(UL)
-
Ugotavljanje vpliva izbranih izoflavonoidov na aktivnost kresničkine luciferaze = Influence of selected isoflavonoids on firefly luciferase activity : magistrski študijski program Industrijska farmacijaVegelj, JanKresničkina luciferaza je reporterski gen, ki se pogosto uporablja na področju raziskovanja vpliva spojin na transkripcijsko aktivnost genov in se njegovo izražanje ugotavlja preko bioluminiscenčne ... reakcije nastalega proteina. Izraženi protein je dovzeten za potencialni vpliv spojin, med drugim zaviranje in stabilizacijo, kar lahko vodi v lažno pozitivne rezultate. Luciferaza morske mačehe, ki se pogosto uporablja v kombinaciji s kresničkino luciferazo, predstavlja pomembno alternativo le-tej. Ker so izoflavonoidi kot ena izmed skupin naravnih spojin pogosto preiskovanih tudi v testnih sistemih s kresničkino luciferazo, je smiselno, da ovrednotimo njihov vpliv na le-to. V nalogi smo se osredotočili na 11 strukturno različnih izoflavonoidov in ovrednotili njihov vpliv na aktivnost kresničkine luciferaze in luciferaze morske mačehe. Pri tem smo potencialno interferenco kresničkine luciferaze v obliki zaviranja najprej ovrednotili s pomočjo QSAR programa InterPred, ki je napovedal veliko verjetnost zaviranja za 7 od 11 izoflavonoidov. Z novo metodo in vitro, ki temelji na osnovi luciferaznega testa na lizatu celične linije AR-EcoScreen, smo preverili zaviranje obeh reporterskih proteinov. Pri tem smo najprej testirali spojine pri 1, 10 in 100 %M koncentraciji, čemur je v primeru zaviralne aktivnosti sledilo še testiranje pri dodatnih koncentracijah in določitev IC50. Sedem od 11 izoflavonoidov je zaviralo kresničkino luciferazo, pri čemer smo pri primerjavi z rezultati programa InterPred prišli do zaključka, da program pravilno napove zaviralno aktivnost. Nobeden izmed izbranih izoflavonoidov ni zaviral luciferaze morske mačehe in vitro. Za najbolj močne zaviralce smo v obliki prirejenega testa in vitro vrednotili tudi temperaturno stabilizacijo kresničkine luciferaze. Vendar pa z gotovostjo težko potrdimo, da so pridobljene vrednosti posledica stabilizacije proteina, saj ima ta metoda nekaj pomanjkljivosti. Zaviranje kresničkine luciferaze smo raziskali še bolj podrobno s pomočjo molekulskega sidranja in potrdili, da se aktivni izoflavonoidi vežejo v luciferinski žep proteina ter preučili odnos med strukturo in aktivnostjo aktivnih izoflavonoidov. Z molekulskim sidranjem smo tudi potrdili, da izbrani izoflavonoidi ne zavirajo luciferaze morske mačehe. Potrdili smo zaviralno aktivnost nekaterih izbranih izoflavonoidov, kar lahko zaradi stabilizacije pojasni višje odzive celičnih linij s kresničkino luciferazo v preteklih študijah. Pri testiranju vpliva izoflavonoidov na transkripcijsko aktivnost izbranih genov bi bila tako bolj ustrezna uporaba luciferaze morske mačehe.Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [J. Vegelj], 2021Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 72734979
Avtor
Vegelj, Jan
Drugi avtorji
Sollner Dolenc, Marija |
Kenda, Maša, farmacevtka
Teme
Farmacevtska kemija |
Flavonoidi |
izoflavonoidi |
kresničkina luciferaza |
luciferaza morske mačehe |
zaviralna aktivnost
Knjižnica | Signatura – lokacija, inventarna št. ... | Status izvoda |
---|---|---|
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana | Knjižnica mind 547 VEGELJ JAN Ugotavljanje 213 IN: 0017020 |
prosto - za čitalnico |
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Vegelj, Jan | |
Sollner Dolenc, Marija | 08519 |
Kenda, Maša, farmacevtka | 39201 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: