NUK - logo
E-viri
Recenzirano Odprti dostop
  • First evidence of the P-gly...
    Bošnjak, Ivana; Bielen, Ana; Babić, Sanja; Šver, Lidija; Popović, Natalija Topić; Strunjak-Perović, Ivančica; Čož-Rakovac, Rozelinda; Klobučar, Roberta Sauerborn

    Arhiv za higijenu rada i toksikologiju, 03/2014, Letnik: 65, Številka: 1
    Journal Article

    Multixenobiotic resistance (MXR) is an important mechanism of cellular efflux mediated by ATP binding cassette (ABC) transporters that bind and actively remove toxic substrates from the cell. This study was the first to identify ABC transporter P-glycoprotein (P-gp/ABCB1) as a representative of the MXR phenotype in earthworm (Eisenia fetida). The identified partial cDNA sequence of ABCB1 overlapped with ABCB1 homologues of other organisms from 58.5 % to 72.5 %. We also studied the effect of five modulators (verapamil, cyclosporine A, MK571, probenecid, and orthovanadate) on the earthworm’s MXR activity by measuring the accumulation of model substrates rhodamine B and rhodamine 123 in whole body tissue of the adult earthworm. MK571, orthovanadate, and verapamil significantly inhibited MXR activity, and rhodamine 123 turned out to better reflect MXR activity in that species than rhodamine B. Our results show that E. fetida can serve well as a test organism for environmental pollutants that inhibit MXR activity. Mehanizam multiksenobiotičke otpornosti (MXR) prisutan je u mnogim organizmima kao važan stanični detoksikacijski mehanizam. Posredovan je aktivnošću ABC prijenosnika koji vežu i aktivno izbacuju različite toksične tvari iz stanice. U ovom radu dani su podaci o molekularnoj identifikaciji ABC prijenosnika (eksportera) - P-glikoproteina (P-gp/Abcb1), kao jednog od predstavnika MXR fenotipa, u gujavici Eisenia fetida. Određen je djelomični slijed identificiranoga gena Abcb1, njegov predviđeni aminokiselinski slijed uspoređen je s ABCB1 homolozima iz drugih organizama i utvrđena je identičnost od 58,5 do72,5 %. Uz to, istraživali smo učinak pet modulatora (verapamil, ciklosporin, MK571, probenecid, ortovanadat) na aktivnost MXR mehanizma tih gujavica. Kako bismo potvrdili modulirajuće djelovanje istraživanih modelnih inhibitora na MXR mehanizam u E. fetida, mjerili smo akumulaciju modelnih supstrata rodamina B (RB) i rodamina 123 (R123) u tijelu spolno zrelih jedinki gujavica testom izlaganja na filtar papiru. Rezultati su pokazali da svi istraživani modulatori značajno inhibiraju MXR transportnu aktivnost. Naši podaci prvi upućuju na prisutnost P-gp/Abcb1 srodnih gena u gujavici E. fetida. Osim toga, ukazali smo na veliku važnost MXR-a kao specifičnog detoksikacijskog mehanizma koji omogućuje preživljavanje gujavica u onečišćenom okolišu.