Abstract The use of agricultural residues as a substrate is a promising option for orchid acclimatization, which is a critical stage of micropropagation. Thus, this study aimed to evaluate the use of grape residue S-10 Beifort®, isolated or mixed with other agricultural residues, in the acclimatization of Oncidium baueri Lindl. Five treatments were studied (S-10 Beifort®; S-10 Beifort® + carbonized rice husk (CRH); S-10 Beifort® + coconut fiber (CF); S-10 Beifort® + CRH + CF; CRH + CF), with four replications containing 10 seedlings each. After 120 days, the highest survival rate occurred with the mixture CRH + CF (62.5%). The mixture of S-10 Beifort® with CRH provided a greater shoot length (3.7 cm), not differing from the mixture of the three substrates (2.9 cm). S-10 Beifort® + CRH and the mixture of the three substrates ensured greater root length (3.8 cm). The mixture of the three residues provided the highest average of fresh and dry mass accumulation. The pH variation between the substrates was from 5.2 to 6.3, while S-10 Beifort® presented the highest electrical conductivity (2030 μS cm-1) and the mixture of this material with carbonized rice husk presented the highest water retention capacity. The use of a mixture of S-10 Beifort® with carbonized rice husk or with carbonized rice husk and coconut fiber (1:1:1) is indicated for the acclimatization of Oncidium baueri Lindl. Resumo Na aclimatização os substratos podem contribuem para a adaptação vegetal após o cultivo in vitro. Este trabalho teve como objetivo avaliar o uso de S-10 Beifort®, um resíduo agrícola à base de uva, isolado ou em misturas com outros resíduos agrícolas na aclimatização de Oncidium baueri Lindl. Os substratos foram S-10 Beifort®, e as misturas de S-10 Beifort® com Casca de Arroz Carbonizada, Fibra de Coco, e Casca de Arroz Carbonizada + Fibra de Coco. Foi utilizado delineamento experimental inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e quatro repetições, contendo 10 plântulas cada. Após 120 dias a maior taxa de sobrevivência ocorreu com a mistura de Casca de Arroz Carbonizada e Fibra de Coco (62,5%). A mistura de S-10 Beifort® com a Casca de Arroz Carbonizada propiciou maior comprimento de parte aérea das plantas (3,7 cm), não diferindo apenas da mistura dos três substratos juntos (2,9 cm). Estas misturas garantiram maior comprimento de raiz (3,8 cm). A mistura dos três resíduos propiciou maior acúmulo de massa fresca e seca para plantas. A variação de pH entre os substratos foi de 5,2 a 6,3. O S-10 Beifort® apresentou a maior condutividade elétrica (2030 μS cm-1). Além disso, o substrato S-10 Beifort® em mistura com Casca de Arroz Carbonizada, apresentou a maior taxa de retenção de água. Podemos concluir que o uso da mistura de S-10 Beifort® com Casca de Arroz Carbonizada e com a Fibra de Coco (1:1:1) é indicado para a aclimatização de Oncidium baueri Lindl.