Svrha: U radu su predstavljeni preliminarni rezultati mjerenja laserski inducirane fluorescencije u nekoliko porfirinskih otopina. Koproporfirin i uroporfirin sastavni su dijelovi karijesnih lezija. ...Njihovo svojstvo fluorescencije pri obasjavanju svjetlom određene valne duljine može se uporabljati kao način detekcije karijesnih lezija. Materijali i postupci: U otopinama koproporfirina i dihidroklorida te uroporfirina i dihidroklorida s različitim pH-uvjetima izmjereni su apsorpcijski koeficijenti kako bi se identificirale spektralne regije za učinkovitu ekscitaciju laserima. Za indukciju fluorescencije odabrani su laseri s diskretnim valnim duljinama na 420 nm, 473 nm i 532 nm. Rezultati: Kod svih laserskih valnih duljina uočena je zanimljiva fluorescencijska emisija na 591 nm, 619 nm i 652 nm za koproporfirin i na 617 nm i 680 nm za uroporfirin. Zaključak: Kada se emisije svih porfirina međusobno kombiniraju, trebali bi odgovarati spektralnim strukturama koje se mogu naći u stvarnim karijesnim lezijama.
U radu su opisane četiri spektrofotometrijske metode za istodobno određivanje losartan kalija, amlodipin besilata i hidroklorotiazida u sirovinama i farmaceutskim pripravcima. Podaci koji su se ...preklapali kvantitativno su razlučeni kemometrijskim metodama, klasičnom metodom najmanjih kvadrata (CLS), multiplom linearnom regresijom (MLR), regresijom glavnih komponenata (PCR) te metodom parcijalnih najmanjih kvadrata (PLS). Kalibracije su provedene koristeći podatke o ovisnosti apsorpcije o koncentracijama, mjereći spektre nultog reda u rasponu 230,5350,4 nm (∆λ = 0,1 nm). Linearnost za losartan kalij bila je 840, za amlodipin besilat 15, a za hidroklorotiazid 315 μg ml1. Valjanost predloženih metoda uspješno je potvrđena analizom navedenih lijekova u različitim pripremljenim smjesama i tabletama.
Premda su poznati već neko vrijeme, esteri gama-butirobetaina (GBB) i srodni spojevi nisu dobili mnogo pozornosti u znanstvenoistraživačkoj zajednici, a njihova fiziološka funkcija i dalje je ...nerazjašnjena. U ranijem smo istraživanju HPLC-metodom otkrili enzimsku aktivnost GBB-esteraze u serumu štakora rabeći umjetni supstrat ovoga enzima, tj. fenilirani gama-butirobetain. Cilj ovoga istraživanja bio je razviti pretragu koja će omogućiti spektrofotometrijsko ili kolorimetrijsko određivanje reakcijskih produkata nastalih aktivnošću GBB-esteraze te utvrditi koji pojedinačni proteini u serumu štakora posjeduju aktivnost GBB-esteraze. U tu je svrhu sintetiziran gama-butirobetain 1-naftil ester. Njegovom hidrolizom otpušta se 1-naftol koji povećava optičku apsorbanciju na 322 nm. Pokazali smo da u hidrolizi GBB 1-naftil estera u 1-naftol u serumu štakora sudjeluje GBB-esteraza. Pokušali smo pročistiti enzim iz štakorskoga seruma. Kombinacijom DEAE sefaroze pri pH 4,2 i afinitetne kromatografije s prokainamidom dobili smo 68-erostruko povećanje aktivnosti ovoga enzima. Razdvajanjem bjelančevina iz frakcije s pomoću 2D elektroforeze te naknadnom spektrometrijom masa utvrđeno je da u serumu štakora esteraznu aktivnost prema gama-butirobetainu kao supstratu djelomice provodi karboksilesteraza.
Etanolne iscprine propolisa najčešće su korišteni proizvodi od propolisa na tržištu za liječenje manjih vrijedova u usnoj šupljini, angine, mlječca i kožnih infekcija. Zbog toga što je propolis još ...uvijek neoficijelna droga u ljekarništvu, ispitali smo sadržaj flavonoida u deset komercijalno dostupnih etanolnih iscrpina propolisa na hrvatskom tržištu koristeći dvije komplementarne spektrofotometrijske metode. Antimikrobna aktivnost
uspoređena je primjenom difuzionog testa na šest bakterijskih vrsta – Bacillus subtilis NCTC 8236, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus pyogens ATCC 12204, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC
27853 i jednu kvascima sličnu gljivičnu vrstu – Candida albicans ATCC 10231. Rezultati sadržaja flavonoida pokazuju da je sadržaj flavona i flavonola u proizvodima ujednačen (od 0,14 do 0,41%), međutim sadržaj flavanona jako varira između 0,43 i 18,78%. Ukupni
sadržaj flavonoida prikazan kao zbroj dviju komplementarnih metoda u proizvodima od propolisa je između 0,78 i 18,92%, a većina proizvoda sadrže flavonoide ispod 9%. Svi proizvodi sa sadržajem ukupnih flavonoida višim od 1% pokazuju antimikrobnu aktivnost protiv četiri gram-pozitivne bakterijske vrste, na vrstu Pseudomonas aeruginosa i kvascima sličnu gljivičnu vrstu Candida albicans. Ukupni sadržaj flavonoida prikazan kao zbroj dviju spektrofotometrijskih metoda koristan je podatak za procjenu sadržaja flavonoida u proizvodima od propolisa. Naši rezultati ukazuju na potrebu analize kakvoće proizvoda od propolisa.
U radu je opisana nova, jednostavna i osjetljiva spektrofotometrijska metoda za određivanje sulfonamida. Metoda se temelji na prevođenju sulfacetamida, sulfadiazina, sulfagvanidina, sulfamerazina, ...sulfometazina i sulfametoksazola u diazoderivate koji kondenzacijom s 8-hidroksikinolinom u alkalnom mediju daju crveno obojene produkte s maksimumom apsorpcije pri 500 nm. Beerov zakon vrijedi u koncentracijskom rasponu 0,17,0 µg mL1. Granice kvantifikacije i granice detekcije su 0,11-0,18, odnosno 0,03-0,05 µg mL-1. Za predloženu metodu procijenjene su intermedirska preciznost (RSD 0.1-0,5%) i točnost (analitički povrat 97,3-100,8). Uobičanjene pomoćne tvari u tabletama ne interferiraju tijekom određivanja. Metoda je uspješno primijenjena za analizu sulfonamida u farmaceutskim pripravcima.
U radu je predložena spektrofotometrijska metoda za određivanje lijekova s fenolnom skupinom salbutamol sulfat (SLB), ritodrin hidroklorid (RTD), izoksuprin hidroklorid (IXP) i lijekova s ...aromatskom amino skupinom dapson hidroklorid (DAP), sulfametoksazol (SFM) i sulfadiazin (SFD) u farmaceutskim dozirnim pripravcima. Metode se temelje na reakciji ljekovitih tvari s N,N-dietil-p-fenilendiamin sulfatom u prisutnosti KIO4, pri čemu nastaje zeleni (λmax pri 670 nm), odnosno crveni produkt (λmax pri 550 nm). Apsorbancije linerano ovise o koncentrancijama lijekova uz visok koeficijent korelacije (0,99860,9996) u koncentracijskom području 17, 222, 117, 1,512, 225 i 221 μg mL1 za SLB, RTD, IXP, DAP, SFM i SFD. Analizirani su i optimirani promjenjivi parametri kao što su temperatura, reakcijsko vrijeme i koncentracija reaktanata. Repetibilnost i intermedijarna preciznost iznosile su 0,21,0, odnosno 0,41,0 %. Nije primjećena nikakva interferencija s uobičajenim farmaceutskim pomoćnim sredstvima. Pouzdanost i izvedbene značajke predložene metode validirane su statistički. Povrat analitičke metode bio je od 99,5 ± 0,1 do 99,9 ± 0,3 %. Granice detekcije bile su 0,14, 0,21, 0,51, 0,44, 0,33 i 0,37 µg mL1 za SLB, RTD, IXP, DAP, SFM, odnosno SFD.
Opisana je spektrofotometrijska metoda za određivanje pefloksacin mesilata (PFM) kao čiste supstancije i u tabletama. Metoda se temelji na povratnoj ekstrakciji bromfenol modrila pri pH 5,2 iz ...ionskog para boja-ljekovita tvar te mjerenju apsorbancije boje na 590 nm. Ispitivani su i optimirani reakcijski uvjeti. Sustav slijedi Beerov zakon u koncentracijskom rasponu 0,15–1,25 g mL1 (R = 0,9986). Prema važećim ICH uputama procijenjeni su indeksi osjetljivosti kao što su molarni apsorpcijski koeficijent, granica detekcije i granica određivanja; također su procijenjeni ispravnost i preciznost. Relativna pogreška kretala se u rasponu –1,7 do 1,8%, a RSD vrijednosti između 1,0 i 1,1%. Metoda je uspješno primjenjena za određivanje PFM u tabletama s analitičkim povratom od 97,5 do 101,9% uz RSD od 0,6 do 1,9%. Rezultati su statistički uspoređeni s referentnom metodom pomoću Studentovog t-testa i F-testa, ukazujući na usporedivu preciznost i ispravnost obiju metoda. Ispravnost procijenjena metodom standardne adicije kretala se u rasponu od 97,0 do 106,0%, s preciznošću (RSD) boljom od 3%.
U radu su opisane jedna titrimetrijska i dvije spektrofotometrijske metode za određivanje salbutamol sulfata (SBS) čiste tvari i u tabletama. Opisane metode su jednostavne, osjetljive i brze, a kao ...reagense koriste N-bromsukcinimid (NBS) i dva bojila, rodamin-B i metilensko modrilo. U titrimetrijskoj metodi, vodenoj otopini salbutamol sulfata dodana je otopina NBS-a u octenoj kiselini u suvišku, te je nakon potpune oksidacije SBS-a jodometrijski određena količina neizreagiranog oksidansa. U spektrofotometrijskim metodama dodaje se poznati suvišak NBS-a u kiselom mediju nakon čega se neizreagirani suvišak oksidansa određuje nakon reakcije s rodaminom-B mjereći apsorbanciju na 555 nm (metoda A) ili metilenskim modrilom mjereći apsorbanciju na 665 nm (metoda B). U svim metodama, količina NBS-a koji reagira ekvivalentna je sadržaju SBS-a. Titrimetrijska metoda je primjenjiva u rasponu koncentracija od 1,74 × 10-4 do 8,68 × 10-4 mol L-1. SBS i NBS reagiraju u stehiometrijskom omjeru 1:6. U spektrofotometrijskim metodama apsorbancija linearno raste s koncentracijom SBS-a, što je potvrđeno koeficijentima korelacije od 0,9993 za metodu A te 0,9988 za metodu B. Sustavi slijede Beer-ov zakon unutar koncentracija 0,251,75 g mL-1 (metoda A) i 0,55,0 g mL-1 (metoda B). Izračunate vrijednosti molarnog apsorpcijskog koeficijenta iznose 2,10 × 105 za metodu A i 6,16 × 104 L mol-1 cm-1 za metodu B. Granice detekcije i kvantifikacije, ispravnost i preciznost (ponovljivost i intermedijarska preciznost) procijenjene su za obje spektrofotometrijske metode. Metode su uspješno primijenjene za analizu SBS-a u tabletama i kapsulama, a rezultati su statistički uspoređeni s referentnom metodom. Uobičajene pomoćne tvari u tabletama nisu interferirale tijekom određivanja. Ispravnost metoda potvrđena je i metodom standardne adicije.
Razvijena je i validirana ispravna, jednostavna i osjetljiva spektrofotometrijska metoda za određivanje antagonista H2-receptora: cimetidina (CIM), famotidina (FAM), nizatidina (NIZ) i ranitidin ...hidroklorida (RAN). Metoda se temelji na reakciji tih ljekovitih tvari s N-bromsukcinimidom (NBS). Višak N-bromsukcinimida određuje se nakon reakcije s p-aminofenolom s kojim daje ljubičasti produkt (max pri 552 nm). Smanjenje apsorpcijskog intenziteta (A) obojenog produkta, zbog prisutnosti ljekovite tvari korelirano je s njegovom koncentracijom u otopini uzorka. Proučavane su različite varijable koje utječu na reakciju. Linearno koncentracijsko područje za CIM, FAM, NIZ i RAN, s koeficijentom korelacije od 0,9988 do 0,9998, iznosi 830, 622, 625 odnosno 420 g mL1. Granice detekcije bile su 1,23, 1,02, 1,09 i 0,75 g mL1 za CIM, FAM, NIZ, odnosno RAN. Predložena metoda je uspješno primijenjena za analizu navedenih ljekovitih tvari i ljekovitih pripravaka. Nepreciznost od 0,7 do 1,2% i visoka ispravnost (analitički povrat između 98,5 i 102,4%), bez interferencije uobičajenih pomoćnih tvari, ukazuju na dobru analitičku metodu. Rezultati dobiveni predloženom metodom usporedivi su s rezultatima dobivenim službenom metodom.
Sastav i količina flavonoida određeni su u listovima i plodovima planike – Arbutus unedo L., sabranima na dva nalazišta u Hrvatskoj. Tankoslojnom kromatografijom utvrđena je prisutnost kvercitrina, ...izokvercitrina, hiperozida i rutina u svim uzorcima listova, dok su plodovi sadržavali samo izokvercitrin. Klorogenska kiselina je dokazana samo u nekim listovima. Količina flavonoida bila je uvjetovana biljnim organom, datumom, te zemljopisnim položajem mjesta sabiranja. Spektrofotometrijska je analiza pokazala da listovi sadrže veću količinu flavonoida (0.52-2.00%) u usporedbi s plodovima (0,10-0,29%).
PDF
