Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
(UL)
  • Načrtovanje, izdelava in vrednotenje nanodelcev iz hitosana in vgrajevanje proteinske učinkovine = Design, formulation and characterisation of protein-loaded chitosan nanoparticles : diplomska naloga
    Pavšek, Marko
    Problem pri dostavi proteinskih uèinkovin na mesto njihovega delovanja je kratka razpolovna doba zaradi uèinka proteolitiènih encimov. Veliko raziskovalcev meni, da je ustrezna resitev vgradnja ... proteinskih uèinkovin v nanodelce, ki omogoèajo ne samo zasèito le-teh pred encimi, ampak tudi njihovonadzorovano oz. podaljsano sprosèanje. Nanodelci so trdni koloidni delci, sestavljeni iz polimerov in uèinkovine. Peroralno se absorbirajo skozi skupine limfnih vozlov imenovanih Peyerjeve plosèice, iz krvi jih odstrani retikuloendotelni sistem. Akumulirajo se v jetrih, kostnem mozgu in vranici. Hitosan (CS) se zdi idealen polimer za izdelavo nanodelcev, saj je biokompatibilen, biorazgradljiv, mukoadheziven in netoksièen, zveèa transmukozno absorpcijo ter odpira tesne stike epitelnih celic.Namen diplomskenaloge je bil izdelati nanodelce iz hitosana z razliènimi metodami obarjanja tega aminopolisaharida, uporabiti razliène metode priprave nanodelcev, doloèiti lastnosti izdelanih nanodelcev, jih liofilizirati in kot modelno proteinsko uèinkovino vgraditi albumin (BSA).Iz nizkoviskozne vrste hitosana smo z metodo obarjanja (izsoljevanja) z natrijevim sulfatom (Na2SO4),ionotropnim geliranjem z natrijevim tripolifosfatom (TPP) in acetiliranjem z acetanhidridom (Ac2O) izdelali nanodelce. Najboljse rezultate (najmanjse delce) sta dali metodi ionotropnega geliranja in obarjanja, metoda acetiliranja je dala prevelike delce. Opazili smo, da so najmanjsi delci z najnizjim polidisperznim indeksom (PI) nastali v razmerju mas CSČTPP = 4Č1. Obdelava z UZ-sondo moèno zmanjsa velikost delcev, v manjsi meri tudi UZ-kadièka. Homogeniziranje z Ultra-Turrax-om je pregrobo, saj so delci preveliki in s previsokim PI. Èas mesanja s propelerskim mesalom nima vpliva na velikost nanodelcev. Liofiliziranih nanodelcev pripravljenih s TPP ni bilo mogoèe redispergirati, niti èe smo za izdelavo uporabili tudi acetanhidrid. Izsoljevanje z Na2SO4 in s hkratno uporabo homogenizatorja Omni Labtek in UZ-kadièke da majhne in enakomerno velike delce. Dodatek acetanhidrida te lastnosti poslabsa. Acetanhidrid ni primeren za izdelavo nanodelcev iz hitosana, saj so delci ne glede na naèin izdelave in obdelave preveliki in z visokim PI.Ko smo v nanodelce, narejene z Na2SO4, poskusali vgraditi albumin, smo ugotovili, da Na2SO4 obarja tudi albumin, in to pred vgradnjo v nanodelce.Zato smo albumin vgradili se v nanodelce, izdelane z TPP (150 mg CS,37,5 mg TPP, 200 mg BSA). Tam smo dobili majhne delce (260 nm), delez vgrajenega BSA pa 60%. Kolièino vgrajenega BSA smo doloèili z merjenjem kolièine nevgrajenega BSA v supernatantu po centrifugiranju z metodo po Lowry-ju.Dokazali smo, da zaèetna kolièina BSA, ki ga vgrajujemo v nanodelce, vpliva na uèinkovitost vgrajevanja (visja koncentracija BSA da nizjo relativnouèinkovitost vgrajevanja). Pri koncentraciji dodanega BSA 1,875 mgžmLse je vgradilo 78% dodanega BSA (oz. 8,6% glede na maso nanodelcev), pri koncentraciji dodanega BSA 30 mgžmL pa samo 59% (oz. 39% masnega deleza).Pri prouèevanju sprosèanja BSA iz nanodelcev smo ob mesanju medija z magnetnim mesalom pri sobni temperaturi jemali enake alikvote vzorcev v doloèenih èasovnih intervalih, jih centrifugirali pri visokih obratih in v supernatantu doloèili vsebnost BSA (Lowry). Ze po sedmih urah se sprosti skoraj 44% vsega na koncu sprosèenega albumina, po 96 urah pa je sprosèenega 71,4% vsega vgrajenega albumina, sprosèanje pa v tem èasu doseze plato.Proteine vgrajujemov nanodelce zato, da jih zasèitimo pred razgradnjo. Velik pomen pri izdelavi nanodelcev ima reagent, uporabljen za obarjanje tripolifosfata, saj lahko sam reagent povzroèi tudi obarjanje albumina, ki tako spremeni svojo tridimenzionalno strukturo in se ne vgradi v nanodelce.V diplomski nalogi so predstavljen rezultati, ki kazejo morebiten nadaljni razvoj farmacevtskih oblik s proteini.
    Vrsta gradiva - diplomsko delo
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Pavšek, M.], 2004
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1591409

Knjižnica Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Knjižnica
dp 615 Pavšek Marko Načrtovanje
IN: 0007806 		prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico