ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
13.
Ocena vpliva aktivacije in utišanja gena za glukokortikoidni receptor NR3C1 na izražanje gena za RANKL v modelu sesalskih celic = Assessment of impact of glucocorticoid receptor NR3C1 gene activation and silencing on RANKL gene expression in mammalian cell models : enoviti magistrski študijski program Farmacija
Zupan, Manca, farmacevtka
Glukokortikoidi so steroidni hormoni, ki uravnavajo številne fiziološke procese v telesu, njihovi sintetični analogi pa se uporabljajo za zdravljenje različnih obolenj, kot so vnetja in avtoimunske ...bolezni. Kot zdravila so terapevtsko zelo učinkoviti, njihova pomanjkljivost pa so številni stranski učinki, med katere sodi tudi z glukokortikoidi povzročena osteoporoza (angl. glucocorticoid-induced osteoporosis, GIO). Glukokortikoidi namreč zmanjšajo kostno formacijo in povečajo razgradnjo kostnega tkiva, kar vodi v izgubo kostne mase, poveča pa se verjetnost za zlome. Ker molekularni mehanizmi, ki vplivajo na razvoj GIO, še niso v celoti pojasnjeni, smo se v raziskovalnem delu osredotočili na eno iz med glavnih regulatornih molekul kostnega metabolizma, na ligand receptorja za aktivacijo jedrnega dejavnika [kapa]B, RANKL. Le-ta je pomemben aktivator osteoklastogeneze in s tem kostne resorpcije, zato nas je zanimalo, ali morda in kako glukokortikoidni receptor NR3C1 vpliva na izražanje gena za RANKL. Vpliv NR3C1 smo želeli proučiti na nivoju transkripcije in v ta namen uporabili modela dveh sesalskih celičnih linij - celice pljučnega tumorja A549 in osteosarkomske celice HOS. V prvem delu smo v celice A549 s transfekcijo vnesli različne količine plazmidnega konstrukta z zapisom za glukokortikoidni receptor (pCMV-NR3C1) in vsakič izmerili nivo izražanja RANKL z metodo kvantitativne verižne reakcije s polimerazo (qPCR). Statistično značilno zmanjšanje ekspresije RANKL je povzročila transfekcija celic s 1500 ng plazmidnega vektorja glede na celice, transfecirane s praznim plazmidom, ter transfekcija celic s 375 ng, 750 ng in 1500 ng pCMV-NR3C1 glede na netretirane celice. V nadaljevanju smo delu celic v gojišče dodali še deksametazon, vendar statistično signifikantnih razlik v izražanju gena po dodatku tega liganda za receptor NR3C1 nismo zaznali. V drugem delu smo želeli preveriti vpliv utišanja gena za glukokortikoidni receptor. Uporabili smo obe celični liniji A549 in HOS in jih transfecirali s siRNA, ki je usmerjala nukleaze k razgradnji mRNA za protein NR3C1. Tudi tokrat smo izražanje RANKL izmerili z metodo qPCR, vendar statistično značilnih rezultatov nismo dobili. Naši rezultati so pokazali, da aktivacija glukokortikoidnega receptorja NR3C1 v celicah A549 zmanjša izražanje RANKL, kar je bilo v nasprotju z našimi pričakovanji in predhodnimi ugotovitvami, da glukokortikoidni receptor povečuje aktivnost promotorja gena za RANKL. Ker zastavljenih hipotez nismo mogli potrditi, bo potrebno narediti še več raziskav o glukokortikoidni regulaciji RANKL. Predvsem bi bilo smotrno določiti točna zaporedja vezavnih mest za glukokortikoidni receptor na RANKL in preučiti vpliv dimerizacije receptorja na aktivacijo ter na represijo promotorja RANKL. Vsa nova odkritja bi tako lahko prispevala k razvoju zdravilnih učinkovin za z glukokortikoidi povzročeno osteoporozo oz. k razvoju bolj varnih protivnetnih učinkovin, ki ne bi imele tako negativnih vplivov na kostno tkivo.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [M. Zupan], 2020
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
