ALL libraries (COBIB.SI union bibliographic/catalogue database)
  • Vrednotenje podskupin mišičnih matičnih celic pri bolnikih z osteoporozo = Characterisation of adult skeletal muscle-derived stem cell subpopulations in osteoporosis patients : magistrski študijski program Laboratorijska biomedicina
    Mrhar, Liza
    Mišične matične celice (MuSC) predstavljajo tkivno specifično in heterogeno populacijo matičnih celic v skeletno-mišičnem sistemu. Osrednjo vlogo pri regeneraciji poškodovanih mišičnih vlaken ... pripisujemo satelitnim mišičnim matičnim celicam (SC), obstajajo pa tudi druge podskupine MuSC, ki so v regeneracijski proces vključene posredno preko izločanja različnih sekretornih molekul, ki preoblikujejo mikrookolje na mestu poškodbe. Poleg tega pa naj bi preko izločanja različnih miokinov in adipokinov MuSC vplivale tudi na kostno tkivo, pri čemer naj bi večja adipogena sposobnost MuSC prispevala k razvoju in/ali poslabšanju osteoporotičnega procesa pri bolnikih z osteoporozo. Natančna vzročno-posledična povezava med sarkopenijo, osteoporozo ter vlogo MuSC še ni poznana. Namen magistrskega dela je bil ugotoviti, ali se lastnosti MuSC razlikujejo med skupino zdravih starejših preiskovancev in skupino bolnikov z osteoporozo. V ta namen smo MuSC iz mišic osteoporoznih in zdravih starostnikov primerjali po naslednjih parametrih: sposobnost tvorbe kolonij (CFU), čas populacijskih delitev (PDT), prisotnost površinskih označevalcev mezenhimskih matičnih celic (MSC) (CD73, CD90 in CD105), sposobnost adipogene, osteogene in miogene diferenciacije ter v izražanju nekaterih genov, povezanih z različnimi podskupinami MuSC (PDGFR[alfa], PDGFR[beta], PW1, CD56, Pax7), gena, povezanega s klonogeno sposobnostjo MuSC (Gremlin1) in nekaterih genov, vključenih v preoblikovanje zunajceličnega matriksa (ECM) (MMP-1, MMP-3, MMP-9, TIMP-3). CFU smo določili kot razmerje med številom nastalih kolonij in številom vseh nasajenih celic posameznega vzorca, za določitev PDT smo določili število celic v dveh časovnih intervalih v času logaritemske faze rasti celic. Adipogeni potencial smo določili s histokemijskim barvanjem nastalih adipocitov z barvilom Oil Red O po 21-dnevnem gojenju celic v adipogenem diferenciacijskem gojišču. Osteogeni potencial smo določili s histokemijskim barvanjem nastalih mineraliziranih nodulov z barvilom Alizarin Red S po 21-dnevnem gojenju v osteogenem diferenciacijskem gojišču. Miogeni potencial pa smo določili z imunohistokemijskim barvanjem nastalih desmin+ diferenciaranih mišičnih celic po 7-dnevnem gojenju na 0,2-% želatini v miogenem diferenciacijskem gojišču. Analizo izražanja genov smo izvedli s kvantitativno verižno reakcijo s polimerazo v realnem času (qPCR). Pridobljeni rezultati kažejo, da ni razlik v CFU in PDT med vzorci izoliranimi iz pacientov z osteoporozo in zdravimi starejšimi preiskovanci. So pa razlike prisotne na nivoju adipogene in osteogene diferenciacije. Višjo stopnjo tako adipogene kot tudi osteogene diferenciacije izkazujejo kolonije, izolirane iz vzorcev pacientov z osteoporozo, kar nakazuje na potencialno dvojno vlogo MuSC pri osteoporotičnem procesu. Prav tako na razlike med skupinama nakazuje analiza izražanja genov. V skupini oseb zdravih starejših preiskovancev prevladuje podskupina PW1+/Pax7- intersticijskih mišičnih matičnih celic (PIC), ki je v skupini oseb z osteoporozo odsotna. Prav tako so razlike prisotne v izražanju genov, vključenih v preoblikovanje ECM. Rezultati nakazujejo na nižje izražanje gena TIMP3 in MMP1 v skupini pacientov z osteoporozo v primerjavi z zdravimi starejšimi preiskovanci, na drugi strani pa je pri pacientih z osteoporozo nekoliko višje izražanje genov MMP3 in MMP9. Na osnovi rezultatov lahko zaključimo, da se izolirani vzorci MuSC med osebami z diagnosticirano osteoporozo in zdravimi starejšimi preiskovanci v CFU in PDT statistično ne razlikujejo. Pride pa do razlik na nivoju adipogenega in osteogenega diferenciacijskega potenciala MuSC, ki se pri osteoporozi poveča, kar nakazuje na dvojno vlogo MuSC pri tej bolezni. Razlik v sposobnosti miogene diferenciacije nismo uspeli niti dokazati niti ovreči. Dokazali pa smo razlike v deležu podskupin MuSC in v izražanju genov, povezanih s preoblikovanjem ECM med obema skupinama preiskovancev. V skupini bolnikov z osteoporozo je odsotna podskupina PIC, ki v skupini zdravih preiskovancev predstavlja 50 % vseh izoliranih kolonij. Razlike v preoblikovanju ECM pa nakazujejo na višje izražanje gena MMP3 in MMP9 pri pacientih z osteoporozo.
    Type of material - master's thesis ; adult, serious
    Publication and manufacture - Ljubljana : [L. Mrhar], 2021
    Language - slovenian
    COBISS.SI-ID - 70058755

Library/institution City Acronym For loan Other holdings
Public Library of Ribnica Ribnica SIKRIB outside loan 1 cop.
loading ...
loading ...
loading ...

Shelf entry