Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
  • Ocena analiznega postopka merjenja koncentracije apolipoproteina E v rakastem tkivu = An estimation of the immunonephelometric method for quantitative measurement of apolipoprotein E in cancer tissue : diplomska naloga
    Koradej, Vesna
    Apolipoprotein (apo) E, protein sestavljen iz 299 aminokislin, je strukturni element s trigliceridi bogatih lipoproteinov. Njegova sinteza poteka v jetrih (hepatociti), mozganih (astrociti) in mnogih ... drugih celicah. Apo E je v organizmu udelezen v stevilnih procesih in presnovnih potehČ v intravaskularnipresnovi lipidov in lipoproteinov, je ligand za mnoge receptorje, sodeluje pri imunoregulaciji, regeneraciji in remodulaciji nevronov ter pri proliferaciji celic gladkih misic.Namen nasega dela je bil oceniti uporabnost imunokemiènega nefelometriènega postopka proizvajalca Dade Behring (N Apolipoprotein E test kit, Dade Behring, Marburg GmbH, Nemèija) za merjenje koncentracij apo E v tkivih in ga po potrebi optimatizirati. Podatkovo uporabi omenjenega analiznega postopka nismo zasledili nikjer v literaturi, pozanimali pa smo se tudi pri proizvajalcu, kjer so nam pojasnili,da z omenjenim doloèanjem proteinov v tkivih nimajo izkusenj. Dokazati smo zeleli domnevo, da je omenjeni analizni potopek, ki je sicer namenjen merjenju koncentracij apo E v serumu, primeren tudi za merjenje koncentracije apo E v tkivih. Na podlagi z eksperimentalnim delom pridobljenihizkusenj ugotavljamoČ 1.) manjsi kosèek tkiva iz tkiva zamrznjenega v viali (-170ŽC) najlazje dobimo z drobljenjem (lomljenjem) z nozevo konicoč èe tkivo lahko odtajamo, je bolje oddeliti veèji prerez (rezino) tkivač 2.) dodatek albumina in heparina izluzevalni raztopini izboljsa izolacijo apo E iz tkivač 3.) homogenizacija tkiva v izluzevalni raztopini z ultrazvokom izboljsa izolacijo apo E iz tkivač 4.) postopek ni primeren za merjenje apo E v tkivih z visoko vsebnostjo lipidov, na primer v masèevjuč 5.) zaradi nehomogenosti tkiva priporoèamo merjenje koncentracij apoE v veèjih prerezih (rezinah) tkivač 6.) rezultate meritev je najbolje podajati kot porast meritvenega signala v bistrem supernatantu izluzene raztopine v reakcijskem èasuč 7.) meritvene signale moramo preraèunati na izluzevanje 50 mg tkiva v 300 ŽL izluzevalne raztopine.Koncentracije apo E smoizmerili v rakastem in zdravem tkivu stirih bolnikov s pljuènim rakom in ugotovili, da so koncentracije apo E v sredisèu in na periferiji tumorja visjekot v zdravem (kontrolnem) pljuènem tkivu ali v masèevju ob pljuènem krilu.Zakljuèujemo, da je imunokemièen nefelometrièen postopek proizvajalca Dade Behring primeren analizni postopek za merjenje koncentracij apo E v tkivih. Postopek je uporaben za prouèevanje tkivne vloge apo E v etiologiji razliènih bolezni, na primer pri raku.
    Vrsta gradiva - diplomsko delo
    Založništvo in izdelava - Ljubljana : [Koradej, V.], 2005
    Jezik - slovenski
    COBISS.SI-ID - 1690481

Signatura – lokacija, inventarna št. ... Status izvoda Rezervacija
Knjižnica
dp 0000000061 Koradej Vesna Ocena
IN: 0008146 Knjižnica
dp 61 Koradej Vesna Ocena
IN: 0008146 		prosto - za čitalnico
loading ...
loading ...
loading ...

Vnos na polico