Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- U ovom su radu ispitane fitokemijske značajke, antimikrobna svojstva i biološki učinci lista obične planike. Određen je sadržaj ...ukupnih fenola, flavonoida, tanina, fenolnih kiselina, te polifenolni profil lista UHPLC-MS/MS (Orbitrap) metodom, sadržaj arbutina i hidrokinona HPLC-UV/DAD metodom, antioksidacijska svojstva FRAP, TEAC i DPPH metodama. MIK koncentracije su utvrđene dvostrukom mikrodilucijom, a mutagenost komet-testom i CBMN testom. Dokazano je 37 novih fenolnih spojeva. Sadržaj arbutina u listu bio je 0,3 %, dok hidrokinon nije detektiran. Metanol je bolje sredstvo za ekstrakciju polifenola od vode. Metanolni ekstrakt lista pokazao je bolji antioksidacijski, te antimikrobni učinak na ATCC i kliničke sojeve mikroorganizama. Arbutin nije pokazao antimikrobni učinak, dok je njegov metabolit hidrokinon pokazao pozitivan učinak na ispitivane uropatogene. U uvjetima in vitro i in vivo vodeni ekstrakt lista pri koncentraciji arbutina koja odgovara maksimalno dopuštenom dnevnom unosu ima nisku genotoksičnost. Potencijal vodenog ekstrakta lista obične planike kao fitoterpeutika za kliničku primjenu je velik.- This thesis investigated the phytochemical characteristics, antimicrobial properties and biological effects of strawberry tree leaves. Total phenol, tannin, flavonoid and phenolic acid content was determined as well as polyphenolic profile using the UHPLC-MS/MS Orbitrap method. Arbutin and hydroquinone concentrations were measured by HPLC-UV/DAD, antioxidative properties by FRAP, TEAC, DPPH, MIC concentrations by a Twofolded Microdilution method and mutagenicity by Comet-test and CBMN test. Thirty-seven new phenolic compounds were detected. Leaves contained 0.3% of arbutin while hydroquinone was not detected. Methanol was shown to be a more effective solvent for the extraction of polyphenols. Methanolic extract showed better antioxidative properties and better antimicrobial effect on standard ATCC and clinical microorganism strains. Arbutin did not show antimicrobial activity, while its metabolite hydroquinone showed positive antimicrobial activity against the tested uropathogens. Water extract applied at an arbutin concentration corresponding to the maximum allowable daily intake showed low genotoxicity in vitro and in vivo. Strawberry tree water leaf extract has great potential as a phytotherapeutic in clinical application.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Biološka aktivnost roda Centaurea pripisuje se spojevima iz skupine terpena i flavonoida čija su antioksidacijska, antibakterijska, ...citotoksična i slična ljekovita svojstva dokazana. Cilj rada je odrediti sadržaj i sastav fitokemikalija ekstrakata hrvatske endemične biljne vrste Centaurea ragusina L. sakupljene na prirodnom lokalitetu, uzgojene u uvjetima in vitro i aklimatizirane na vanjske uvjete kao i njihovu antioksidacijsku, antibakterijsku i citotoksičnu aktivnost. U svrhu razjašnjenja biološke aktivnosti proučavane su interakcije ekstrakata, frakcija i spojeva s polinukleotidima. U etanolno vodenim ekstraktma izmjeren je najviši sadržaj fenola, flavonoida i hidroksicimetnih kiselina. Etanolno vodeni i etanolno etanolni ekstrakti pokazuju značajnu antioksidacijsku aktivnost neovisno o podrijetlu biljaka. Ekstrakti listova priređeni u etanolu, većina ispitivanih frakcija kao i dva izolirana seskviterpenska laktona pokazali su značajnu antibakterijsku aktivnost na Staphylococcus aureus ATCC 25923. Svi vodeni vodeni ekstrakti pokazuju značajni stabilizacijski učinak na DNA i RNA. Gotovo svi testirani ekstrakti te frakcije CRE01_06-10 pokazuju značajnu citotoksičnu aktivnost na testiranim tumorskim staničnim linijama.- Biological activity of Centaurea genus is mainly attributed to compounds of the terpenoid and flavonoid type which showed antioxidant, antimicrobial, cytotoxic and other therapeutic properties. The goal of this work was to determine polyphenol content and composition of phytochemicals in Croatian endemic plant species Centaurea ragusina L. collected at natural habitats, cultivated in vitro and acclimated plants as well as to estimate their antioxidant, antibacterial and cytotoxic activity. Ethanolic/aqueous extracts showed the highest level of total phenols, flavonoids and hydroxycinnamic acid. Ethanolic/aqueous and ethanolic/ethanolic extracts showed significant antioxidant activity regardless of the plant origin. Crude ethanolic/ethanolic extract of leaves, almost all tested fractions and two isolated sesquiterpene lactones showed significant antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923. All aqueous/aqueous extracts showed significant stabilisation effects of DNA and RNA. Almost all tested extracts and fractions CRE01_06-10 exhibited significant inhibitory activities against all tested cancer cell lines.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Većina psihoaktivnih vrsta gljiva sadrži psilocibin, psilocin, beocistin ili nor-beocistin, a zbog djelovanja psilocina sličnog ...LSD-u koriste se kao rekreacijska droga i zabranjene su. Dokazivanje aktivnih tvari iz forenzičkih uzoraka toksikološkim metodama GC-MS i LC-MS nije moguće iz otrusine spora ili micelija prije procesa fruktificiranja. Glavni cilj ovog rada bio je ukazati na potencijal primjene molekularnih i morfoloških metoda u forenzičkoj analizi psihoaktivnih gljiva. Morfološkom analizom 63 forenzička uzorka uspješno je identificirano 5 vrsta, a najzastupljenija je vrsta Psilocybe cubensis. Sekvenciranjem cijele regije ITS i dijela gena LSU forenzičkih uzoraka potvrđeni su rezultati morfološke analize i uspješno je identificirana šesta vrsta iz otrusine spora. Obje metode mogu se implementirati u rutinsku forenzičku analizu uzoraka gljiva. Potencijal istraživanog modela preliminarne identifikacije psihoaktivnih gljiva korištenjem specifičnih sondi TaqMan®MGB u reakciji Real Time PCR nije potvrđen. Analizom LC-MS otkriven je psihoaktivni status vrsta Stropharia semiglobata i Galerina badipes.- Most of psychoactive fungi contain psilocybin, psilocin, baeocystin or nor- baeocystin, and due to effects of psilocin, which are similar to LSD, they are illegal. Proving active substances from forensic samples through toxicological methods is not possible from spore print or from mycelia. Main goal of this thesis was to emphasize the potential of using molecular and morphological methods in forensic analysis of psychoactive fungi. Morphological analysis of 63 forensic samples resulted with 5 successfully identified species with Psilocybe cubensis as the most common. Through sequencing the ITS region and the part of LSU gene of forensic samples, morphological analysis results were confirmed and sixth species was successfully identified from spore print. Both methods can be implemented in the routine forensic workflow for fungi. Potential of the researched model for preliminary identification of psychoactive fungi by using specific TaqMan®MGB probes in RT-PCR reaction, was not confirmed. LC-MS analysis established the psychoactive status of species Stropharia semiglobata and Galerina badipes.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: University of Rijeka. Department of Biotechnology. - Data provided by Europeana Collections- Uvod i cilj
Nedostatak S-adenozilhomocistein hidrolaze (AHCY) je poremećaj ...uzrokovan mutacijama u genu ahcy čime je smanjena aktivnost proteina AHCY. AHCY ima ključnu ulogu u pravilnom odvijanju ciklusa aminokiseline metionina u stanici, stoga nedostatak njegove funkcije uzrokuje težak metabolički poremećaj. Kao jedini enzim koji hidrolizira SAH, snažni inhibitor staničnih metiltrasferaza, AHCY ima i indirektnu ulogu u održavanju metilacijskog statusa stanice. Klinička slika ovog potencijalno letalnog oboljenja je karakterizirana kombinacijom mišićnih, neuroloških i jetrenih poremećaja. Unatoč dokazanoj esencijalnosti AHCY, promjene u molekularnim mehanizmima stanice u stanju nedostatka AHCY su dosada nedovoljno istražene. Cilj ove doktorske disertacije je analiza i razumijevanje molekularnih i staničnih uloga AHCY s krajnjom svrhom probira potecijalnih biomarkera oboljenja.
Materijali i metode
U sklopu ove disertacije su rađene studije novootkrivene Y328D mutante potvrđene u pacijentici oboljeloj od nedostaka funkcije AHCY, a za dodatna istraživanja na raspolaganju su bili i primarni fibroblasti pacijentice. Zbog ograničenja u radu s primarnim fibroblastima, tijekom izrade doktorske disertacije su se pripremili, validirali i istraživali modelni stanični sustavi za što se koristila kombinacija metoda klasične biologije i različitih omiks i visokoprotočnih tehnika.
Rezultati
Po prvi puta je tijekom istraživanja AHCY korištena metoda kojom se na temelju fluorescencije dviju komplementiranih podjedinica proteina Venus s kojima su označeni proteini od interesa može pratiti njihova interakcija u ljudskim stanicama. Dokazano je da Y328D mutanta gubi sposobnost homodimerizacije, a metoda je također uspješno prilagođena na visokoprotočno skeniranje interaktora proteina AHCY. Nadalje, uočena je smanjena razina mutiranih AHCY mRNA i proteina u fibroblastima pacijenta i u stanicama sa stabilno eksprimiranim mutiranim AHCY. U istim stanicama je također mikroskopijom pokazano da mutacije uzrokuju povećanu ili smanjenu količinu proteina u jezgri stanica u odnosu na divlji tip. U stanicama hepatocelularnog karcinoma s utišanim AHCY smanjena je proliferacija i migracija te su aktivirani stanični putevi koji signaliziraju oštećenje DNA. Tijekom analize transkriptoma i proteoma fibroblasta pacijenta i stanica hepatocelularnog karcinoma s utišanim AHCY, uočena je moguća veza proteina AHCY s patologijom različitih neuroloških, jetrenih i mišićnih oboljenja, a predložena su i dva potencijalna biomarkera oboljenja.
Zaključci
Promjene razine AHCY mRNA i proteina, kao i lokalizacije AHCY u stanici koje su uočene u svih istraživanih mutanti proteina AHCY mogu biti odgovorne ili pridonositi patologiji kod oboljenja nedostatka AHCY. Prema predloženom mehanizmu AHCY ima utjecaj na oštećenje DNA i stanični ciklus. Dva potencijalna biomarkera su predložena s ciljem nastavka njihovog budućeg istraživanja u svrhu prognostike i dijagnostike oboljenja nedostatka AHCY.- Introduction and aims
S-adenosylhomocysteine hydrolase (AHCY) deficiency is a disorder caused by lowered enzymatic activity of AHCY protein due to the mutations in ahcy gene. AHCY has a key role in proper functioning of the methionine cycle in cell, therefore the lack of AHCY function causes severe metabolic disorder. Since AHCY is a single enzyme that hydrolyses SAH, a strong inhibitor of cellular metiltransferazes, it has a central role in maintaining the methylation status of the cell. Clinical presentation of this potentially lethal disorder includes a combination of muscular, neurological and hepatic disorders. Despite the essential activity of AHCY, changes in molecular and cellular mechanisms in the state of AHCY deficiency have so far been poorly investigated. The aim of this doctoral thesis is the analysis and understanding of molecular and cellular roles of AHCY and prediction of potential disease biomarkers.
Materials and methods/methodological approach
In this thesis, we performed studies of newly discovered Y328D mutant confirmed in the recent case of AHCY deficiency. Patient fibroblasts were obtained from the mentioned case, however, due to the limitations in experimental work with primary fibroblasts, we prepared, validated and investigated model cellular systems by combining methods ranging from classical biology approach to different omics and high throughput techniques.
Results
A method that enables visualization of protein interactions in human cells based on fluorescence of two complemented parts of Venus protein fused to proteins of interest was used for the first time to research AHCY protein. It is proven that Y328D mutant lacks the ability to form homodimes in human cells, and the method has been also successfully adapted to high throughput screening of AHCY protein interactors. Further, we report lower levels of mutant AHCY mRNA and protein in patient fibroblasts as well as cells that stably express AHCY mutant proteins. Microscopy revealed higher or lower amounts of mutant AHCY protein in cell nuclei in mentioned cells when compared to wild type. In hepatocellular carcinoma cells with a silenced AHCY expression we report lowered proliferation and migration as well as activation of DNA damage induced cellular pathways. While analyzing the transcriptome and proteome of patient fibroblasts and hepatocellular carcinoma cells with silenced AHCY expression, potential implications of AHCY protein in the pathology of various neurological, hepatic and muscular diseases are recognized, and two potential disease biomarkers are suggested.
Conclusions
Changes in levels of mutant AHCY mRNA and protein, as well as changed cellular localization of mutant AHCY could be responsible for or contribute to the pathology of the AHCY deficiency. As proposed by our mechanism, AHCY can imapact cellular DNA damage and cell cycle. Two biomarkers are suggested for further research and usage in prognostics and diagnostics of AHCY deficiency.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain ...Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Ciklooksigenaze su ključni enzimi u biosintezi prostanoida. Postoje dvije izoforme: COX-1 koja je povezana s održavanjem fizioloških ...uvjeta u sluznici debelog crijeva; te inducibilna izoforma COX-2 koja je uglavnom povezana s patološkim procesima uključujući karcinom debelog crijeva. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati ulogu COX izoformi u razvoju i napredovanju sporadičnoga karcinoma debeloga crijeva, mehanizme njihove regulacije te povezanost regulatornih polimorfizama gena COX-1 i COX-2 sa sklonošću obolijevanju i ekspresijom mRNA i proteina. Naši rezultati su pokazali da COX-1 ima zaštitnu, a COX-2 tumorigenu ulogu u sluznici debelog crijeva. Gubitak COX-1 učestali je događaj u karcinogenezi, dok COX-2 pokazuje veću varijaciju između uzoraka. Porast COX-2 ekspresije povezan je s lošijim preživljenjem oboljelih. Dokazali smo povezanost regulatornih polimorfizama sa sklonošću obolijevanju i ekspresijom gena COX-2. Ekspresija proteina odgovara mRNA ekspresiji te nema povezanosti s ekspresijom miR-200 što pokazuje da je ekspresija gena COX-1 i COX-2 primarno regulirana na razini transkripcije.- Cyclooxygenases are the key enzymes in prostanoid biosynthesis. Two isoforms exist: COX-1, associated with maintainance of physiological conditions in colon; and inducible COX-2 that is mainly related to various pathologies including colorectal cancer. The aim of our study was to examine the role of COX isoforms in development and progression of sporadic colorectal cancer, mechanisms of their regulation and whether regulatory polymorphisms in COX genes are related to cancer susceptibility, mRNA and protein expression. Our results show that COX-1 has protective, and COX-2 tumorigenic role in colorectal mucosa. Loss of COX-1 is very frequent in carcinogenesis, while COX-2 shows greater variation between samples. Higher COX-2 expression correlates to worse patient survival. We proved the role of regulatory polymorphisms in cancer susceptibility, and COX-2 expression. Protein expression correlates with mRNA expression, and there is no associtation with miR-200, which indicates transcriptional regulation as the key regulatory mechanism of COX expression.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Tekućinska kromatografija visokog učinka (high performance liquid chromatography, HPLC) je jedna od najznačajnijih i najuspješnijih ...metoda koje se primjenjuju za razdvajanje i pročišćavanje raznih molekula. Većina kromatografskih nosača je dizajnirana za razdvajanje proteina te je primjena ove metode u istraživanju makromolekula i makromolekularnih kompleksa otežana. Građa klasičnih nosača se temelji na poroznim kuglicama, a razdvajanje na difuziji. Zbog neadekvatne veličine pora i sporog razdvajanja, primjena ove metode u istraživanju biomolekula nije osobito uspješna. Monolitni su kromatografski nosači napravljeni iz jednog dijela te imaju visoki stupanj poroznosti i veličinu kanala koja je adekvatna za većinu makromolekularnih kompleksa (prosječni promjer je 1,5 μm). Karakterizira ih laminaran protok tekuće faze i interakcije s ligandima koje se temelje na konvekciji, a ne na difuziji što ujedno omogućava brzi prijenos mase i znatno skraćuje vrijeme potrebo za odvijanje eksperimenta (Barut et al., 2008). Viroidi su male jednolančane kružne, i u većini istraživanih slučajeva, fitopatogene RNA-molekule koje ne posjeduju gene za proteine već sve svoje funkcije provode formiranjem raznih sekundarnih/tercijarnih struktura. Te iste strukture omogućuju visoku stabilnost viroida u biljci i izvan nje te su temelj njihove visoke infektivnosti. Rasprostranjivanje virusa vodenim putovima je dobro dokumentirano (Mehle i Ravnikar, 2012) dok prijenos viroida vodom do nedavno nije razmatran. Viroid vretenaste ušiljenosti gomolja krumpira (Potato spindle tuber viroid, PSTVd) može preživjeti i do pet tjedana u vodenom okruženju te zadržati svoju infektivnost (Mehle et al., 2011). Najpreciznija metoda njegove detekcije je kvantitativna lančana reakcija polimerazom uz prethodnu reverznu transkripciju (reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR). Zbog tipičnih stohastičkih efekata koji utječu na qPCR, ova metoda ne može sa sigurnošću detektirati patogen koji je prisutan u izrazito niskim koncentracijama (Morrison et al., 1998). Takva situacija je vrlo vjerojatna u vodenim uzorcima zbog učinka razrjeđenja te je prethodni korak koncentriranja uzorka nužan. Jedan od ciljeva ove doktorske disertacije je optimizacija postupka koncentriranja viroida iz vodenih uzoraka. Analizirano je kromatografsko ponašanje PSTVd-a i biljnih mRNA dvjema adsorbcijskim metodama: ionskom izmjenom i kromatografijom hidroforbnih interakcija. Najbolji prinos ostvaren je pomoću kromatografije hidrofobnih interakcija te je ta metoda korištena za koncentriranje viroida iz vodenih uzoraka. Prinos je analiziran kvantitativnom PCR-metodom. Virus mozaika postrne repe (Turnip yellow mosaic virus, TYMV) i virus grmolike kržljavosti rajčice (Tomato bushy stunt virus, TBSV) pripadaju malim biljnim sferičnim virusima (promjer ~30 nm). Oni su modeli koji su poslužili za razumijevanje ikozaedarske strukture te niza procesa koji se odvijaju tijekom virusne replikacije i tijekom raznih staničnih procesa (Dreher, 2004; Morgan, 2003; Yamamura i Scholthof, 2005). Iako navedeni virusi nemaju jak ekonomski značaj (nisu izrazito patogeni), i danas su atraktivni zbog potencijalne primjene u biomedicini i nanotehnologiji (virus based vectors i virus-like particles). U ovoj doktorskoj disertaciji TYMV i TBSV su prvi put kromatografski izdvojeni iz biljnog homogenata. Korištena je ionsko-izmjenjivača kromatografija jer navedeni virusi posjeduju različiti ukupni naboj pri određenom pH. Sadržaj frakcija je analiziran pomoću kvantitativne PCR-metode, SDS-poliakrilamidne gel-elektroforeze proteina i elektronske mikroskopije. Infektivnost virusnih čestica nakon kromatografije je provjerena inokulacijom zdravih biljaka sadržajem virusnih frakcija te detekcijom virus (RT-qPCR) u tim istim biljkama. Metoda optimizirana za TYMV je primijenjena u analizi izolata koji pripadaju dvjema skupinama sojeva: TYMV-1 i TYMV-2 (Symons et al., 1963). Pripadnici skupine TYMV-2 (TYMV-N i TYMV-D) imaju kraće retencijsko vrijeme nego pripadnici skupine TYMV-1 (TYMV-E i TYMV-Y). Istodobno je uočena mogućnost da se u slučaju izolata TYMV-D radi o miješanoj infekciji dvama sojevima gdje, ovisno o vremenskom periodu, do izražaja dolazi jedan od njih. Nadalje, u ovoj disertaciji je istražena mogućnost primjene monolitne kromatografije u razdvajanju individualnih virusa iz smjesnog uzorka. Pomoću CIM DEAE kolone i radnih pufera sa pH 6, uspješno su razdvojena četiri biljna virusa: tri ikozaedarska (TBSV, TYMV-N i TYMV-E) i jedan štapićasti (TMV). Virus mozaika duhana (Tobacco mosaic virus, TMV) pripada štapićastim virusima (helikalna simetrija) i on je kamen temeljac virologije (Harrison i Wilson, 1999). Primjenom uvjeta optimiziranih za tobamoviruse (CIM QA i pH 5,5) razdvajanje četiriju virusa je bilo manje uspješno te se može zaključiti da svaki virus zahtjeva posebnu optimizaciju što je prethodno dokumentirano u literaturi (Adriaenssens et al., 2012). Adenovirusi serotipa 5 (Ad5) su jedni od najraširenijih vektora u genskoj terapiji (Wiley Database, 2013). Analizirano je kromatografsko ponašanje više genetički modificiranih Ad5- vektora. Frakcije su analizirane SDS-poliakrilamidnom elektroforezom proteina i testom blue forming units. Promjene u heksonskom proteinu koje su dovele do gubitka naboja su rezultirale skraćenim retencijskim vremenom, dok promjene u dužini vlakna nisu imale utjecaj na retencijsko vrijeme. Zamjena vlakna jednog serotipa drugim (Ad5-vlakno je zamijenjeno Ad3-vlaknom) je dovelo do povećanja ukupnog naboja viriona te do produženja retencijskog vremena. Rezultati dobiveni u sklopu ove disertacije pridonose proširenju primjene monolitne kromatografije i metodološki unaprjeđuju istraživanje virusa i viroida. Monolitna kromatografija je brza, praktična i učinkovita metoda za razdvajanje različitih virusnih čestica i te koncentriranje viroidne RNA.- By using monolithic supports it is possible to apply chromatography in purification, separation, and concentration of various large molecules and macromolecular complexes. In this thesis, chromatographic behaviour of RNA molecules was analysed using ion-exchange and hydrophobic interaction modes. A concentrating protocol for Potato spindle tuber viroid, which improved the sensitivity of its reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) detection, was developed. Turnip yellow mosaic virus (TYMV) and Tomato bushy stunt virus were separated from plant homogenate with monolithic supports for the first time. Furthermore, several plant viruses were separated from an artificially mixed sample using ion-exchange chromatography. High recoveries were obtained and virus infectivity was maintained. Electron microscopy confirmed the integrity of the plant virus particles after chromatography. The method was also used to differentiate members of two groups of TYMV isolates representing different virus strains. Chromatographic behaviour of several structurally modified Adenovirus 5-based vectors was considered. The influence of changes in the hexon protein and in the fibre on retention time was observed. Results obtained within this thesis represent methodological advancement in the research of viroids and viruses, proving that monolith chromatography is a fast, practical and efficient method for separation of different virus particles and concentrating viroid RNA.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Koštani morfogenetski protein 6 (BMP6) je ključni regulator hepcidina, proteina koji sudjeluje u održavanju homeostaze željeza. ...Istražili smo utjecaj željeza na BMP6 u tkivima i plazmi, te zašto ostale BMP molekule nisu u mogućnosti spriječiti hematokromatozu u Bmp6 -/- miševa. Kod miševa divljeg tipa, 4 sata nakon tretmana željezom dolazi do povećanja izražaja gena za BMP6 i hepcidin u jetri, dok je izražaj ostalih BMP molekula nepromijenjen. BMP6 je detektiran u cirkulaciji miševa i štakora, te je pružen prvi dokaz utjecaja željeza na povećanje razine BMP6 u plazmi. Naprotiv, u Bmp6 -/- miševa, tretman željezom dovodi do zakašnjele i slabije aktivacije Smad signalnog puta i sinteze hepcidina u jetri nakon 24 sata, zajedno s povećanim izražajem gena za BMP2, 4, 5 i 9 u duodenumu i BMP5 i BMP7 u jetri. Povećana sinteza BMP7 u jetri potencijalno doprinosi indukciji izražaja gena za hepcidin, što je dodatno podržano BMP7 terapijom koja dovodi do djelotvorne sinteze hepcidina i normalizacije serumskog željeza. No, sinteza BMP7 nije povezana s metabolizmom željeza, već s uzročnim oštećenjima jetre gdje BMP7 predstavlja mogući oblik obrambenog mehanizma od viška nakupljenog željeza. Rezultati pokazuju da akutna doza željeza aktivira kompenzacijske mehanizme s različitim BMP molekulama, ali nedovoljnog intenziteta da bi se spriječila hematokromatoza u Bmp6 -/- miševa. Učinkovita terapija s BMP7 sugerira da je BMP6 bitan, ali ne isključiv regulator homeostaze željeza in vivo.- Bone morphogenetic protein 6 (BMP6) is a key regulator of hepcidin expression, a key iron regulatory hormone. We investigated the effect of iron on Bmp6 expression in tissues and plasma, and why other BMPs could not prevent hemochromatosis in Bmp6 -/- mice. In WT mice, 4 hours following iron challenge liver Bmp6 and Hamp expression were increased, while expression of other Bmps was not affected. In parallel, we provided the first evidence that iron increased the circulating BMP6 level. On the contrary, in Bmp6 -/- mice, iron challenge lead to a 24 hours delayed and blunted activation of liver Smad signaling and hepcidin expression, that was accompanied by an increased expression of Bmp2, 4, 5 and 9 in the duodenum and Bmp5 and Bmp7 in the liver. High liver Bmp7 expression potentially contributed to the late hepcidin response, which was further supported by BMP7 therapy resulting in an effective hepcidin expression and normalization of serum iron. However, BMP7 synthesis was not associated with iron metabolism, but the causal hepatic injuries where BMP7 represented a form of defense mechanism to the excessive iron accumulation. Our data indicate that iron activated BMP compensatory mechanisms that were not sufficient for preventing hemochromatosis in Bmp6 -/- mice. However, the effective BMP7 therapy suggested that BMP6 is an essential but not exclusive in vivo regulator of iron homeostasis.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Sve je više dokaza da kronični stres ubrzava skraćivanje telomera u leukocitima i mononuklearnim stanicama iz periferne krvi. ...Funkcionalne posljedice skraćivanja telomera nisu razjašnjene. U ovom istraživanju mjerena je duljina telomera i aktivnost telomeraze u mononuklearnim stanicama iz periferne krvi 62 osobe: (pacijenti oboljeli od posttraumatskog stresnog poremećaja (PTSP) (N = 30); zdrave kontrole (N = 17), starije osobe (N = 15)). Paralelno, izmjerena je proliferacija aktiviranih T-limfocita i njihova proizvodnja citokina interferona (IFN)-γ, interleukina (IL)-2, IL-4; proizvodnja faktora nekroze tumora (TNF)-α i IL-6 od strane monocita te izraženost receptora programmed death 1 (PD-1) i njegovog liganda PD-L1 na aktiviranim T-limfocitima. Ovo istraživanje pridonosi rastućem broju dokaza da psihološka trauma i kronični stres doprinose skraćivanju telomera. Iako manje izraženi kod pacijenata oboljelih od PTSP-a nego kod starijih osoba, smanjeni proliferativni odgovori T-limfocita i kraća duljina telomera mogli bi biti znakovi rane imunosenescencije. Zajedno sa smanjenom proizvodnjom Th1-citokina, ove promjene imunološkog sustava mogle bi doprinijeti zdravstvenim rizicima povezanim s PTSP-om.- There is increasing evidence that chronic stress accelerates telomere erosion in leukocytes/ peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). However, functional changes associated with telomere shortening are poorly understood. We measured relative telomere length and basal telomerase activity in PBMCs of 62 individuals (patients with posttraumatic stress disorder (PTSD) (N=30); age-matched healthy controls (N=17), elderly volunteers (N=15)). In parallel, we have assessed proliferation of activated T cells, interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-2, IL-4, tumor necrosis factor (TNF)-α and IL-6 cytokine production and expression of programmed death 1 (PD-1) receptor and its ligand PD-L1 on activated T cells. This study adds to the accumulating evidence that psychological trauma and chronic stress are associated with accelerated telomere attrition. Although much less pronounced in PTSD patients than in elderly persons, reduced proliferative responses of T cells accompanied by shorter telomeres might be a sign of early immunosenescence. Together with reduced production of Th1 cytokines, observed immune changes may contribute to health risks associated with PTSD.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
Provider: - Institution: - Data provided by Europeana Collections- Cilj rada bio je usporediti utjecaj anestezije izofluranom ili propofolom uz dodatak N-acetilcistena kod laparotomijske i ...laparoskopske ovarijektomije kuja na koncentracije malondialdehida, endogenih peroksida i ukupnih antioksidansa. Ispitivano je i postoji li sinergističko djelovanje propofola i N-acetilcisteina. Provedeno je prospektivno, randomizirano, kontrolirano istraživanje koje je uključilo 61 kuju dobrog općeg stanja. Ispitivane životinje podijeljene su u 6 skupina prema kirurškoj tehnici i vrsti anestezije. Uzorci krvi za analizu uzeti su nakon uvoda u anesteziju, na kraju operacijskog zahvata i 24 sata nakon zahvata. Analizirani su metodama tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti i kolorimetrijskim, enzimatskim testovima. Višestrukim usporedbama skupina uglavnom nisu nađene statistički značajne razlike u pokazateljima oksidacijskog stresa. Iako dobiveni rezultati nisu potvrdili prvobitnu hipotezu, analizom statističkih razlika koje su pronađene kao i vizualnom inspekcijom grafičkih prikaza zapažen je trend koji ukazuje da bi laparoskopski učinjena ovarijektomija i anestezija propofolom uz dodatak N-acetilcisteina mogle imati povoljne učinke na smanjenje oksidacijskog stresa.- The objectives of this study were to investigate the effects of anesthesia with isoflurane or propofol with addition of N-acetylcysteine during open and laparoscopic ovariectomy in bitches on malondialdehyde concentration, total oxidative status and antioxidant capacity. Also, the aim was to investigate possible synergistic effects of propofol and N-acetylcysteine. The study was prospective, randomised and controlled. 61 female dogs were allocated in 6 groups according to surgical technic and type of anesthesia. Blood samples for the analysis were taken after the induction of anesthesia, at the end of the procedure and 24 hours after. High performance liquid chromatography and colorimetric, enzymatic tests were used for the analysis. In most of the groups statistically significant differences in parameters of oxidative stress were not found. However, analysis of statistical differences which were found and observation of positive trends during perioperative period, discerned trend that laparoscopic surgery and anestehsia with propofol could have beneficial effects.- All metadata published by Europeana are available free of restriction under the Creative Commons CC0 1.0 Universal Public Domain Dedication. However, Europeana requests that you actively acknowledge and give attribution to all metadata sources including Europeana
