Fakulteta za farmacijo, Ljubljana (FFALJ)
-
Kloniranje in izražanje bakteriofagnih endolizinov ter proteinskih vezalcev toksinov Clostridioides difficile = Cloning and expression of bacteriophage endolysins and protein binders of Clostridioides difficile toxins : univerzitetni študijski program KozmetologijaCelan, ZalaZdravljenje okužbe z bakterijo Clostridioides difficile zaradi odpornosti proti antibiotikom predstavlja veliko problematiko v sodobnem svetu. Do okužb prihaja zlasti v bolnišničnem okolju ob uporabi ... antibiotikov, ki izzovejo spremembe v sestavi črevesne mikrobiote. C. difficile povzroča vnetja in krvavitve iz debelega črevesa (kolitis), ki vodijo v hudo obliko driske in se lahko končajo tudi s smrtjo. Poglavitna virulentna dejavnika C. difficile sta eksotoksina TcdA in TcdB, glukoziltransferazi, ki delujeta na GTPaze iz družine Rho, s čimer oslabita tesne in fokalne stike v sluzničnem epiteliju. Rekombinantni probiotiki predstavljajo bioalternativni protimikrobni pristop za zdravljenje okužbe s C. difficile in so tematika mnogih (pred)kliničnih raziskav. Okužbo s C. difficile bi lahko zmanjšali ali preprečili s kombinacijo uporabe bakteriofagnih endolizinov, selektivnih do C. difficile, in specifičnih proteinskih vezalcev toksinov TcdA ter TcdB, ki bi se izražali na površini rekombinantne probiotične bakterije Lactococcus lactis. V diplomski nalogi smo se osredotočili na pridobitev vezalcev toksinov (iz skupin afimerov in DARPinov; samih ali v fuziji s C-končno domeno sidrnega proteina AcmA, ki omogočajo vezavo na celično steno L. lactis,) ter endolizina z uporabo ekspresijskega sistema Escherichia coli. V prvem delu naloge smo pripravili ekspresijske vektorje: v modificiran plazmid pET28c (pET28c-HTF), smo vstavili sintezne gene za izbrane proteine. Ekspresijski sev E. coli NiCo21(DE3) smo transformirali s plazmidi in izvedli testno izražanje rekombinantnih proteinov po indukciji z IPTG ter s poliakrilamidno gelsko elektroforezo v prisotnosti natrijevega dodecilsulfata kvalitativno ocenili količino rekombinantnih produktov. Ugotovili smo, da vezalci eksotoksinov v fuziji z AcmA niso topni. Na podlagi rezultatov smo za izražanje v povečanem obsegu izbrali le topne proteine (tj. vezalce eksotoksinov brez AcmA in endolizina). V drugem delu diplomske naloge smo rekombinantne proteine izolirali s kovinsko-kelatno afinitetno kromatografijo ter jih koncentrirali z ultrafiltracijo. Ugotovili smo, da se fuzijski proteini vezalcev eksotoksinov TcdA/TcdB s sidrno domeno AcmA nahajajo v netopni frakciji lizata in se pri uporabljenih pogojih izražanja odlagajo v inkluzijska telesca.Vrsta gradiva - diplomsko delo ; neleposlovje za odrasleZaložništvo in izdelava - Ljubljana : [Z. Celan], 2023Jezik - slovenskiCOBISS.SI-ID - 173734915
Avtor
Celan, Zala
Drugi avtorji
Bratkovič, Tomaž, farmacevt, 1978- |
Bozovičar, Krištof
Teme
Bakterijska rezistenca |
Rekombinantni proteini |
afimeri |
Clostridioides difficile |
čiščenje |
DARPini |
endolizini |
izražanje |
vezalci eksotoksinov
Signatura – lokacija, inventarna št. ... |
Status izvoda | Rezervacija |
---|---|---|
Knjižnica UNK 0000000615 CELAN ZALA Kloniranj 0000000305 IN: 0017918 Knjižnica UNK 615 CELAN ZALA Kloniranj 305 IN: 0017918 |
prosto - za čitalnico
|
Vnos na polico
Trajna povezava
- URL:
Faktor vpliva
Dostop do baze podatkov JCR je dovoljen samo uporabnikom iz Slovenije. Vaš trenutni IP-naslov ni na seznamu dovoljenih za dostop, zato je potrebna avtentikacija z ustreznim računom AAI.
Leto | Faktor vpliva | Izdaja | Kategorija | Razvrstitev | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP | JCR | SNIP |
Baze podatkov, v katerih je revija indeksirana
Ime baze podatkov | Področje | Leto |
---|
Povezave do osebnih bibliografij avtorjev | Povezave do podatkov o raziskovalcih v sistemu SICRIS |
---|---|
Celan, Zala | |
Bratkovič, Tomaž, farmacevt, 1978- | 23598 |
Bozovičar, Krištof | 53738 |
Vir: Osebne bibliografije
in: SICRIS
Izberite prevzemno mesto:
Prevzem gradiva po pošti
Naslov za dostavo:
Med podatki člana manjka naslov.
Storitev za pridobivanje naslova trenutno ni dostopna, prosimo, poskusite še enkrat.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrano prevzemno mesto in naslov za dostavo ter dokončali postopek rezervacije.
S klikom na gumb "V redu" boste potrdili zgoraj izbrani naslov za dostavo in dokončali postopek rezervacije.
Obvestilo
Trenutno je storitev za avtomatsko prijavo in rezervacijo nedostopna. Gradivo lahko rezervirate sami na portalu Biblos ali ponovno poskusite tukaj kasneje.
Gesla v Splošnem geslovniku COBISS
Izbira mesta prevzema
Gradivo iz matične enote je brezplačno. Če je gradivo na mesto prevzema dostavljeno iz drugih enot, lahko knjižnica to storitev zaračuna.
Mesto prevzema | Status gradiva | Rezervacija |
---|
Rezervacija v teku
Prosimo, počakajte trenutek.
Rezervacija je uspela.
Rezervacija ni uspela.
Rezervacija...
Članska izkaznica:
Mesto prevzema: