ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
  • Vpeljava metode za zasledovanje bakteriocinogenega seva Lactobacillus acidophilus LF221 v prebavnem traktu : diplomska naloga = The development of tracing method for the bacteriocinogenic strain Lactobacillus acidophilus LF221 in a gastrointestinal tract : graduation thesis
    Švagelj, Petra
    Vpeljali smo metodo za zasledovanje bakteriocinogenega seva Lactobacillus acidophilus LF221 v mešani mikrobni populaciji. Izbrali smo hibridizacijo kolonij s sevno specifično sondo, 69 bp dolgim ... fragmentom DNK, z delom zapisa za acidocin LF221 A. Najprej smo metodo preizkusili na čisti kulturi LF221 in postopek optimizirali. Spremljali smo način prenosa kolonij na membrano, dolžino lize kolonij na membrani ter količino sonde. Najboljše rezultate smo dobili pri direktnem prenosu kolonij na membrano, 72-urnem inkubiranju pri 37°C, 3-urni lizi in povečani koncentraciji hibridizacijske sonde. Nato smo specifičnost metode preizkusili na mešani mikrobni populaciji blata mišk, krmljenih s sevom LF221. Kolonije, zrasle na gojišču Rogosa smo prenesli na gojišče M17 in s pomočjo neposredne inhibicije indikatorske bakterije Lb. helveticus ATCC 15009 opravili prvo selekcijo izolatov kolonij z inhibitornim delovanjem. Kolonije z inhibitornim delovanjem iz vseh štirih skupin miši je bilo 237. Le-te smo prenesli na membrano in hibridizirali po optimalnem postopku. Dobili smo 14 izolatov s pozitivnim hibridizacijskim signalom, ki smo jih nadalje preverili z barvanjem po Gramu, mikroskopskim pregledom, testom protibakterijske aktivnosti z liso na agarju, določili fermentacijski vzorec z API 50 CHL testom in izvedli pomnožitev specifičnega fragmenta DNK z reakcijo PCR. Ugotovili smo, da je bil pri enem izolatu hibridizacijski signal nespecifičen, saj ni imel lastnosti seva LF221. Izoliran je bil iz blata kontrolne skupine mišk. Metoda je primerna za zasledovanje seva LF221 v mešani mikrobni populaciji oz. za sledenje njegove preživelosti v prebavnem traktu. Zaradi možnega nespecifičnega signala so potrebni potrditveni testi.
    Type of material - undergraduate thesis ; adult, serious
    Publication and manufacture - Ljubljana : [BF, Oddelek za živilstvo] : [P. Švagelj], 1998
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 2133368

Library/institution City Acronym For loan Other holdings
BF, Department of Food Science and Technology, Lj. Ljubljana BFZIV outside loan 3 cop.
loading ...
loading ...
loading ...