ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
-
Afinitetna kromatografska izolacija avtoprotiteles z [beta]2-glikoproteinom I = Isolation of autoantibodies with affinity chromatography on [beta]2-glycoprotein I : diplomska nalogaNadu, BarbaraReakcija med antigenom in protitelesom poteka po principu kljuè-kljuèavnica. Pri tem potekajo razliène nekovalentne interakcije med epitopom in hipervarijabilnimi regijami. Afiniteta posameznih ... protiteles za antigen je lahko moèna ali sibka. Protitelesa z moèno afiniteto lazje doloèimo, ker je energija vezi z antigenom vijsa. Sibko afinitetna protitelesa pa se slabse vezejo in jih lahko pred detekcijo izgubimo v fazi spiranja.Antifosfolipidana protitelesa (aPL) so heterogena druzina cirkulirajoèih imunoglobulinov razredaIgG, v manjsi meri tudi IgM in IgA. Predstavljajo diagnostièni kriterijza antifosfolipidni sindrom (APS), prisotna pa so tudi pri drugih imunskih motnjah. ß2-GPI je pomemben antigen za aPL. Anti-ß2-GPI doloèamo s specifiènim ELISA testom (encimsko imunski test na trdnem nosilcu). Kot antigen uporabimo izoliran èloveski ß2-GPI. ß2-glikoprotein I (ß2-GPI) je glikoziliran plazemski protein, sestavljen iz 326 aminokislin. Najuèinkovitejsa za izolacijo je afinitetna kromatografija, vendar pa je ta postopek zamuden in zahteven. Z eno izolacijo, ki traja dva tedna dobimo samo 2-4 mg proteina. Za nadaljnje preuèevanje anti-ß2-GPI protiteles, ki jih lahkonato izoliramo na ß2-GPI koloni, pa potrebujemo najmanj 14 mg proteina. Zato je pomembno doloèiti optimalne pogoje, pod katerimi lahko ß2-GPI kolono veèkrat uporabimo.. Nas cilj je bil doloèiti pogoje, pod katerimi lahko s kromatografsko metodo izoliramo specifièna protitelesa proti ß2-GPI in doloèiti pogoje regeneracije, ki omogoèajo veèkratno uporabo kolone. Za to smouporabili preèisèeno plazmo z imunoadsorpcijo na proteinu A (vzorec PM) oziroma vzorec, ki vsebuje imunoglobuline razreda G (IgG). Razliène volumne PMvzorca smo nanasali na ß2-GPI kolono in lovili posamezne frakcije. Orientacijsko smo prisotnost proteinov doloèili z UV spektrofotometrijo in kvantitativno kolorimetrièno z Bio-Rad metodo. V pozitivnih frakcijah smo natopreverili prisotnost anti-ß2-GPI protiteles z ELISA testom. Ugotovili smo,da je optimalen volumen vzorca 6,2 mL. To pa je prevelik volumen vzorca, da bi lahko afinitetno izloèanje avtoprotiteles z ß2-GPI, uporabljali kot za dokazovanje avtoprotiteles pri avtoimunskih boleznih, oziroma za njihovo odkrivanje. Dokazali smo obstoj visoko afinitetnih anti-ß2-GPI protiteles, ki v literaturi se niso bila opisana. Kot optimalen pufer za izpiranje protitelesse je izkazal glicin s 4 M natrijevim kloridom in pH 2,5, ki je ustrezen kompromis med pogoji za izpiranje visoko afinitetnih protiteles in zasèito kolone z vezanim ß2-GPIType of material - undergraduate thesisPublication and manufacture - Ljubljana : [Nadu B.], 2002Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 1222257
Author
Nadu, Barbara
Other authors
Božič, Borut, 1959- |
Kotnik, Vladimir
Topics
afinitetna protitelesa |
UV spektrofotometrija |
encimsko imunski test |
metode
Library/institution |
City | Acronym | For loan | Other holdings |
---|---|---|---|---|
Faculty of Pharmacy, Ljubljana | Ljubljana | FFALJ |
reading room 1 cop.
|
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
If the library membership card is not in the list,
add a new one.
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Božič, Borut, 1959- | 00781 |
Kotnik, Vladimir | 07756 |
Source: Personal bibliographies
and: SICRIS
Select pickup location:
Material pickup by post
Delivery address:
Address is missing from the member's data.
The address retrieval service is currently unavailable, please try again.
By clicking the "OK" button, you will confirm the pickup location selected above and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the above pickup location and delivery address, and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the address selected above and complete the reservation process.
Notification
Automatic login and reservation service currently not available. You can reserve the material on the Biblos portal or try again here later.
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Reservation in progress
Please wait a moment.
Reservation was successful.
Reservation failed.
Reservation...
Membership card:
Pickup location: