário testar um meio compatível com estas. As percentagens de dissolução dos ensaios a pH 7,4 foram de 96,3% para a cafeína e de 87,1% para o ácido acetilsalicílico, o que permitiu a utilização deste meio, visto ter sido superior ao limite mínimo de 80% estabelecido pela USP. Após estabelecimento das metodologias de dissolução e permeabilidade individuais, passou-se ao acoplamento das duas técnicas, tendo sido realizados ensaios de dissolução/permeabilidade com uma forma farmacêutica contendo os dois compostos em estudo (Melhoral®), nos quais se obtiveram permeabilidades aparentes de 3,97±0,37x10-5cm.s-1 e 3,69±0,29 x10-5cm.s-1 para a cafeína e ácido acetilsalicílico a pH 4,5 e de 3,77±0,40x10-5cm.s-1 e 4,08± 0,04x10-5cm.s-1 para a cafeína e ácido acetilsalicílico a pH 7,4, resultados estes que foram reprodutíveis e descriminativos e que perspectivam a possibilidade da utilização do sistema para futuros trabalhos envolvendo membranas de culturas celulares (Caco-2) ou tecidos (pele ou intestino).
Foram realizados três experimentos procurando avaliar a utilização de dois marcadores internos (FDN e FDA indigestíveis), obtidos por meio da incubação in vitro e in situ, e de um marcador externo ...(óxido crômico) para estimativa da produção fecal e do fluxo da digesta duodenal em bovinos. Para análise dos dados, adotou-se o delineamento em blocos inteiramente ao acaso, sendo os tratamentos distribuídos em esquema fatorial, constituindo cinco marcadores e três volumosos. Os teores de FDN e FDA indigestíveis mostraram-se variáveis para cada volumosos, independentemente da metodologia utilizada (in vitro ou in situ), indicando que possivelmente a incubação por 144 horas não reproduz a fração indigestível total. As estimativas de produção fecal e de fluxo da digesta duodenal, obtidas por intermédio dos marcadores avaliados, apresentaram comportamento bastante diferenciado de acordo com cada volumoso. Os marcadores internos (FDN e FDA indigestíveis) podem ser utilizados como preditores dos parâmetros avaliados, desde que alguns cuidados sejam tomados na sua determinação.
In order to estimate fecal production and digesta flow of cattle, three assays were carried out using indigestible NDF and ADF as internal markers, applying in vitro and in situ incubation procedures, as well as chromium oxide as an external marker. The experiment was a randomized block design in a factorial arrangement. Indigestible NDF and ADF contents exhibited high variation despite the methodology employed (in vitro or in situ). These results indicate that, eventually, 144-h incubation time does not reproduce the indigestible total fraction. The estimates of fecal production and duodenal digesta flow, calculated in function of the marker used, presented a variable behavior according to the roughage, which implies its effect on the marker concentration. Regarding important criteria involved in their determination, these internal markers can be used as predictors of the evaluated parameters.
O objetivo deste trabalho foi comparar os indicadores internos, fibra em detergente neutro e fibra em detergente ácido indigestíveis, obtidos após 144h de incubação in vitro e in situ (FDNiv; FDNis; ...FDAiv; FDAis) com o indicador externo, o óxido crômico (Cr2O3), para estimativas da produção fecal, do fluxo duodenal de matéria seca e matéria orgânica em novilhos mestiços (HxZ) confinados. Foram utilizadas dietas à base de silagens de milho, de raspa e de casca de mandioca, e também de cana-de-açúcar ensilada com polpa cítrica peletizada. Os novilhos foram castrados e canulados no rúmen e no duodeno. O período experimental teve 11 dias de adaptação às dietas e 8 dias de coleta. O delineamento experimental foi o quadrado latino (4x4), com quatro tratamentos, num arranjo em parcela subdividida, sendo as dietas estudadas nas parcelas, e os indicadores nas subparcelas. Os resultados obtidos em percentagem do peso vivo para a estimativa da produção fecal, utilizando-se os diferentes indicadores, mostraram que a FDAiv (0,88 %), a FDAis (0,85 %) e o Cr2O3 (0,99 %), embora com diferenças significativas, podem ser utilizados pelos resultados biologicamente consistentes. Para estimar o fluxo duodenal de matéria seca e matéria orgânica, foram utilizados os valores de produção fecal obtidos com a FDAiv. Os indicadores internos não apresentaram diferenças entre si para o fluxo duodenal de matéria seca, com média de 3,29 kg/dia, porém o óxido crômico superestimou o fluxo (4,95 kg/dia). Para o fluxo duodenal de matéria orgânica não houve diferença entre os indicadores com média de 2,73 kg/dia.
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