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Maria, Carla Cristina Judice
Dissertation
Orientador: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Made available in DSpace on 2018-08-04T03:04:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria_CarlaCristinaJudice_D.pdf: 2319952 bytes, checksum: e037242b656f9d55edeac4eaeb12cfb4 (MD5) Previous issue date: 2005 Resumo: O polifenismo de castas é um fenômeno multifacetado, sendo mais evidente em diferenças na capacidade reprodutiva e na longevidade entre rainhas e operárias. No presente estudo, a abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata anthidioides foi escolhida para a investigação de diferenças na expressão gênica entre rainhas e operárias recém nascidas. Este estudo foi focalizado em adultos recém nascidos pois esse estágio representa o ponto final do desenvolvimento embrionário e o ponto inicial para o desempenho de tarefas casta-específicas. Inicialmente, foi empregada a metodologia do ¿differential display reverse transcription (DDRT)-PCR¿ e podendo ser detectada a expressão diferenciada de 14 genes entre rainhas e operárias. As diferenças no perfil de expressão foram posteriormente analisadas através de duas bibliotecas subtrativas de cDNA: uma representando genes muito expressos ou induzidos em operárias quando em comparação com rainhas, e a outra representando genes mais expressos na casta rainha. Embora o número total de seqüências geradas não tenha permitido uma compreensão completa dos transcriptomas das castas, foi possível detectar em rainhas a predominância de genes envolvidos na regulação transcricional e no metabolismo, em relação à ampla diversidade de categorias funcionais das ESTs encontradas na casta operária. Um outro grupo representando seqüências de funções desconhecidas apresentou elevada similaridade a seqüências de Apis mellifera, podendo, portanto, conter genes candidatos para investigações em processos específicos das abelhas sociais ou do desenvolvimento de castas de maneira geral. Além disso, este estudo questionou se rainhas induzidas pelo tratamento com hormônio juvenil (HJ) durante a fase larval poderiam apresentar níveis de expressão gênica similares aos de uma rainha produzida de modo natural. Curiosamente, os dados preliminares sugerem que a rainha artificial não apresenta o mesmo transcriptoma de uma rainha natural, indicando que o HJ pode induzir a diferenciação, mas não em todos os aspectos Abstract: Caste polyphenism is a multifaceted phenomenon, most evident in the marked differences in reproductive capacity and longevity between queens and workers. In the present study, the stingless bee Melipona quadrifasciata anthidioides was chosen to investigate differences in gene expression between newly emerged adult queens and workers. This study has focused on newly emerged adults since this stage represents the endpoint of post-embryonic development and the starting point for caste-specific task performance.Initially, the methodology of differential display reverse transcription (DDRT)-PCR was employed and the differential expression for 14 M. quadrifasciata genes could be detected between queens and workers. The differences in the expression profile of the castes were further analysed through two subtractive cDNA libraries: one representing the genes that are overexpressed in workers, when compared with queens and the other representing genes which are overexpressed in queens.Although the total number of sequence does not allow a comprehensive picture of the caste transcriptomes, there seems to exist a predominance of genes involved in transcriptional regulation and metabolism in the queen ESTs, versus a much broader spectrum of categories in the worker ESTs. Another group representing sequences with unknown function displayed significant matches only with the Apis database and, therefore, may contain candidates for further investigations on processes specific to social bees or caste development in general.In addition, this study addressed the question of whether queens induced by treatment with juvenile hormone (JH) during the larval phase display genes with similar expression levels as naturally produced queens. Remarkably, our preliminary data suggest that the artificial queen does not present the same transcriptome of a natural queen, indicating that JH may not induce all aspects of the differentiation process Doutorado Genetica Animal e Evolução Doutor em Genetica e Biologia Molecular
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