ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
13.
Nivo izražanja in aktivnosti katepsina X v procesu diferenciacije nevroblastomske celične linije = Protein level and activity of cathepsin X in the process of neuroblastoma cell differentiation : magistrska naloga : enovit magistrski študij farmacija
Kladnik, Jana, farmacevtka
Katepsin X je cisteinska peptidaza, ki s proteolitično cepitvijo C-končnega dipeptida glikolitičnega encima γ-enolaze onemogoča njeno nevrotrofično delovanje. S tem se posredno vključuje v mehanizme ...diferenciacije nevronskih celic. V sklopu magistrske naloge smo z eksperimentalnim delom na celicah SH-SY5Y ugotavljali nivo izražanja in aktivnosti katepsina X v procesu diferenciacije nevroblastomske celične linije ter opredelili vlogo katepsina X v procesu diferenciacije. V prvem delu magistrske naloge smo postavili model diferenciacije celic SH-SY5Y, pri čemer smo s pogoji diferenciacije želeli spodbuditi nastanek posameznega nevronskega fenotipa. Najprej smo pokazali, da stimulacija celic SH-SY5Y z retinojsko kislino (RA) v koncentraciji 10 in 20 µM poveča izraščanje nevritov, ki so značilni za diferencirane celice. Ravno tako je izraščanje nevritov povečano pri stimulaciji celic z RA v kombinaciji s forbol 12-miristat 13-acetatom (PMA) oz. nevrotrofičnim dejavnikom možganskega izvora (BDNF) z namenom diferenciacije v posamezen nevronski fenotip, in sicer v dopaminergični oz. holinergični fenotip. Pokazali smo, da RA samostojno oz. v kombinaciji z BDNF spodbudi polimerizacijo F-aktina, kar vpliva na reorganizacijo aktinskega citoskeleta, ki je nujna za diferenciacijo, medtem ko dodatek PMA zavira z RA spodbujeno polimerizacijo. Z uporabo specifičnih nevronskih označevalcev smo delno potrdili nastanek posameznega nevronskega fenotipa. V nadaljevanju smo v diferenciranih celicah pokazali, da je aktivnost katepsina X povečana v celicah, tretiranih z RA samostojno kot tudi z RA v kombinaciji s PMA ali BDNF. Ravno tako je v celicah, diferenciranih v smeri dopaminergičnega in holinergičnega fenotipa, povečan proteinski nivo izražanja katepsina X. Skladno z nivojem izražanja je v celicah diferenciranih z RA v kombinaciji s PMA oz. BDNF povečana intenziteta fluorescence katepsina X, določena z uporabo konfokalnega mikroskopa. Opazna je lokalizacija katepsina X v izrastkih, ki nastanejo tekom diferenciacije celic SH-SY5Y, obenem pa je vidna ko-lokalizacija z γ-enolazo v rastnih conah nevritov. V zadnjem sklopu naloge smo vpletenost katepsina X v diferenciacijo potrdili z določanjem vpliva zaviranja delovanja katepsina X na proces diferenciacije. Uporabili smo ireverzibilni zaviralec katepsina X AMS36. Zaradi vidnih sprememb v morfologiji celic in povečanja izraščanja nevritov v prisotnosti zaviralca lahko sklepamo, da z zaviranjem delovanja katepsina X spodbujamo nadaljnjo diferenciacijo, kar nakazuje na pomembnost proteolitičnega uravnavanja γ-enolaze v procesu diferenciacije nevronov.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [J. Kladnik], 2023
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
