Terapija negativnim tlakom ili vakuum terapija (engl vacuum-assisted closure – VAC) univerzalna je potporna metoda liječenja rana. Novija istraživanja iz ovog područja fokusiraju se na utjecaj negativnog tlaka na bakterijsko opterećenje rane i mogućnost uklanjanja zrelog biofilma, no njegov utjecaj na sposobnost mikroorganizama da aktiviraju ili reduciraju modalitet formiranja biofilma ostaje neistražen. Cilj ovog rada bio je procijeniti potencijalni učinak negativnog tlaka na formiranje biofilma kod gram-negativnih bakterija s obzirom na početni pozitivni biofilm ili negativni biofilmski fenotip. Formiranje biofilma istraženo je za sojeve bakterija A. baumannii, P. aeruginosa, E. cloace, K. pneumonia i P. mirabilis izoliranih iz zaraženih ratnih rana ekstremiteta. Izmjerene su promjene optičke gustoće biofilma proizvedene istim bakterijskim sojem u uvjetima normalnih i negativnih tlakova, kao i broj sojeva koji su modificirali svoju sposobnost proizvodnje biofilma. Sojevi s početnim negativnim fenotipom biofilma su pod negativnim tlakom počeli snažnije proizvoditi biofilm od onih s pozitivnim biofilmom bez obzira na njihovu taksonomsku pripadnost. Pseudomonas sojevi pokazali su najveću stopu indukcije stvaranja biofilma pod negativnim tlakom od svih ispitanih mikroorganizmima. Zaključno, aktivacija mehanizama koji proizvode biofilm pod negativnim tlakom može se smatrati zaštitnom strategijom, koja osigurava perzistenciju mikroorganizama u rani čak i u slučaju primjene terapije negativnim tlakom.