Akademska digitalna zbirka SLovenije - logo
E-viri
  • Karboksilesteraza djelomice...
    Bagdoniené, Lida; Labeikytė, Danutė; Kalviņš, Ivars; Borutinskaitė, Veronika; Prokofjevs, Aleksandrs; Trapencieris, Pēteris; Juodka, Benediktas; Sjakste, Nikolajs

    Arhiv za higijenu rada i toksikologiju, 06/2009, Letnik: 60, Številka: 2
    Paper

    Premda su poznati već neko vrijeme, esteri gama-butirobetaina (GBB) i srodni spojevi nisu dobili mnogo pozornosti u znanstvenoistraživačkoj zajednici, a njihova fiziološka funkcija i dalje je nerazjašnjena. U ranijem smo istraživanju HPLC-metodom otkrili enzimsku aktivnost GBB-esteraze u serumu štakora rabeći umjetni supstrat ovoga enzima, tj. fenilirani gama-butirobetain. Cilj ovoga istraživanja bio je razviti pretragu koja će omogućiti spektrofotometrijsko ili kolorimetrijsko određivanje reakcijskih produkata nastalih aktivnošću GBB-esteraze te utvrditi koji pojedinačni proteini u serumu štakora posjeduju aktivnost GBB-esteraze. U tu je svrhu sintetiziran gama-butirobetain 1-naftil ester. Njegovom hidrolizom otpušta se 1-naftol koji povećava optičku apsorbanciju na 322 nm. Pokazali smo da u hidrolizi GBB 1-naftil estera u 1-naftol u serumu štakora sudjeluje GBB-esteraza. Pokušali smo pročistiti enzim iz štakorskoga seruma. Kombinacijom DEAE sefaroze pri pH 4,2 i afinitetne kromatografije s prokainamidom dobili smo 68-erostruko povećanje aktivnosti ovoga enzima. Razdvajanjem bjelančevina iz frakcije s pomoću 2D elektroforeze te naknadnom spektrometrijom masa utvrđeno je da u serumu štakora esteraznu aktivnost prema gama-butirobetainu kao supstratu djelomice provodi karboksilesteraza.