Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
E-viri
Recenzirano Odprti dostop
  • Determination of genistein ...
    Tero-Vescan, Amelia; Vari, Camil-Eugen; Muntean, Daniela-Lucia; Dogaru, Maria-Titica; Filip, Cristina; Imre, Silvia

    Revista română de medicină de laborator, 03/2014, Letnik: 22, Številka: 1
    Journal Article

    A simple and selective method for genistein (GNST) determination in rat liver and kidney was validated in order to study the phytoestrogenic effect of GNST in ovariectomised female Wistar rats. GNST was separated on a Kromasil 100-RP8 column, 150 mm x 4.6 mm, 5 mm equipped with a Kromasil RP 8 precolumn. The mobile phase was 55:45 (v / v) phosphoric acid, 15 mmol in water: methanol at a flow rate of 1.3 ml / min. Luteolin 20 μg / ml in methanol was used as internal standard (IS). The retention time of GNST was t = 13.22 min and t =11.60 min for the IS. Calibration curves in the range 40-400 μg GNST/100g liver and 20-200 μg GNST/100g kidney presented a coefficient of determination higher than 0.99. The method developed presented a good precision and accuracy at the lower limit of quantification LLOQ. 10 white Wistar female rats, 8 weeks of age were treated s.c. with 10 mg GNST/kg bw/day for 8 weeks, while a group of 10 animals were used as controls. The values obtained for GNST in the liver were 192.12 ± 53.46 μg/100g and 74.51 ± 12.77 μg/100g in kidney samples. A fost validată o metodă simplă şi selectivă de determinare a genisteinei (GNST) din ficat şi rinichi de şobolan în vederea studierii efectului fitoestrogenic al GNST la șobolani Wistar de sex feminin ovariectomizaţi. GNST a fost separată pe o coloană Kromasil 100-RP8, de 150 mm x 4,6 mm, 5 μm prevăzută cu precoloană Kromasil RP 8. Faza mobilă a fost 55:45 (v/v) acid fosforic 15 mmol în apă : metanol la un debit de 1,3 ml/min. Ca standard intern a fost folosită luteolina 20 μg/ml în metanol. Timpul de retenţie al GNST a fost t = 13,22 min şi t = 11,60 min pentru standardul intern. Curbele de calibrare pe domeniul 40-400 μg GNST/100g ficat şi 20-200 μg GNST/100g rinichi au prezentat coeficienţi de determinare ˃0,99. Metoda a prezentat o bună precizie şi acurateţe la limita de cuantificare. 10 şobolani albi Wistar de sex feminin, cu vârsta de 8 săptămâni au fost trataţi s.c. cu 10 mg/kg c/zi soluţie GNST timp de 8 săptămâni, în timp ce un lot de 10 animale au folosit ca martor. Valorile obţinute pentru GNST în ficat au fost 192.12 ± 53.46 μg/100g, iar în rinichi 74.51 ± 12.77 μg/100g.