The effect of the nanoscale structure of bioceramics on their in vitro bioactivity and capacity to osteogenically differentiate stem cell is studied. Nanoparticles of hydroxyapatite (nHA), bioactive ...glass (nBG), nanoporous bioactive glass (MBG), and nanoporous bioactive glass nanospheres (nMBG) are investigated. The nanometric particle size of bioceramics seems to be more determining in controlling the ability to induce bone-like apatite as compared to the nanoporous structure. At short incubation time, nBG also produces a bioactive extracellular medium capable of upregulating key osteogenic markers involved in the development of a mineralizing phenotype in DPSCs. The bioactive properties of nBG are promissory for accelerating the bone regeneration process in tissue engineering applications.
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista
Introducción:;
La regeneración ósea a es un procedimiento requerido en odontología en;
técnicas quirúrgicas ...reconstructivas, implantología y en periodoncia. En los últimos;
años la Ingeniería Tisular ;
(;
IT;
);
se encuentra centrada en el desarrollo de terapias;
más eficiente para la regeneración de tejido óseo. La IT es una disciplina que se;
basa en tres elementos principales; a;
);
señales bioactivas, ;
(;
b;
);
Andamio ;
(;
scaffold;
);
y;
;
(;
c);
Células madre. Un requerimiento fundamental de la IT es el de disponer de;
fuentes apropiadas de células madres para el desarrollo de nuevas terapias, así;
como el de conocer las propiedades de estas células para cada aplicación;
específica. Las células madre son células no diferenciadas que tienen la;
capacidad de auto renovarse, diferenciarse a multilinajes de células individuales y;
regenerar en vivo diferentes tejidos. Últimamente se ha generado el interés de;
aislar células madre de origen dental, donde se han identificadas MSCs en pulpa;
dental ;
(;
DPSCs);
, dientes deciduos exfoliados ;
(;
SHED);
, folículo dental, papila apical;
radicular ;
(;
SCAP;
);
y ligamento periodontal ;
(;
PDLSCs);
. Sin embargo, hasta el;
momento no se conocen estudios que comparen y demuestren diferencias en la;
habilidad de estas células de distinto origen, para diferenciarse hacia el linaje;
óseo; ni tampoco que indiquen qué técnica de aislamiento podría ser más;
apropiada para este propósito.;
El objetivo del presente estudio consiste en aislar y comparar la capacidad;
de diferenciación osteogénica de las DPSCs y PDLSCs, utilizando para ello dos;
técnicas de aislamiento, explante y digestión enzimática.;
Materiales y Métodos: Se recolectaron terceros molares impactados de pacientes;
sanos, previa firma de consentimiento informado y se les extrajo el ligamento;
periodontal y pulpa dental. Ambos tejidos fueron cultivados y aislados mediante el;
método de digestión enzimática y explante. Se analizó la viabilidad mediante la;
técnica exclusión azul de tripán y ensayo MTS. La capacidad de diferenciación;
osteogénica se evaluó a través de la medición de la actividad de fosfatasa;
alcalina, depósitos de matriz mineralizada y expresión de genes tempranos.;
Adicionalmente las células fueron sometidas a un periodo de criopreservación;
donde posteriormente se evaluó su viabilidad.;
1;
Resultados;
Para DPSCs y PDLSCs se obtuvieron valores de viabilidad cercanos al;
90%, sin diferencia significativas entre ellas. Al evaluar la viabilidad celular a;
tiempos determinados, las DPSCs- digestión obtiene los mayores valores en;
cuanto a la cantidad de células al finalizar el cultivo. Los resultados en relación a la;
diferenciación osteogénica muestran mayores niveles de actividad de ALP y;
mayores depósitos de matriz mineralizada para las DPSCs, analizados con rojo;
alizarín y microscopía SEM. Ambos tejidos son capaces de mantener una;
viabilidad adecuada luego de un proceso de criopreservación.;
Conclusiones;
Células osteoprogenitoras aisladas de pulpa dental, presentan mejores;
propiedades de diferenciación al linaje óseo, comparado con las células madre;
obtenidas de ligamento periodontal. Las DPSCS-digestión aparecen como una;
alternativa promisoria para aplicaciones en ingeniería de tejidos orientada a la;
regeneración ósea en odontología.
PDF