Les glioblastomes sont des tumeurs au pronostic défavorable. L’échec des thérapies est lié à la présence de cellules souches cancéreuses (CSCs), résistantes aux traitements ; la caractérisation de ...ces cellules et l’identification de biomarqueurs sont donc primordiales. Le calcium contrôle de nombreux processus cellulaires ; parmi les éléments majeurs de la signalisation calcique, la Calmoduline (CaM) est impliquée dans différentes pathologies, dont des cancers, et est un puissant régulateur de l’état physiologique d’une cellule. CaM interagit avec de nombreuses protéines impliquées dans la régulation de l’homéostasie calcique de la cellule. Nous avons cherché à identifier et caractériser des antagonistes de CaM, inhibant différentiellement ces interactions. L’utilisation de ces antagonistes en tant que perturbateurs de l’homéostasie calcique a permis de mettre en évidence un marqueur caractérisé des CSCs de glioblastomes. D’autre part, l’étude comparée du protéome membranaire de CSCs issues de glioblastomes a permis de mettre en évidence la surexpression de clusters de différenciation et protéines impliquées dans la signalisation calcique. Ces protéines sont de potentiels marqueurs moléculaires des CSCs de glioblastome.
Glioblastomas are malignant tumor of poor prognosis. Therapeutic failure might be supported by cancer stem cells (CSCs); characterization of these cells and biomarkers identification are of most importance. Calcium controls numerous cellular process; beyond major elements of calcium signaling, Calmodulin (CaM) is involved in different pathologies and tumors, and is a powerful regulator of cell physiological state. CaM interacts with a plethora of proteins involved in cell calcium homeostasis regulation. We aimed at identifying and characterizing CaM antagonists, capable of differentially inhibiting these interactions. The use of these antagonists in calcium homeostasis disturbance led to the identification of a characterized marker of glioblastomas CSCs. In another approach, the comparative study of glioblastomas CSCs membrane proteome uncovered the overexpression of differentiation clusters and proteins involved in calcium signaling. These proteins are potential molecular biomarkers for glioblastomes CSCs.
Actuellement, le traitement des glioblastomes repose sur l’exérèse chirurgicale, la radiothérapie et la chimiothérapie. L’efficacité cependant limitée de ces traitements a justifié le développement ...de nouvelles approches thérapeutiques basées sur les caractéristiques biologiques et moléculaires de ces tumeurs.
Plusieurs altérations touchant les mécanismes de régulation cellulaire constituent en effet des cibles privilégiées : sur-expression du récepteur à l’EGF, activation des voies de transduction PI3K/Akt, mTOR et Ras/Raf, ou sécrétion de protéases qui favorisent la migration des cellules tumorales en dégradant la matrice extra-cellulaire. Les agents anti-angiogéniques, également en cours d’investigation, devraient probablement trouver leur place dans l’arsenal thérapeutique puisque le degré de malignité et la croissance des tumeurs gliales sont dépendants de leur néovascularisation.
La nouvelle technique chirurgicale dite « convection enhanced delivery » permet l’administration
in situ d’agents ne pouvant pas franchir la barrière hémato-encéphalique, comme les toxines couplées avec un ligand sélectif ou des oligonucléotides immunostimulants. Ces agents sont actuellement en cours d’investigation clinique.
Même si les résultats des études cliniques ont été jusque-là décevants, la combinaison de ces molécules entre elles ou avec la radiothérapie ou la chimiothérapie permettra probablement dans un proche avenir d’améliorer le pronostic de ces patients.
Current treatment of glioblastomas relies on surgical resection, radiotherapy and chemotherapy. However, the efficacy of these therapeutics is still limited and new therapeutic approaches based on the understanding of brain tumor biology are emerging.
High expression of the EGF receptor by tumor cells, activation of the PI3K/Akt and the Ras/Raf pathways represent interesting targets for new selective drugs under development. Proteases inhibitors and antiangiogenic agents are also under investigations in clinical trials.
In addition, the recent development of convection-enhanced delivery technique allows the administration of drugs which do not cross the blood-brain-barrier, such as selective toxins or immunostimulating oligonucleotides.
Though the results of clinical trials have been somewhat disappointing, using different drug combinations or drug-radiotherapy associations will probably enable an improvement in the prognosis for these patients in the future.
Purpose: To examine the low dose-response of a human radioresistant glioblastoma cell line (T98G) using two different methods to measure surviving fraction and to define the influence of cell cycle ...phase on this response. Materials and methods: The survival of cells following exposure to single very low doses of X-rays in vitro was measured using either the Dynamic Microscopic Image Processing Scanner (DMIPS) or a Cell Sorter (CS). The DMIPS was also used to measure the low dose survival response of T98G cells following manipulation of their progression through the cell cycle. Results: With both methods, T98G demonstrated marked low dose hyper-radiosensitivity (HRS) and the two methods produced very similar data in the low dose region of the survival curve. However, the CS protocol produced less variable results and was the more efficient method of generating low dose data. HRS was also demonstrated when these cells were irradiated while held in reversible arrest in the G1 phase of the cell cycle, but the effect was less marked than in the asynchronous population. Conclusions: T98G glioblastoma cells demonstrate marked HRS, which is a characteristic of the whole population rather than being due to the influence of a small subpopulation of hyper-radiosensitive cells within a particular phase of the cell cycle.
Le pronostic du glioblastome reste parmi les plus graves de la cancérologie moderne. La recherche clinique a été néanmoins très active depuis 30 ans, en explorant tous les concepts développés dans ...les laboratoires de radiobiologie. La radiosensibilisation des tumeurs hypoxiques, et surtout l'augmentation de la dose d'irradiation délivrée n'ont pas permis d'améliorer les résultats du traitement de ces tumeurs, que ce soit par irradiation hyperfractionnée, par irradiation externe complétée par une irradiation en conditions stéréotaxiques ou irradiation intersticielle, ou même par irradiation conformationnelle avec modulation d'intensité. La chimioradiothérapie concomitante, utilisée depuis longtemps en cancérologie générale, vient de remporter un nouveau succès dans le traitement du glioblastome. L'adjonction de témozolomide pendant toute la durée de l'irradiation, suivie d'une administration adjuvante, permet une amélioration significative de la probabilité de survie, au prix d'une majoration minimale de la toxicité immédiate. Loin d'être un aboutissement, cette avancée thérapeutique ouvre la voie vers d'autres recherches.
The prognosis of glioblastoma remains extremely poor. Clinical research has been very active for thirty years, and has explored all the concepts developed in the laboratories of radiobiology. Radiosensitisation of hypoxic tumours, hyperfractioned radiotherapy, external beam radiotherapy plus stereotactic radiosurgery or brachytherapy boost, and intensity modulated radiation therapy failed to improve the results of the treatment of these patients. Concomitant chemoradiotherapy has just obtained a new success in the treatment of glioblastoma. The addition of temozolomide to radiotherapy resulted in a statistically significant survival benefit with minimal acute additional toxicity. The challenge remains to improve clinical outcomes further, and some new research pathways are open.
OBJETIVO: Demonstrar as características de imagem do glioblastoma multiforme, tumor primário mais comum do sistema nervoso central, com ênfase em suas localizações, ocorrência de metástases e relação ...com o grau de necrose demonstrado por ressonância magnética (RM). MÉTODO: Foram analizados retrospectivamente 67 casos de ressonância magnética de pacientes com diagnóstico histológico de glioblastoma multiforme, retirados do arquivo didático da MED IMAGEM. Todos os exames foram realizados em aparelhos GE de 1,5 T. (GE- Medical Systems), no período compreendido entre janeiro de 1995 e maio de 2003. RESULTADOS: Nos 67 casos estudados, a idade dos pacientes variou entre 4 e 86 anos, com idade média de 60 anos. Houve predominância no sexo masculino, com 39 casos (58%). A localização frontal foi preponderante (47%) seguida de 18% na região temporal e 16% na região parietal. Em 19% se localizou em outros sítios. O aparecimento de metástases ocorreu em 15 casos. CONCLUSÃO: Concordante com a literatura o glioblastoma multiforme predomina nos lobos frontais e acomete preferencialmente pacientes com idade acima de 50 anos. O aparecimento de metástases em nossos casos ocorreu em 22%.
Les glioblastomes sont des tumeurs fatales du fait de leur agressivité et du manque de traitements efficaces. La prolifération accrue, le caractère invasif et la résistance à la mort cellulaire leur ...confèrent une croissance rapide et une invasion du parenchyme cérébral environnant, à l’origine de leur systématique récidive. Exprimée par la composante tumorale en hypoxie mais également par la composante vasculaire, l’AM participe de façon autocrine et paracrine au développement des glioblastomes en favorisant la croissance des cellules tumorales et l’angiogenèse tumorale.Il a été montré que des anticorps polyclonaux dirigés contre les récepteurs de l’AM inhibent in vitro la croissance, la migration et la formation de pseudo-capillaires des cellules endothéliales, suggérant une neutralisation par ces anticorps de certaines étapes de l’angiogenèse. De même, il a été montré in vivo que ces anticorps inhibent la croissance tumorale en supprimant l’angiogenèse et la croissance des cellules tumorales suggérant ainsi que les récepteurs de l’AM constitueraient une bonne cible thérapeutique. Des anticorps capables de reconnaître et neutraliser à la fois l’AM, les CLR, RAMP2 et RAMP3 agissant de la même manière sur la croissance tumorale et l’angiogenèse représenteraient un bénéfice thérapeutique majeur. Des anticorps dirigés contre un peptide chimérique constitué de l’enchainement de séquences peptidiques des protéines CLR, RAMP2, RAMP3 et du peptide AM sont en cours. Le traitement par ces anticorps diminue la croissance des cellules tumorales ainsi que leurs migration et invasion. Ces résultats très encourageants nous permettent pour le moment de valider la faisabilité du concept d’anticorps développés à partir d’un peptide chimérique pour neutraliser le système AM/AMR dans le but d’envisager dans le futur une application thérapeutique.
Glioblastoma are fatal tumors because of their aggressiveness and lack of effective treatments. The increased proliferation, the invasiveness and resistance to cell death gives them a rapid growth and invasion of brain parenchyma surrounding the origin of their systematic recurrence. Expressed by the tumoral component in hypoxia but also by the vascular component, the AM participate by an autocrine and paracrine way, the development of glioblastoma by promoting tumor ell growth and tumor angiogenesis.It was shown that polyclonal antibodies directed against the AM receptor inhibit in vitro growth, migration and the formation of pseudo-capillary of endothelial cells, suggesting neutralization by theses antibodies in certain stages of angiogenesis. Similarly, it has been shown in vivo that these antibodies inhibit tumor growth by suppressing angiogenesis and tumor cell growth, suggesting that the AM receptor would be a good therapeutic target. Antibodies that recognized and neutralized both the AM, the CLR, RAMP2 and RAMP3 acting the same way on tumor growth and angiogenesis represent a major therapeutic benefit. Antibodies against a chimeric peptide consisting of peptide sequence of CLR, RAMP2, RAMP3 and AM peptide are in progress. Treatment with these antibodies decreases the growth of tumor cells, their migration and invasion. These encouraging results allow us the time to validate the feasibility of the concept of antibodies developed from a chimeric peptide to neutralize the AM/AMR system in order to consider in the future therapeutic application.
Les phosphinosucres appelés aussi « phostines » sont des analogues phosphorés des sucres pyranoses et des C-arylglycosides. L'évaluation biologique de ses composés a révélé une activité ...anticancéreuse des phosphinosucres sur les cellules de glioblastome multiforme, un cancer particulièrement malin et invasif qui ne possède pas de solution thérapeutique. Dans le but de comprendre les mécanismes d'action des phosphinosucres et la stéréo-dépendance de leur activité biologique, la caractérisation des diastéréomères de « phostines » a été menée. Suite à cette détermination structurale, le développement de synthèses diastéréosélectives a permis d'obtenir un mélange fortement enrichi en diastéréomère le plus actif par une séquence réactionnelle qui a mis en jeu une réaction d'oxydation de phosphinosucres -hydroxylés en α-cétophosphinosucres, suivie d'une réduction diastéréosélective. Afin d'améliorer l'activité antiproliférative des phosphinosucres, une diversification chimique a été réalisée. Les variations du groupement aryle lié à l'atome de phosphore nous ont amené à développer une synthèse des aryl-hydrogénophosphinates qui a permis d'obtenir une large variété de ces composés. Par la suite, les aryl-hydrogénophosphinates obtenus ont été engagés dans la synthèse des « phostines ». De plus, des variations chimiques sur le carbone en position α de l'atome de phosphore ont été entreprises et ont permis l'élaboration de plusieurs composés (triflate, azido, amino, déoxy et triazolyles), puis finalement à l'analogue phosphinosucre du N-acétylglucosamine qui a présenté une importante activité anticancéreuse in vitro.
Phosphinosugars also called « phostines » are new cyclic phosphinates, analogs of carbohydrates and C-aryglycosides, with phosphorus atom mimicking the anomeric carbon. Biological screening tests of these compounds revealed an anticancer activity against glioblastoma multiform, a highly invasive and malignant tumor without curative therapy.With the aim of understanding the phosphinosugars mode of action and their stereo-dependent biological activity, characterization of four phosphinosugars diastereomers formed during the chemical process has been performed. After their structural determination, diastereoselective synthesis enabled us to obtain an enriched mixture of the most active diastereomer based on an oxidation of -hydroxyled phosphinosugars in corresponding -keto phosphinosugars followed by a diastereoselective reduction. Thereafter, antiproliferative activity of phoshinosugars was performed by chemical diversification. Modification of the aryl group linked to phosphorus atom led us to develop aryl-hydrogenophosphinate synthesis to create a broad variety of these structures. Then, the expected aryl-hydrogenophosphinates were used for phostines preparation. Furthermore, chemical modifications on the carbon in α position of phosphorus atom were led and furnished several new compounds (triflate, azido, amino, deoxy and triazolyl), as well as the phosphinosugar analog of N-acetylglucosamine which presented in vitro a high anticancer activity.
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