ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
13.
Razvoj in potrditev metode kapilarne gelske elektroforeze na čipu za določanje čistosti in nečistot terapevtskih monoklonskih protiteles = Development and qualification of chip-based capillary gel electrophoresis for determination of monoclonal antibody purity and fragmentation : Master's Study Programme Industrial Pharmacy
Plaznik, Nejc
Biološko podobna zdravila, kot so monoklonska protitelesa in fuzijski proteini, kažejo velik potencial v svetu industrijske farmacije. Njihov prodor na trg omogoča lažje dostopna zdravila enake ...kakovosti kot referenčna biološka zdravila. Uspešen razvoj teh zdravil temelji na natančni karakterizaciji končno razvitega rekombinantnega proteina ter hitri in učinkoviti analitiki velikega števila vzorcev, ki se proizvede tekom razvoja bioprocesa. Za analizo velikega števila vzorcev tekom razvoja si pomagamo z analitskimi tehnikami višjih zmogljivosti, ki omogočajo ovrednotenje večjega števila vzorcev v krajšem času. V okviru magistrske naloge smo razvili metodo kapilarne gelske elektroforeze na čipu, s katero bo možno določiti čistost in prisotnost nečistot večini terapevtskih monoklonskih protiteles. Pri razvoju smo se osredotočili na pripravo vzorcev, saj instrumentalnih nastavitev na takšnemu sistemu ni mogoče spreminjati. Vzorce smo pripravili pod reducirajoči in nereducirajoči pogoji. Ugotovili smo, da je alkilirno sredstvo N-etilmaleimid primernejši za pripravo nereduciranih vzorcev kot jodacetamid. Poleg ditiotreitola smo kot reducent za pripravo reduciranih vzorcev testirali tudi 2-merkaptoetanol. Noben od njiju se ni izkazal za opazno učinkovitejšega, zato smo se na podlagi organoleptičnih lastnosti slednjega odločili za prvega. Z metodo kapilarne gelske elektroforeze na čipu smo uspeli identificirati določene vrhove fragmentom v vzorcu, vendar kompleksnost monoklonskih protiteles onemogoča vpeljavo generičnega poimenovanja, ki bi zadostilo vsem testiranim vzorcem. Novo razvito metodo smo potrdili na štirih monoklonskih protitelesih in enem fuzijskem proteinu. Izvedli smo teste stabilnosti, mejo kvantifikacije, linearnosti, točnosti, ponovljivosti in robustnosti. S tem smo zagotovili, da metoda ustreza svojemu namenu. Kompleksnost terapevtskih proteinov ne omogoča, da bo metoda ustrezno delovala na vseh proteinih. V prihodnosti se lahko zgodi, da bo za določen terapevtski protein potrebno metodo nekoliko prilagoditi. Potrjeno metodo visoke zmogljivosti smo primerjali s konvencionalno metodo kapilarne gelske elektroforeze. Priprava vzorcev se pri obeh metodah nekoliko razlikuje, poleg tega so drugačne tudi instrumentalne nastavitve. Kljub temu smo opazili podobnost med obema metodama, predvsem v profilih ločbe, imenovanih elektroferogrami. Čistost terapevtskih proteinov in prisotnost določenih fragmentov se pri obeh metodah nekoliko razlikujejo, vendar sta kljub temu obe primerni za analitiko vzorcev iz različnih faz razvoja bioprocesa.
Type of material - master's thesis
; adult, serious
Publication and manufacture - Ljubljana : [N. Plaznik], 2019
It was not necessary to add the material to the shelf.
Bibliographic material was successfully added on shelf.
Adding bibliographical material on shelf was not successful.
Material is already on the shelf.
Permalink
URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year
Impact factor
Edition
Category
Classification
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
JCR
SNIP
Select the library membership card:
DRS,
in which the journal is indexed
Database name
Field
Year
Links to authors' personal bibliographies
Links to information on researchers in the SICRIS system
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
