VSE knjižnice (vzajemna bibliografsko-kataložna baza podatkov COBIB.SI)
  • Sinteza in biološko vrednotenje himernih razgrajevalcev butirilholin esteraze z distančniki na osnovi piperidina [Elektronski vir] = Synthesis and biological evaluation of butyrylcholinesterase proteolysis-targeting chimeras with piperidine-based linkers : enoviti magistrski študijski program Farmacija
    Kocjančič, Metka
    V zadnjih letih pridobivajo pristopi ciljane razgradnje proteinov vse večjo pozornost kot alternativa klasičnim reverzibilnim in ireverzibilnim zaviralcem. Ključna razlika je v opustitvi ... tradicionalnega principa zasedenosti vezavnega mesta (angl. occupancy-driven) v prid farmakološkega modela dogodka (angl. event-driven). Ta model omogoča proteolitično razgradnjo tarčnega proteina, pri čemer ligandi delujejo katalitsko, kar omogoča doseganje želenih farmakoloških učinkov že pri zelo nizkih koncentracijah. Trenutno najbolj raziskana in razvita tehnologija ciljane razgradnje proteinov je uporaba molekule PROTAC (angl. proteolysis-targeting chimera), pri čemer je bil njihov razvoj do sedaj usmerjen predvsem v zdravljenje rakavih bolezni. V magistrski nalogi smo pristop razširili na nekoliko manj raziskano področje tarčne razgradnje proteinov – na nevrodegenerativne bolezni, s poudarkom na Alzheimerjevi bolezni (AB). Po holinergični hipotezi je upad kognitivnih funkcij pri AB odraz propada holinergičnih nevronov v centralnem živčnem sistemu, kar poudarja pomembno vlogo butirilholin esteraze (BChE), serinske hidrolaze, ki razgradi živčni prenašalec acetilholin, pri napredovanju te bolezni. Sintetizirali smo 11 molekul PROTAC, ki preko različnih distančnikov na osnovi piperidina povezujejo ligand za tarčni protein – BChE ter ligand za ligazo E3 cereblon. Sinteza je potekala v več stopnjah, pri čemer smo istovetnost produktov potrdili z masno spektrometrijo in jedrno magnetno resonanco. Biološka testiranja molekul PROTAC so vključevala določitev zaviralne aktivnosti na BChE in sorodni acetilholin esterazi ter oceno njihove sposobnosti razgradnje BChE v celicah SH-SY5Y s prenosom Western. Pri koncentraciji 0,1 µM smo pri večini ovrednotenih spojin že po 6 h opazili zmanjšano izražanje BChE, ki pa se je po 24 h povrnilo na prvotno raven. Pri 10-krat višji koncentraciji spojine, 1 µM, pa je bil učinek obrnjen – v prvih 6 h razgradnje BChE ni bilo zaznati, medtem ko je po 24 h izražanje BChE padlo tudi za 30 % vrednosti kontrole. Kljub temu da so vse spojine izkazovale zaviralno aktivnost na hBChE v nanomolarnem območju, le-ta ni zadosten pogoj za uspešno razgradnjo tarčnega encima. V nadaljevanju bi bilo potrebno potrditi tako časovno odvisnost razgradnje BChE pri več časovnih točkah, kot tudi koncentracijsko odvisnost razgradnje, kar bi dalo bolj jasen odgovor o primernosti pripravljenih himernih molekul PROTAC za nadaljnji razvoj.
    Vrsta gradiva - magistrsko delo ; neleposlovje za odrasle
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [M. Kocjančič], 2025
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 232845315

    Povezava(-e):

    https://repozitorij.uni-lj.si/IzpisGradiva.php?id=168470

Vnos na polico