(UL)
-
Vpliv glikozilacije in fosforilacije na celično lokalizacijo aktivne oblike cistatina F = The impact of glycosylation and phosphorylation on cellular localization of cystatin F active form : Uniform Master's Study Programme PharmacyLačen, MojcaCistatin F je inhibitor cisteinskih peptidaz in spada v družino cistatinov tipa II. Od drugih cistatinov tega tipa se razlikuje po tem, da ima tri glikozilacijska mesta (na asparaginih na mestih 61, ... 62 in 115) in da se precejšen delež cistatina F nahaja v endosomih/lizosomih celic. Sintetizira se kot neaktiven dimer, povezan z dvema disulfidnima vezema. Cepitev 15 aminokislin na N-koncu olajša njegovo monomerizacijo in pretvorbo v aktivno obliko, ki inhibira cisteinske katepsine C, H in L, ki se nahajajo v endosomih/lizosomih. Pokazano je bilo, da stopnja glikozilacije vpliva na izločanje in privzem neaktivne oblike cistatina F in da je prehod cistatina F v celico in v endosome/lizosome omogočen z vezavo fosforiliranih glikanov na M6P-receptor. Namen magistrske naloge je bil ugotoviti ali stopnja glikozilacije vpliva na privzem, izločanje iz celice ter lokalizacijo tudi aktivne oblike cistatina F. Za ta namen smo naredili enojno, dvojno in trojno neglikozilirane mutante aktivne oblike cistatina F in preverili njihovo izražanje, izločanje in prevzem v celice HeLa, ki normalno ne izražajo cistatina F. S prenosom western smo določali ali se neglikozilirane aktivne oblike proteina izločajo iz transfeciranih celic, in obratno, ali se iz gojišča lahko privzemajo v celice. Lokalizacijo v celičnih organelih smo ugotavljali s pomočjo fluorescenčne konfokalne mikroskopije. Kot kontrolo smo uporabili polno glikoziliran aktivni cistatin F, ki po izražanju prehaja v endosome/lizosome ter se po transfekciji izloča v gojišče in tudi privzema nazaj v celico. Z uporabo neglikoziliranih mutant smo ugotovili, da se v celice privzema le skrajšan, na mestu 115 neglikoziliran cistatin F. To potrjujejo rezultati konfokalne mikroskopije, ki kažejo, da ta mutanta enako kot polno glikozilirana oblika, po transfekciji prehaja v endosome/lizosome. Druge neglikozilirane mutante, ki smo jih uporabili, se ne privzemajo v celice in se v celici po transfekciji ne nahajajo v endosomih/lizosomih. Se pa v gojišče poleg skrajšanega, na mestu 115 neglikoziliranega cistatina F, izločata tudi skrajšani in na mestih 61 in 62 neglikozilirani mutanti, kar kaže na to, da lahko glikozilacija na asparaginu 115 pripomore k prehodu proteina iz celice. Ugotovili smo, da ima glikozilacija tudi na asparaginih na mestih 61 in 62 velik vpliv na izločanje in privzem ter tudi na lokalizacijo aktivne oblike cistatina F v celicah HeLa, saj neglikozilirane mutante v veliko manjši meri ali pa sploh ne prehajajo membrane. Rezultati kažejo tudi na to, da morebitna O-glikozilacija ali fosforilacija nimata vpliva na prehod aktivne oblike cistatina F preko membran.Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [M. Lačen], 2020Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 4878449
Avtor
Lačen, Mojca
Drugi avtorji
Kos, Janko, 1959- |
Perišić, Milica
Teme
Cistatini |
Imunski sistem |
cistatin F |
glikozilacija |
fosforilacija |
lokalizacija proteina
Knjižnica | Signatura – lokacija, inventarna št. ... | Status izvoda |
---|---|---|
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana | Knjižnica emšf 615 LAČEN MOJCA Vpliv 815 IN: 0016462 |
prosto - za čitalnico |
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Lačen, Mojca | |
Kos, Janko, 1959- | 04648 |
Perišić, Milica | 36596 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: