Propilen je jedan od najvažnijih kemijskih spojeva što se koriste za sintezu nekih komercijalnih proizvoda, poput kozmetičkih i prehrambenih proizvoda, maziva i lijekova. Iako se može proizvesti ...kemijskim procesom i biosintezom, biosinteza propilena je ekonomičnija, ekološki prihvatljivija i jednostavnija. Propilen se može sintetizirati transformacijom glicerola ili sličnog supstrata s pomoću bakterija kao što su Clostridium butyricum i Klebsiella pneumoniae. Međutim, moguće zapreke primjeni mikroorganizama su loša produktivnost i usporavanje procesa zbog nastanka međuprodukata. Da bi se ti problemi izbjegli, posljednja istraživanja fokusiraju se na razvoj novih sojeva modifikacijom genoma različitim metodama, poput mutageneze i genetičkog inženjerstva. Primjenom genetički modificiranih sojeva dobivenih različitim postupcima postignut je bolji prinos, te su izbjegnuti neki problemi prisutni u proizvodnji propilena s pomoću divljih tipova bakterija. U ovom su radu prikazana nova postignuća u razvoju tehnologija proizvodnje genetički modificiranih mikroorganizama za primjenu u biosintezi propilena.
Proizveden je mutant AmySΔR179-G180 delecijom arginina (Arg179) i glicina (Gly180) u α-amilazi iz bakterije Bacillus stearothermophilus (AmyS) pomoću ciljane mutageneze, a radi poboljšanja njezinih ...svojstava. Amilaze AmyS i AmySΔR179-G180 eksprimirane su u bakteriji Bacillus subtilis i pročišćene taloženjem pomoću amonijeva sulfata, te su im opisana i uspoređena svojstva. Delecijom aminokiselina Arg179 i Gly180 poboljšala se termostabilnost α-amilaze AmySΔR179-G180, a vrijeme poluraspada pri 100 °C bitno se produljilo s 24 na 33 min. Osim toga, ova je amilaza otpornija na djelovanje kiselina i treba manje kalcija za održavanje aktivnosti. Sekrecijska svojstva rekombinantnog soja ispitana su šaržnom fermentacijom u fermentoru od 7,5 L, te je dobivena velika aktivnost α-amilaze. Postignuta je najveća aktivnost od 3300 U/mL i produktivnost od 45,8 U/(mL•h).
Ideja koja stoji iza selekcije potpomognute genetskim markerima je da postoje geni sa signifikantnim učinkom koji se mogu upotrijebiti u ciljanom izboru svojstava. Neke osobine su kontrolirane jednim ...genom, koji su odgovorni za sintezu specifičnog proteina. Ciljana mutageneza (SDM) se upotrebljava da bi se proizvele mutacije koje daju racionalno dizajniran protein. SDM se kombinira sa transferom jezgre somatskih stanice kao i transplantacijom germ stanica pri dobivanju životinjskog modela u kojima su promijenjeni odgovarajući geni. Ova mutageneza se koristi za ubacivanje točkastih mutacija, insercija ili delecija u funkcionalnom dijelu, epitopu, datog gena. Također, aktivnost promotora može se regulirati putem SDM i tako utjecati na razinu ekspresije gena od interesa. Kombinacija SDM sa homolognom rekombinacijom gena od interesa je kao oplemenjivačka tehnologija budući da omogućuje uporabu korisnih informacija zasnovanih na proteinima koji se direktno koriste u molekulskom oplemenjivanju svinja.
U ovom je radu iznesen pregled najnovijih ihtioloških istraživanja u kojima se autori služe tzv. mikronukleusnim testom. Test se u znanstvenoj literaturi spominje već čitav niz godina kao jedno od ...osnovnih sredstava za utvrđivanje oštećenja na DNK organizma–modela. Znanstvenici se njime koriste radi dokazivanja genotoksičnih utjecaja različitih tvari na organizme, u ovom slučaju hidrobionte.
PDF
