NUK - logo
Faculty of Pharmacy, Lj. (FFALJ)
  • Antioksidativna aktivnost dveh vrst iz rodu Bupleurum iz Španije = Antioxidant activity of two Bupleurum species from Spain : diplomska naloga
    Novak, Andreja, farmacevtka
    V predhodnih studijah so se vrste iz rodu Bupleurum iz Spanije izkazale kot zelo uèinkovita protivnetna rastlinska zdravila. Njihove antioksidativne lastnosti pa do sedaj se niso bile dobro prouèene. ... V nasi studiji smo se zato odloèili podrobneje preizkusiti in predstaviti antioksidativno delovanje vrstBupleurum fruticescens in Bupleurum rigidum, rastoèih in nabranih v okolici Madrida (Spanija).Antioksidanti so snovi, ki reagirajo s prostimi radikali, jih stabilizirajo in tako prepreèijo morebitno skodo, ki bi jo radikali povzroèili celicam. Molekula antioksidanta donira enega svojih elektronov prostemu radikalu, ob tem pa sama postane stabilen, nereaktiven radikal. Prosti radikal je molekula, ion ali atom z nesparjenim elektronom v zunanji orbitali. Nekateri radikali so stabilni in dolgo ziveèi, veèina pa jihhitro reagira in so zato nevarni zivim celicam. Nastanejo lahko s homolitsko cepitvijo kovalentne vezi ali v redoks reakcijah metabolizma. Reagirajo tako, da od molekule odtegnejo elektron, pri èemer ĆnapadenaĆ molekula sama postane radikal. Drug mozen naèin reakcije je adicija na molekulo. Prost elektron se lahko tudi prenese z radikala na drugo molekulo. Reakcija se nadaljuje verizno, konèa pa se, ko radikali reagirajo med seboj ali z nastankom stabilnih radikalov, ki ne reagirajo naprej. Veèina nevarnih radikalov je kisikovih spojin (reaktivni kisikovi intermediati), ki so v metabolizmu vseskozi prisotni. Prosti radikali sodelujejo tudi pri reakcijah vnetja - obrambni sistem jih uporablja za unièevanje tujkov, po nekaterih predvidevanjih pa so tudi sami lahko razlog za vnetje in obsirne poskodbe, èe njihovo nastajanje uide nadzoru. Flavonoidi so sekundarni rastlinski metaboliti, katerih vloga v rastlinah se ni popolnoma jasna. Nekateri prispevajo barvo ali okus, so pa tudi brezbarvni vidni zuzelkam, ker absorbirajo doloèen spekter UV svetlobe. Predvideno je, da v rastlinah lahko delujejo kot inhibitorji ali stimulatorji encimov, rastni regulatorji, nekateri imajo delovanje podobno zivalskim hormonom. Flavonoidi so fenolne spojine in dobri antioksidanti. V nasi raziskavi smo predvideli, da so fenolnespojine glavne uèinkovine, ki so odgovorne za antioksidativno delovanje, in primerjali kolièino fenolov v razliènih izvleèkih z njihovo antioksidativno uèinkovitostjo. Za doloèanje antioksidativnega delovanja smo uporabili dva testaČ DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) test in test lipidne peroksidacije fosfolipidov iz ekstrakta govejih mozganov. Za doloèanje celokupne vsebnosti fenolnih uèinkovin smo uporabili metodo s Folin-Ciocalteau-jevim reagentom. Na koncu smo prisotnost flavonoidov in nekaterih ostalih fenolnih spojin preverili s tankoplastno kromatografijo (TLC) in s tekoèinsko kromatografijo visoke loèljivosti (HPLC). Rastlinski material so bili posuseni nadzemni deli vrst B. fruticescens in B. rigidum. Rastlini smo obravnavali loèeno. Po mletju smo izvedli ekstrakcijo na dva razlièna naèina. Prvi je bil ekstrakcija z maceracijo v metanolu (imenovano Ćcrude extractĆ). Drogo smo pustili èez noè v primerni kolièini topila, ki smoga naslednji dan izparili. Postopek smo ponavljali dokler smo po izparevanju topila se dobili zaznavno kolièino ekstrahirane snovi. Pri drugem naèinu smo drogo namakali zaporedno v treh razliènih topilih z narasèajoèo polarnostjo. Najprej smo ekstrahirali v heksanu. Ko je bila ekstrakcija konèana, smo rastlinski material posusili in ekstrahiranje nadaljevali z etil acetatom in po enakem postopku na koncu se z metanolom. Posusene izvleèke smo pred testiranji raztopili v metanolu v razliènih koncentracijah glede na njihovo uèinkovitost in po potrebi filtrirali (lipofilni izvleèki se niso popolnoma raztopili). Doloèili smo IC50 v DPPH testu in testu lipidne peroksidacije. Kot standard in referenèno raztopino smo uporabili Troloxr, ki je vodotopni analog vitamina E. DPPH je radikal, ki ob stiku z antioksidantom in posledièno prejetju enega elektrona spremeni barvo iz vijoliène v rumeno. Rezultat testa merimo spektrofotometrièno, maksimum je pri 517 nm. Test potekav polarnem okolju, v nasem primeru je bilo topilo metanol. Test lipidne peroksidacije je primernejsi za nepolarne ekstrakte, saj mora uèinkovina delovati v fosfolipidnem dvosloju. Reakcijo peroksidacije smo sprozili s sistemom Fežaskorbat. Konèni razpadni produkti masèobnih kislin se vezejo s tiobarbiturno kislino v obarvane lipofilne komplekse, ki prehajajo v organsko (v nasem primeru butanolno) fazo, katere absorbanco smo merili spektrofotometrièno pri 540 nm.
    Type of material - undergraduate thesis
    Publication and manufacture - Ljubljana : [Novak, A.], 2006
    Language - english
    COBISS.SI-ID - 1945201

Call number – location, accession no. ... Copy status Reservation
Knjižnica
dp 0000000581 Novak Andreja Antioksidativna
IN: 0008961 Knjižnica
dp 581 Novak Andreja Antioksidativna
IN: 0008961 		available - reading room
loading ...
loading ...
loading ...

Shelf entry