Določanje avidnosti protiteles proti ▫$[beta]▫$2-glikoproteinu I s kaotropno metodo
Grmovšek, Tanja, farmacevtka
Protitelesa proti ß2-glikoproteinu I smo doloèali s specifièno anti-ß2-GPI encimsko imunsko metodo na trdnem nosilcu, v 58 serumih bolnikov z vezivnotkivnimi bolezni. Stopnjo avidnosti ...imunoglobulinov razreda IgG smo doloèili glede na deleze vezave protiteles pri povisanih koncentracijah natrijevega klorida. 40 bolnikov je izkazovalo prisotnost samo nizko avidnih, 6 pa samo visoko avidnih avtoprotiteles proti ß2-glikoproteinu I razreda IgG. Prisotna avtoprotitelesa razreda IgM niso vplivala na doloèitev stopnje avidnosti IgG, vplivala pa so na doloèitev njihove koncentracije. Antifosfolipidna protitelesa so heterogena druzina protiteles razliène specifiènosti, povezana z sistemskimi vezivnotkivnimi obolenji in antifosfolipidnim sindromom. V telesu se vezejo na negativno nabite fosfolipide, pri èemer sodelujejo tudi razlièni kofaktorji. Veèina antifosfolipidnih protiteles, ki se pojavljajo v sklopu avtoimunskih bolezni, je usmerjenih proti plazemskemu ß2-glikoproteinu I. Ravno protitelesa proti ß2-glikoproteinu I razreda IgG naj bi pomembno vplivala na procese koagulacijein so verjetno neposredno povezana z nastankom tromboz. Spremljanjeavidnosti protiteles proti ß2-glikoproteinu I nam pomaga razloziti ezi nastanka kliniènih znakov antifosfolipidnega sindroma. Avidnost protiteles njihovo vlogo pri patogen je odvisna od bivalentne vezave IgG, njihove vezave na skrite epitope ß2-glikoproteina I ter od afinitete posameznih vezi, ki nastanejo med imunskim kompleksom. Afiniteta protiteles je genetièno nadzorovana in se zaradi zorenja tekom èasa poveèa tudi 1000 do 10 000-krat. Namen nasega dela je bil doloèiti avidnost avtoimunskih protiteles proti ß2-glikoproteinu I razreda IgG in ugotoviti, ali protitelesa IgM vplivajo na doloèitev njihove avidnosti. Avidnost smo doloèili na osnovi izmerjenih absorbanc preiskovanih vzorcev s specifièno encimsko imunsko metodo ELISA na trdnem nosilcu. Uporabili smo serume 58 bolnikov z vezivnotkivnimi obolenji, spovpreèno starostjo 38 let in razponom od 18 do 74 let. Kot antigen smo uporabili izoliran in afinitetno preèisèen humani ß2-glikoprotein I, adsorbiran na oksigenirano polistirensko povrsino, za doloèitev stopnje avidnosti pa kaotropni agens natrijev klorid (NaCl) narasèajoèih koncentracij.Z uporabo NaCl smo ugotovili, da sibke nekovalentne interakcije pomembno vplivajo na vezavo nizko avidnih protiteles, medtem ko na vezavo visoko avidnih protiteles na ß2-glikoprotein I nimajo posebne veljave. Veèina bolnikov z vezivnotkivnimi obolenji (47ž58) je vsebovala pretezno nizko avidnaIgG in le nekateri bolniki (4ž58) visoko avidna IgG. Zato smo protitelesproti ß2-glikoproteinu I razreda IgG na splosno opredelili kot nizkoavidna protitelesa. Na nastanek visoko avidnih protiteles vpliva zorenje afinitete in se verjetno pojavijo pri bolniki z daljsim avtoimunskim obolenjem. Vzorce, ki so izkazovali prisotnost izrazito razlièno avidnih protiteles, pa smo opredelili kot heterogene. Glede na rezultate smo tudi ugotovili, da koncentracija protiteles proti ß2-glikoproteinu I razreda IgG nibistveno vplivala na njihovo vezavo in doloèitev stopnje avidnosti. Na podlagi rezultatov visoko pozitivnih serumskih vrednosti IgM in njihovih izoliranih frakcij IgG smo ugotovili, da IgM ne vplivajo na avidnost, imajo papomembno vlogo pri doloèitvi njihove absolutne koncentracije. Koncentracije IgG so bile v izoliranih frakcijah (3ž3) nekajkrat visje kot v serumih, kar lahko kaze na to, da protitelesa razreda IgM v serumu izpodrinejo tista IgG, ki zaradi prenizke afinitete nimajo vpliva na avidnost, jih pa doloèimo v izolirani frakciji.
Vrsta gradiva - diplomsko delo
Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Grmovšek, T.], 2004
Bibliografsko gradivo je bilo uspešno dodano na polico.
Dodajanje bibliografskega gradiva na polico ni uspelo.
Gradivo je že na polici.
Trajna povezava
URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto
Faktor vpliva
Izdaja
Kategorija
Razvrstitev
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Izberite knjižnično izkaznico:
Baze podatkov,
v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov
Področje
Leto
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev
Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Citiranje
Funkcionalnost trenutno ni na voljo. Prosimo, poskusite kasneje.
