VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Primerjava izražanja označevalcev s hrustancem povezanih genov v človeških primarnih hondrocitih, gojenih v različnih rastnih gojiščih = Comparison of cartilage-associated genes expression in human primary chondrocytes cultured in different growth media : magistrski študij laboratorijska biomedicina
    Mrhar, Tiona
    Hrustanec je robustno vezivno tkivo, ki ga najdemo po celotnem telesu in se zaradi svojih lastnosti in kompleksne sestave po poškodbi izredno težko obnavlja. Glavne celice, ki jih najdemo v hrustancu ... so hondrociti, ki igrajo posebno vlogo pri razvoju, ohranjanju in obnovi zunajceličnega matriksa. Na hondrocite smo se v našem raziskovanju osredotočili tudi sami. Namen magistrske naloge je ugotoviti vpliv različnih rastnih gojišč in vnetja na izražanje s hrustancem povezanih genov v primarnih hondrocitih. Meritve izražanja preiskovanih genov smo izvedli na 43 vzorcih primarnih hondrocitov pridobljenih iz kolenskega hrustanca 5 različnih pacientov. Tkivni vzorci so bili pridobljeni med popolno ali delno kolensko artroplastiko na Oddelku za ortopedsko kirurgijo Univerzitetnega kliničnega centra Maribor in Splošne bolnišnice Celje. Iz vzorcev so izolirali primarne hondrocite ter jih gojili v različnih gojiščih (S1-S6), katerih sestava je zaradi postopka prijave patenta zaupne narave. Pri nekaterih celicah so z dodatkom dejavnika tumorske nekroze α (TNF-α) v gojišču ustvarili vnetno okolje. Po gojenju so izolirali celokupno RNK. To smo nato z reverzno transkripcijo prepisali v cDNK, ki smo jo uporabili za določitev izražanja s hrustancem povezanih genov z metodo kvantitativne verižne reakcije s polimerazo (qPCR). Določali smo izražanje hondrocitnih genov (SOX-9), hrustančnih genov (COL1A1, COL1A2, COL2A1, COL11A2, COL9A2, COL3A1, ACAN1, COMP, VCAN, DCN, FMOD, BGN, SNORC, RUNX2), genov signalne poti MAPK (MAP3K1, MAPK1, MAP2K1, MAPK3), ter ostalih genov (BAX, ALP, SPP1, PPARG). Zastavili smo si tri hipoteze: prvo, ki predpostavlja, da se izražanje preiskovanih genov razlikuje med hondrociti gojenimi v različnih rastnih gojiščih v fizioloških pogojih, drugo, ki predpostavlja, da se izražanje preiskovanih genov razlikuje med hondrociti gojenimi v različnih rastnih gojiščih v vnetnih pogojih ter tretjo, ki predpostavlja da se izražanje preiskovanih genov razlikuje med hondrociti gojenimi v istih rastnih gojiščih v vnetnih in ne-vnetnih pogojih. Vse tri hipoteze smo delno sprejeli. V fizioloških pogojih smo ugotovili razlike v izražanju 4 genov med gojišči, in sicer BGN (med S4 in S5), DCN (med S1 in S4), MAP3K1 (med S4 in S5 ter S4 in S6) in ALP (med kombinacijami vseh 6 gojišč). V vnetnih pogojih smo opazili zanimivo razliko v izražanju gena BAX med gojišči S1, S3 in S4. Pri preučevanju razlik med vnetnimi in fiziološkimi pogoji, pa smo ugotovili statistično značilno razliko v izražanju gena BAX v rastnem gojišču S1. Naši rezultati tako dokazujejo različen vpliv preiskovanih gojišč na primarne hondrocite na molekulskem nivoju. Za potrditev ugotovljenih razlik pa bi bile potrebne nadaljnje študije preiskovanih molekul na proteinskem nivoju. Za določitev potenciala preiskovanih rastnih gojišč za regeneracijo hrustanca pa bi bilo potrebno izvesti še funkcionalne študije na primarnih hondrocitih.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [T. Mrhar], 2022
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 110701315

Knjižnica/institucija Kraj Akronim Za izposojo Druga zaloga
Fakulteta za farmacijo, Ljubljana Ljubljana FFALJ v čitalnico 1 izv.
loading ...
loading ...
loading ...