Faculty of Pharmacy, Lj. (FFALJ)
-
Razvoj mlečnokislinske bakterije Lactococcus lactis s sposobnostjo dostave proteinskih ligandov receptorja za interlevkin 23 = Development of lactic acid bacterium Lactococcus lactis with the ability to deliver interleukin 23 receptor binding proteins : enoviti magistrski študij farmacijaBenko, Anja, farmacevtkaKronično vnetno črevesno bolezen (KVČB) delimo na ulcerozni kolitis ter Crohnovo bolezen. Za obe obliki je vzrok prekomerna aktivacija imunskega odziva v sluznici črevesja, pri čemer pomembno vlogo ... igra citokinska os IL-23/Th17. Trenutno zdravljenje poteka sistemsko z aminosalicilati, imunosupresivi, kortikosteroidi, pri najhujših oblikah pa s protitelesi proti različnim tarčam v procesu vnetnega odziva. Ker imajo protitelesa visoko ceno, veliko neželenih učinkov ter pri velikem deležu bolnikov niso učinkovita, poteka razvoj majhnih proteinov z visoko afiniteto vezave, specifičnostjo ter sposobnostjo inhibicije vnetja. V okviru magistrskega dela smo uporabili rekombinantne proteine REX009, REX115 in REX125 s potrjenim antagonističnim delovanjem na receptor za IL-23 in jih nadgradili s tarčno dostavo. Kot dostavni sistem smo izbrali mlečnokislinske bakterije Lactococcus lactis, saj imajo status GRAS (Generally recognized as safe) in pripomorejo k vzpostavitvi normalne mikrobiote v sluznici črevesja. Cilj je bil pripraviti bakterije s sposobnostjo izločanja proteinov REX v gojišče in bakterije s sposobnostjo površinske predstavitve proteinov REX. Za pripravo plazmidov z genskimi konstrukti REX smo uporabili plazmide pNZ8148, pSDBA3b in pGEM-T Easy. Končni plazmidi so bili pripravljeni v ogrodju plazmida pSDBA3b, ki omogoča z nizinom nadzorovano izražanje genov, z dodanimi geni za signalni peptid Usp45, označevalni peptid Flag, protein REX ter površinsko sidro cAcmA. V procesu priprave končnih konstruktov smo genske fragmente pomnoževali s PCR, jih ločevali z agarozno gelsko elektroforezo ter jih v plazmide vstavljali z restrikcijo in ligacijo. Plazmide smo analizirali s postopkom PCR na kolonijah in z določanjem nukleotidnega zaporedja ter s preverjenimi transformirali bakterije. Izražanje proteinov REX smo preverili po ločevanju s postopkom NaDS PAGE, in sicer s metodama prenosa po westernu ter z barvanjem z barvilom Commassie Brilliant Blue. Izločanje proteinov REX ter obseg njihove površinske predstavitve smo preverili s pretočno citometrijo. Potrdili smo uspešno vezavo na receptor za IL-23 za vse površinsko predstavljene proteine REX, pri čemer smo opazili najmočnejšo vezavo s proteinom REX125. Ob tem smo ugotovili tudi negativen vpliv sklopitve z označevalnim peptidom Flag na obseg vezave. Dodatno smo opravili modificiran test ELISA, s katerim smo potrdili prisotnost izločenih proteinov REX v gojišču in njihovo sposobnost vezave na imobiliziran receptor IL-23R, pri čemer je največji obseg vezave izkazal protein REX009. V raziskavi smo tako potrdili zmožnost rekombinantnih bakterij za dostavo vezalcev receptorja IL-23R, njihovo terapevtsko učinkovitost pa bo potrebno ovrednotiti na živalskem modelu KVČB.Type of material - master's thesis ; adult, seriousPublication and manufacture - Ljubljana : [A. Benko], 2019Language - slovenianCOBISS.SI-ID - 4863089
Author
Benko, Anja, farmacevtka
Other authors
Berlec, Aleš
Topics
Imunski odziv |
Kronična vnetna črevesna bolezen |
Metapodatki |
Lactococcus lactis |
površinska predstavitev |
rekombinantni proteini |
nadzarovano izražanje genov |
proteini REX |
western prenos
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Call number – location, accession no. ... |
Copy status | Reservation |
---|---|---|
Knjižnica emšf 0000000616 BENKO ANJA Razvoj 0000000806 IN: 0016468 Knjižnica emšf 616 BENKO ANJA Razvoj 806 IN: 0016468 |
available - reading room
|
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
![loading ... loading ...](themes/default/img/ajax-loading.gif)
Shelf entry
Permalink
- URL:
Impact factor
Access to the JCR database is permitted only to users from Slovenia. Your current IP address is not on the list of IP addresses with access permission, and authentication with the relevant AAI accout is required.
Year | Impact factor | Edition | Category | Classification | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Select the library membership card:
If the library membership card is not in the list,
add a new one.
DRS, in which the journal is indexed
Database name | Field | Year |
---|
Links to authors' personal bibliographies | Links to information on researchers in the SICRIS system |
---|---|
Benko, Anja, farmacevtka | ![]() |
Berlec, Aleš | 24257 |
Source: Personal bibliographies
and: SICRIS
Select pickup location:
Material pickup by post
Delivery address:
Address is missing from the member's data.
The address retrieval service is currently unavailable, please try again.
By clicking the "OK" button, you will confirm the pickup location selected above and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the above pickup location and delivery address, and complete the reservation process.
By clicking the "OK" button, you will confirm the address selected above and complete the reservation process.
Notification
Automatic login and reservation service currently not available. You can reserve the material on the Biblos portal or try again here later.
Subject headings in COBISS General List of Subject Headings
Select pickup location
The material from the parent unit is free. If the material is delivered to the pickup location from another unit, the library may charge you for this service.
Pickup location | Material status | Reservation |
---|
Reservation in progress
Please wait a moment.
Reservation was successful.
Reservation failed.
Reservation...
Membership card:
Pickup location: